2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、為了探討甲基結合蛋白TaMBD6在小麥生長發(fā)育中過程中的生物學功能,本文克隆了小麥TaMBD6三個部分同源基因的cDNA全長,利用中國春缺體-四體材料進行了染色體定位,并系統(tǒng)分析了TaMBD6的三個部分同源基因在小麥春化處理及生長發(fā)育過程中的表達特性,主要研究內(nèi)容如下:
   1、通過RACE技術克隆了TaMBD6三個部分同源基因的cDNA全長,根據(jù)染色體定位結果,分別命名為TaMBD6-5A、TaMBD6-5B和TaMBD6-

2、5D。序列分析顯示,其cDNA全長分別為832 bp、832 bp和836 bp。ORF均為564 bp,在編碼區(qū)有5個核苷酸差異,均為點突變。三個部分同源基因的5’UTR分別為90 bp,82bp和94bp;3’UTR分別為178 bp,186bp和174 bp。進一步分析發(fā)現(xiàn),在5’UTR區(qū)域,TaMBD6-5A和TaMBD6-5B相對于TaMBD6-5D分別缺失4 bp和12 bp,另有14個和9個堿基的變異;TaMBD6-5A相

3、對于TaMBD6-5B有5個堿基的變異;對3’UTR來說,TaMBD6-5B比TaMBD6-5A和TaMBD6-5D多8 bp,其中包含2個AAG重復。以上結果表明TaMBD6三個部分同源基因的差異主要分布在非編碼區(qū),推測5’和3’UTR可能參與其表達調(diào)控。
   2、氨基酸分析顯示TaMBD6-5A和TaMBD6-5B完全一致,TaMBD6-5D與TaMBD6-5A,TaMBD6-5B有一個氨基酸差異,94位谷氨酸被谷氨酰胺取

4、代。這三個基因編碼的蛋白都具有MBD保守域(第9-76位),三維結構預測,其可形成由α-螺旋(H)、β-折疊(E)和無規(guī)卷曲組成的特定夾層結構。聚類分析顯示,TaMBD6-5A,TaMBD6-5B和TaMBD6-5D與MBD707(水稻)蛋白的親緣關系最近,與AtMBD10、AtMBD11(擬南芥);MBD105、MBD106、MBD109、MBD115(玉米);MBD707(水稻)同屬于MBD八個亞類中第一亞類。
   3、利

5、用實時定量RT-PCR方法系統(tǒng)分析了TaMBD6的三個部分同源基因在小麥生長發(fā)育不同時期根和葉中的表達特性。結果表明,在小麥京841不同時期的葉中,TaMBD6-SB的表達量均高于TaMBD6-5A,TaMBD6-5D,在八葉期的表達量最高,TaMBD6-5A,TaMBD6-5D的表達量在四葉期最高。但春化處理30天后,TaMBD6-5A,TaMBD6-5B和TaMBD6-5D的表達量均在六葉期最高。在小麥京841不同時期的根中,TaM

6、BD6-5D的表達量均高于TaMBD6-5A,TaMBD6-5B,在六葉期的表達量最高,TaMBD6-5A,TaMBD6-5B的表達量分別在三葉期,七葉期最高。但春化處理30天后,TaMBD6-5B的表達占主要趨勢,在各時期的表達量均高于TaMBD6-5A,TaMBD6-5D,在八葉期的表達量最大。以上結果說明TaMBD6三個部分同源基因表達水平隨器官種類和春化處理而有所差異,推測TaMBD6三個部分同源基因在小麥生長發(fā)育和春化響應中具

7、有不同的功能。
   4、為了進一步探討春化處理對TaMBD6三個部分同源基因表達的影響,試驗中系統(tǒng)分析了TaMBD6在春化處理不同時間的芽和根中的表達特性,結果顯示:小麥京841在春化處理過程中,TaMBD6-5B表達最強,而且其在春化處理30天的根中表達量高于其他時期,在21天的芽中表達量高于其他時期。TaMBD6-5A表達量在根和芽中都很低。TaMBD6-5D在根中表達量很低,而在春化后期芽中表達量升高,在24天達到最大。

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