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1、分枝桿菌屬(Mycobacterium)p.1251概述為細(xì)長(zhǎng)的桿菌,繁殖時(shí)有分枝生長(zhǎng)的趨勢(shì)。常規(guī)染色困難,但一經(jīng)著色則有抗酸性。該菌生長(zhǎng)慢,營(yíng)養(yǎng)要求高,不產(chǎn)毒素,其致病性與菌體成分有關(guān),所致疾病多為慢性且伴有肉芽腫。該屬菌種類(lèi)多,常分為三組:結(jié)核分枝桿菌(人、牛型),非結(jié)核分枝桿菌(包括4組,鳥(niǎo)胞內(nèi)),麻風(fēng)分枝桿菌。23第一節(jié)結(jié)核分枝桿菌(Mycobacteriumtuberculosis)4結(jié)核桿菌和結(jié)核病病發(fā)展史上的幾個(gè)里程碑18
2、82年,德國(guó)Koch發(fā)現(xiàn)結(jié)核桿菌1890年,德國(guó)Koch發(fā)現(xiàn)結(jié)核菌素1921年,法國(guó)Calmettle和Guerin制成BCG1940年,進(jìn)入結(jié)核病化療時(shí)代520世紀(jì)80年代以來(lái)結(jié)核病發(fā)病率呈明顯上升趨勢(shì)結(jié)核桿菌耐藥菌株的出現(xiàn)AIDS的流行對(duì)結(jié)核病防治的松懈1993年4月23日WHO宣布“全球結(jié)核病緊急狀態(tài)”1995年宣布每年3月24日為“世界防治結(jié)核病日”6流行病學(xué)簡(jiǎn)況:世界:13人口感染,70%在亞洲結(jié)核病人2000萬(wàn),每年新增結(jié)核
3、病患者900萬(wàn),每年死于結(jié)核病的達(dá)300萬(wàn)。中國(guó):有5.5億人感染,結(jié)核病人約600萬(wàn),每年死于結(jié)核病的為25萬(wàn)。居法定報(bào)告?zhèn)魅静∈孜?7一、生物學(xué)性狀1、形態(tài)染色:細(xì)長(zhǎng)微彎的桿菌,經(jīng)抗酸染色,菌體呈紅色,其它呈藍(lán)色。血培養(yǎng)中可形成莢膜。臨床標(biāo)本中常有L型變異出現(xiàn)(Much、莫赫顆粒)。2、培養(yǎng)特性:專(zhuān)性需氧,營(yíng)養(yǎng)要求高,最適pH值低,生長(zhǎng)緩慢,24w見(jiàn)菌落。羅氏(Lowenstein)培養(yǎng)基:菌落呈乳白或米黃顆粒狀,干燥不透明,久則融
4、合呈菜花狀。液體培養(yǎng)基:易形成有皺褶的菌膜(12w)。8結(jié)核分枝桿菌M.tuberculosis9Resultofacidfaststaining:redbacilliinbluebackground10結(jié)核桿菌菜花狀菌落11分子生物學(xué):1998年,英、法、美、丹麥聯(lián)合破譯其群基因序列,4411kb,約4000個(gè)基因3、生化反應(yīng):熱觸酶試驗(yàn)有助于區(qū)別結(jié)核()和非結(jié)核分支桿菌()。4、抵抗力:含大量脂質(zhì),抵抗力強(qiáng),耐酸堿但對(duì)濕熱及紫外線(xiàn)敏
5、感。5、變異性:結(jié)核桿菌易發(fā)生菌落、形態(tài)(L型)、毒力(BCG)、免疫原性和耐藥性變異。12二、致病性(一)致病物質(zhì):結(jié)核桿菌的致病性與細(xì)菌大量繁殖引起的炎癥、菌體成分及代謝產(chǎn)物的毒性和機(jī)體對(duì)細(xì)菌的免疫損傷有關(guān)。1、脂質(zhì)(lipid):索狀因子(cdfact):能破壞線(xiàn)粒體膜,影響細(xì)胞呼吸,抑制白細(xì)胞游走,引起慢性肉芽腫;13Cdfmationinliquidmedia(cdfact)14磷脂(phosphatide):能促使單核細(xì)胞增
6、生,引起結(jié)核結(jié)節(jié)和干酪樣壞死;蠟質(zhì)D(waxD):能激發(fā)機(jī)體的IV型超敏反應(yīng);硫酸腦苷脂(sulfatide):能抑制吞噬體與溶酶體的結(jié)合。2、蛋白質(zhì):其主要成分結(jié)核菌素本身無(wú)毒,但與蠟質(zhì)D結(jié)合注入機(jī)體能誘發(fā)超敏反應(yīng),結(jié)核結(jié)節(jié)形成和抗體。3、多糖(polysacide):中粒細(xì)胞浸潤(rùn)15結(jié)核結(jié)節(jié)(tubercle)164、核酸:rRNA激活細(xì)胞免疫5、莢膜:保護(hù)菌體(有助于侵入巨噬細(xì)胞、抵抗有害物質(zhì)等)17(二)所致疾?。褐饕榻B肺部感
7、染1、原發(fā)感染(primaryinfection):首次感染結(jié)核桿菌,多見(jiàn)于兒童。常有肺門(mén)淋巴結(jié)大、干酪樣壞死和結(jié)核結(jié)節(jié)的形成,也可經(jīng)血到達(dá)多個(gè)臟器引起相應(yīng)結(jié)核病,90%的原發(fā)感染可纖維化或鈣化,但病灶中潛伏的菌可成為日后的感染源2、原發(fā)后感染(secondaryinfection):多見(jiàn)于成人或較大的兒童18原發(fā)綜合征原發(fā)病灶淋巴管炎肺門(mén)淋巴結(jié)結(jié)核19原發(fā)綜合征20三、免疫性1、免疫機(jī)理:傳染性免疫,以細(xì)胞免疫為主。2、免疫與超敏反應(yīng)
