三種山核桃屬植物組織培養(yǎng)技術(shù)研究.pdf

1、本文選用美國山核桃、浙江山核桃、湖南山核桃實生苗和成年樹的葉片和帶芽莖段為試驗材料。文中對最佳培養(yǎng)基篩選、外植體選擇、莖段培養(yǎng)、葉片培養(yǎng)及褐化等問題做了較全面系統(tǒng)的試驗研究。主要結(jié)果如下:
　　 1.美國山核桃組織培養(yǎng)中以葉片為試材進(jìn)行培養(yǎng)時,應(yīng)選擇幼齡葉；葉片培養(yǎng)的最佳培養(yǎng)基為DKW；葉片培養(yǎng)褐化最低激素組合為2,4-D1.0mg/L+IBA2.0mg/L+6-BA0.02mg/L。
　　 2.美國山核桃組織培養(yǎng)預(yù)處理

2、試材防治褐化試驗中,采用2％的Na292O3溶液浸泡試材20.30min常規(guī)滅菌后,再將試材浸泡在經(jīng)高壓滅菌后的0.2％Na2S2O3溶液中,接種時直接取出防治褐化效果最佳；用濃度為300mg/L的PVP預(yù)處理試材5min,試材褐化率最低。
　　 3.美國山核桃葉片培養(yǎng)抑制褐變反應(yīng)試驗中,將接種后的培養(yǎng)基放入4℃的冰箱中冷藏7d,然后拿到培養(yǎng)室中繼續(xù)培養(yǎng),防治褐化效果最好:在培養(yǎng)基中添加5.0mg/LNa2S2O3或濃度為60m

3、g/L以上的PVP,試材褐化率最低。
　　 4.在防治污染試驗中,用青霉素預(yù)處理美國山核桃葉片并且在培養(yǎng)基中添加4g/L多菌靈,可以有效的控制試材的污染率。
　　 5.浙江山核桃莖段培養(yǎng)中,最佳芽生長分化和愈傷組織誘導(dǎo)的培養(yǎng)基及激素組合為DKW+IBA2.0mg/L+KT8.0mg/L；葉片培養(yǎng)的最佳培養(yǎng)基及激素組合為WlPM+NAA2.0mg/L+6-BA1.0mg/L。湖南山核桃莖段芽生長分化最佳培養(yǎng)基及激素組合為:

4、DKW+IBA0.5mg/L+KT2.0mg/L；莖段愈傷組織誘導(dǎo)最佳激素組合為:IBA2.0mg/L+KT8.0mg/L；葉片培養(yǎng)的最佳培養(yǎng)基及激素組合為:WPM+NAA1.5mg/L+6.BA3.0mg/L。兩種山核桃組織培養(yǎng)時培養(yǎng)基中添加的最適蔗糖濃度均為30g/L。
　　 6.莖尖培養(yǎng)褐化防治試驗表明:對于浙江山核桃和湖南山核桃來說,5.0mg/LNa2S2O3添加到培養(yǎng)基中均可有效抑制莖尖褐化。
　　 7.在浙

5、江山核桃和湖南山核桃葉片組織培養(yǎng)褐化防治中,在培養(yǎng)基中添加的最佳抗氧化劑及其濃度為:Na2S2O32.0mg/L。在PVP預(yù)處理控制褐化試驗中,濃度為200mg/L以上的PVP浸泡浙江山核桃葉片組織培養(yǎng)抑制褐變反映效果最佳:濃度為300mg/L以上的PVP浸泡湖南山核桃葉片抑制褐化效果最好。
　　 8.繼代培養(yǎng)中,適合浙江山核桃和湖南山核桃的培養(yǎng)基為DKW:最佳繼代激素組合,浙江山核桃為IBA1.0mg/L+6-BA0.2mg/