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文檔簡介
1、豬鏈球菌(Streptococcus suis,SS)是一種重要的病原菌,可引起豬的腦膜炎、關節(jié)炎、心內(nèi)膜炎、肺炎、敗血癥等,根據(jù)莢膜抗原不同,豬鏈球菌可分為33個血清型(1~31,33,1/2型),其中2型(SS2)毒力最強、分布最廣,是一種重要的人畜共患病原,可導致人的死亡,嚴重危害養(yǎng)殖業(yè)和從業(yè)人員。目前已知的可能毒力因子包括溶菌酶釋放蛋白(MRP),莢膜多糖(CPS),胞外因子(EF),溶菌素(SLY),甘油醛-3-磷酸脫氫酶(G
2、APDH)等,只有CPS是已經(jīng)證實的毒力因子,其他的毒力因子以及致病機制仍不清楚,因此新的毒力相關因子有待發(fā)掘。
RfeA(RTX family exoproteinA gene)屬于RTX(Repeats in toxin family,RTX)家族,RTX是一種存在于許多細菌中的穿孔毒素,可以破壞宿主細胞膜,與細菌致病性相關。有報道稱rfeA可以作為SS2的保護性抗原,是一種位于SS2表面的分泌蛋白。本文通過對SS2強毒株
3、ZY05719和弱毒株T15的全基因組比對后,發(fā)現(xiàn)rfeA只存在于強毒的ZY05719中,通過PCR方法檢測rfeA在不同的44株豬鏈球菌菌株中的基因分布情況,發(fā)現(xiàn)絕大多數(shù)菌株(38/44)中包含有rfeA,其中在32株2型強毒株都具有該基因,因此推斷該基因在豬鏈球菌2型中分布廣泛。另外,通過對rfeA在ZY05719及其它豬鏈球菌基因組的生物信息學分析,發(fā)現(xiàn)rfeA與epf-like位于同一操縱子上且與ef鄰近,它們之間有何關系,以及
4、其在豬鏈球菌中的致病機制中起何作用,值得進一步研究。
為了研究rfeA的致病機制,利用同源重組構建了rfeA的基因缺失株ΔrfeA,互補株CΔrfeA,并通過斑馬魚模型對缺失株、野生株和互補株的毒力進行評估,結果發(fā)現(xiàn)缺失株毒力增強了,互補株的毒力基本回復到野生水平,但是三者基本生物學性狀,如菌落形態(tài)特征、生長快慢等無明顯改變。
為了進一步研究其毒力增強的致病機制,通過Real-time PCR對各菌株中mrp,ef,
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