真姬菇微衛(wèi)星分子標(biāo)記的開(kāi)發(fā)及其種質(zhì)資源分析.pdf

1、真姬菇（Hypsizygus marmoreus）是著名的食藥用菌，具有廣闊的開(kāi)發(fā)利用前景。目前通過(guò)人工馴化和栽培實(shí)驗(yàn)，真姬菇已經(jīng)實(shí)現(xiàn)了人工栽培，而且我國(guó)、日本和韓國(guó)等國(guó)家和地區(qū)的一些大型食用菌企業(yè)，都可以在人工控制溫度、濕度、光照和空氣成分的環(huán)境中，實(shí)現(xiàn)真姬菇的工業(yè)化栽培。
　　 作為重要的栽培菌株，客觀評(píng)價(jià)真姬菇栽培菌株種質(zhì)資源的遺傳多樣性，掌握不同栽培菌株的鑒別方法，是充分保護(hù)和利用真姬菇種質(zhì)資源，開(kāi)展真姬菇良種選育，保護(hù)

2、真姬菇品種知識(shí)產(chǎn)權(quán)，加強(qiáng)真姬菇菌種質(zhì)量管理的基礎(chǔ)。本研究從全國(guó)范圍內(nèi)收集了真姬菇27個(gè)主要栽培菌株，其中包括21株常規(guī)栽培真姬菇菌株和6株工業(yè)化栽培真姬菇菌株.根據(jù)形態(tài)學(xué)特征和ITS序列對(duì)所收集的真姬菇菌株進(jìn)行了分類(lèi)鑒定，利用SSR分子標(biāo)記對(duì)真姬菇的種質(zhì)資源進(jìn)行分析研究。主要研究結(jié)果如下：
　　 1.一部分形態(tài)特征（細(xì)密花斑，菜盤(pán)型等）可以將工業(yè)化栽培菌株與常規(guī)栽培菌株區(qū)分開(kāi)；但兩者仍具有一些相同的形態(tài)特征，如菌蓋為傘型，菌蓋土

3、黃色等。
　　 2.對(duì)供試菌株的ITS區(qū)域進(jìn)行測(cè)序和比較分析，結(jié)果顯示供試菌株的ITS序列長(zhǎng)度為594bp，通過(guò)blast比對(duì)發(fā)現(xiàn)在種的水平上證明菌株來(lái)源準(zhǔn)確。用PHILIP軟件分析發(fā)現(xiàn)菌株間的相似系數(shù)約為99％，說(shuō)明利用單一的ITS序列不能將菌株區(qū)分開(kāi)。
　　 3.利用簡(jiǎn)單重復(fù)序列（SSR）標(biāo)記技術(shù)，以27個(gè)真姬菇菌株為供試材料，根據(jù)香菇、糙皮側(cè)耳、灰蓋鬼傘基因組序列設(shè)計(jì)引物，對(duì)真姬菇供試菌株進(jìn)行轉(zhuǎn)移擴(kuò)增。從54對(duì)引物

4、中篩選出23對(duì)能夠擴(kuò)增出穩(wěn)定帶型且菌株之間帶型差異明顯的SSR引物。利用23對(duì)引物對(duì)全部供試菌株進(jìn)行擴(kuò)增，共擴(kuò)增133條條帶，其中多態(tài)性條帶為108條，多態(tài)性比率達(dá)到81.2％。UPGMA聚類(lèi)分析結(jié)果表明，大部分常規(guī)栽培菌株（95％）和工業(yè)化栽培菌株（80％）聚在不同組，說(shuō)明兩者之間的遺傳背景存在明顯差異.
　　 4.根據(jù)獲得的菌株特有的SSR標(biāo)記分析表明，2個(gè)工業(yè)化栽培菌株各自具有一條特異條帶，通過(guò)引物組合法，利用7對(duì)引物，可