仔豬口服利巴韋林藥代動(dòng)力學(xué)及體內(nèi)外毒性試驗(yàn)研究.pdf

1、利巴韋林（又名病毒唑、三氮唑核苷）（Ribayirin，Tribavirin，Virazole）為鳥苷類化合物，1972年首次合成，對(duì)RNA病毒和DNA病毒具有廣譜抗病毒活性。盡管國(guó)家已明文規(guī)定禁止利巴韋林用于獸藥，但在我國(guó)動(dòng)物病毒性疫病廣為流行的背景下，養(yǎng)殖業(yè)戶違法使用利巴韋林防治動(dòng)物疫病的現(xiàn)象仍相當(dāng)普遍，關(guān)于豬口服利巴韋林造成嚴(yán)重中毒的病例時(shí)有發(fā)生，且報(bào)道的中毒病例多為常規(guī)用藥劑量，說明豬與其它動(dòng)物相比對(duì)該藥更為敏感。為揭示豬對(duì)利巴

2、韋林易感的原因及發(fā)病及發(fā)病機(jī)制，并為禁止獸醫(yī)臨床濫用利巴韋林防治豬病的違法現(xiàn)象提供理論支持，重新評(píng)估利巴韋林的毒副作用，進(jìn)而為執(zhí)行動(dòng)物福利及人類安全用藥提供參考資料。本試驗(yàn)從血漿藥代動(dòng)力學(xué)、仔豬中毒模型建立及體外豬源細(xì)胞毒性試驗(yàn)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)研究。
　　 首先建立了測(cè)定利巴韋林在豬血漿中濃度的高效液相色譜（即HPLC）法，探討了利巴韋林以90mg/kg體重單次口服、多次口服后在豬（n=3）體內(nèi)的藥物動(dòng)力學(xué)規(guī)律。結(jié)果表明：?jiǎn)未谓o予90m

3、g/kg體重的藥物劑量后，藥物動(dòng)力學(xué)模型符合一級(jí)吸收二室房室模型，主要藥動(dòng)學(xué)參數(shù)分別為消除半衰期（t1/2β）（23.50±3.95）h，整體清除率（CL（s））為（1.97±0.55）L·kg-1·h-1，表觀分布容積（V/F（c））為（33.09±6.77）L·kg-1；多次給藥后藥物動(dòng)力學(xué)模型符合單室模型，主要?jiǎng)恿W(xué)參數(shù)分別為消除半衰期（t1/2Ko）為（21.74±25.41）h，整體清除率（CL（s））為（0.73±0.74）

4、L·kg-1·h-1，表觀分布容積（V/F（c））為（9.11±3.24）L·kg-1。
　　 其次研究探討了口服不同劑量利巴韋林對(duì)仔豬的毒性作用。選用12頭（15.2±1.5）kg體重的二元雜交仔豬，隨機(jī)分為四組，分別為空白對(duì)照組，每千克體重利巴韋林10 mg、30 mg、90 mg口服試驗(yàn)組。連續(xù)10天給藥，詳細(xì)觀察各組的臨床表現(xiàn)，動(dòng)態(tài)檢測(cè)血細(xì)胞、血清、尿液、骨髓造血功能及肝功各項(xiàng)理化指標(biāo)的變化，最后放血致死剖檢，并取材進(jìn)行

5、病理組織學(xué)檢查。結(jié)果表明，仔豬按10mg/kg體重口服利巴韋林雖然有一定的臨床表現(xiàn)，但無明顯的中毒病變；中、高劑量（30、90mg/kg體重）的利巴韋林口服對(duì)豬的毒副作用明顯，甚至導(dǎo)致急性死亡，利巴韋林對(duì)各組織器官表現(xiàn)泛嗜毒性，血液、骨髓、消化道、胰腺、心、肝、腎、腦均表現(xiàn)明顯的組織學(xué)病變。其中溶血性貧血是豬中毒發(fā)病的主要機(jī)制，胃腸道卡他性壞死性炎癥及胰腺病變是豬急性厭食、食欲廢絕、便秘的主要原因所在。說明豬口服利巴韋林尤其是中、高劑量

6、會(huì)產(chǎn)生明顯的毒副作用，甚至?xí)鹬卸舅劳觥?br>　　 最后體外采用WST-1細(xì)胞毒性檢測(cè)試劑盒檢測(cè)了不同劑量利巴韋林對(duì)豬源傳代細(xì)胞的細(xì)胞毒性，采用倒置顯微鏡、制作細(xì)胞爬片進(jìn)行光鏡觀察。研究表明，利巴韋林在高濃度時(shí)對(duì)豬腎細(xì)胞均有一定的毒性作用，這與臨床觀察到豬利巴韋林中毒易發(fā)生腎臟病變是一致的，據(jù)前期藥物代謝動(dòng)力學(xué)測(cè)得的數(shù)據(jù)，藥物長(zhǎng)時(shí)間滯留于紅細(xì)胞，排泄較為緩慢，血藥濃度長(zhǎng)期處于一個(gè)較高的范圍，或許是中毒豬出現(xiàn)腎臟病變的直接原因。