8、:機(jī)體對(duì)結(jié)核桿菌產(chǎn)生免疫保護(hù)時(shí)也產(chǎn)生了超敏反應(yīng),二者均為T(mén)細(xì)胞介導(dǎo)。試驗(yàn)依據(jù):結(jié)核菌素蛋白與蠟質(zhì)D同時(shí)注入機(jī)體,可活化T細(xì)胞引起超敏反應(yīng);結(jié)核桿菌核蛋白體RNA注入機(jī)體,則獲得免疫力。21結(jié)核菌素試驗(yàn)(OT):(1)原理:IV型超敏反應(yīng)(2)方法:是用OT(oldtuerculin)或PPD(purifiedProteinderivative)所做的皮內(nèi)試驗(yàn),4872小時(shí)后觀(guān)察。(3)結(jié)果:陽(yáng)性紅腫硬結(jié)直徑5mm強(qiáng)陽(yáng)性紅腫硬結(jié)直徑15m
9、m陰性紅腫硬結(jié)直徑5mm22結(jié)核菌素試驗(yàn)PPD皮下注射23(4)意義:陽(yáng)性表示已感染過(guò)結(jié)核桿菌,但不一定有結(jié)核??;強(qiáng)陽(yáng)性表示可能有活動(dòng)性結(jié)核??;陰性表示未感染過(guò)結(jié)核桿菌,但應(yīng)排除感染初期或免疫力低下。24四、微生物學(xué)檢查1、標(biāo)本:痰液、尿液、糞便、腦脊液等2、直接涂片鏡檢:3、濃縮集菌:4、分離培養(yǎng):5、動(dòng)物試驗(yàn):6、快速診斷:包括核酸和抗體25五、防治原則接種BCG:新生兒7y12y治療:聯(lián)合用藥,分一線(xiàn)和二線(xiàn)藥物26棒狀桿菌屬Cyn
10、ebactreiump.147該屬菌多為條件致病菌,引起人類(lèi)疾病的主要是白喉棒狀桿菌,可引起白喉。27白喉棒狀桿菌屬(C.diphtheriae)一、生物學(xué)性狀1、形態(tài)染色:菌體細(xì)長(zhǎng)微彎,一端或兩端膨大呈棒狀;排列不規(guī)則,多呈X型、Y型或柵欄狀;G,但染色不均勻,用Albert法染色后,有異染顆粒出現(xiàn),具有鑒別意義;無(wú)莢膜和鞭毛,也不產(chǎn)生芽胞。28ModelfigureofAlbertstaining29ResultofAlbertst
11、aining:bodyinbluemetachromaticgranulesinblack302、培養(yǎng)特性:需氧或兼性厭氧,(1)呂氏血清培養(yǎng)基(Loffler):形態(tài)典型,異染顆粒明顯,菌落細(xì)小、濕潤(rùn)、呈灰白色、圓形突起;(2)亞碲酸鉀(potassiumtellurite)培養(yǎng)基:重型大灰色能分解淀粉不溶血中間型中心黑邊緣灰不分解淀粉不溶血輕型小黑色不分解淀粉能溶血我國(guó)以輕型多見(jiàn)313、抵抗力:較弱,對(duì)濕熱敏感,對(duì)干燥、寒冷、日光的
12、抵抗力較強(qiáng)。32二、致病性(一)致病物質(zhì):1、白喉毒素(diphtherotoxinDT):只有攜帶β棒狀桿菌噬菌體的菌株才能產(chǎn)生。毒素的性質(zhì)與作用機(jī)理:完整的毒素分子是酶原,須經(jīng)胰酶分解為A、B兩個(gè)片段后才發(fā)揮毒性作用。A鏈:193aa,具酶活性,穩(wěn)定;B鏈:342aa,不穩(wěn)定。含穿膜區(qū)(173aa)和受體結(jié)合區(qū)(149aa)。33StructureofDiphtheriatoxinFragmentB:37kDbindingFragm
13、entA:21kDtoxicity34作用機(jī)制:白喉毒素經(jīng)受損的粘膜細(xì)胞入血或淋巴循環(huán),吸附于多個(gè)臟器的組織細(xì)胞表面后裂解,B片段與細(xì)胞膜表面的受體結(jié)合,A片段進(jìn)入細(xì)胞內(nèi),使細(xì)胞內(nèi)延伸因子2(elongationfact2EF2)滅活,影響蛋白質(zhì)的合成。白喉毒素有劇毒,但人和鼠的正常細(xì)胞對(duì)該毒素有一定的耐受性,而腫瘤細(xì)胞則高度敏感,據(jù)此有人提出生物導(dǎo)彈法治療腫瘤。352.索狀因子(cdfact)和K抗原等(二)所致疾病病人健康帶菌者飛沫
14、侵入易感機(jī)體吸附恢復(fù)期帶菌者鼻咽部粘膜,生長(zhǎng)繁殖產(chǎn)生侵襲物質(zhì)局部上皮細(xì)胞壞死形成灰白色“假膜”毒素全身心肌炎、腎上腺出血、外周神經(jīng)麻痹等36三、免疫性病后獲牢固免疫,以體液免疫為主。錫克實(shí)驗(yàn)(Schichtest):原理:毒素抗毒素中和反應(yīng)(invivo)四、微生物學(xué)檢查直接涂片,分離培養(yǎng),毒力鑒定(Elek平板,豚鼠試驗(yàn))37ResultsofSchicktestHappenedtime(day)experimentcontrolty
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