板藍(lán)根、黃芪多糖與干擾素對(duì)豬偽狂犬病病毒的體外作用研究.pdf

1、目的與意義:通過(guò)體外試驗(yàn)測(cè)定板蘭根多糖、黃芪多糖與干擾素聯(lián)合應(yīng)用對(duì)豬偽狂犬效果研究，從而給偽狂犬病的預(yù)防及治療提供一種新的可行方法。
　　采用了常規(guī)的水煎醇沉法來(lái)提取多糖，然后使用蒽酮硫酸法來(lái)測(cè)定多糖的含量，從而得到板藍(lán)根多糖和黃芪多糖;體外構(gòu)建重組質(zhì)粒pGEX-IFN-α，并將其轉(zhuǎn)化入大腸桿菌BL21后，經(jīng)IPTG的誘導(dǎo)下，在大腸桿菌中表達(dá)出豬α干擾素融合蛋白。SDS-PAGE和Westernblotting分析，優(yōu)化IPTG的

2、濃度和誘導(dǎo)時(shí)間，提高表達(dá)水平。通過(guò)形態(tài)觀察法、MTT法判斷板藍(lán)根多糖、黃芪多糖、干擾素以及多糖與干擾素的聯(lián)合應(yīng)用對(duì)豬偽狂犬病病毒的抑制效果。板籃根多糖、黃芪多糖和干擾素半數(shù)抑制濃度分別為250μg/ml、500μg/ml和100.7U/ml。測(cè)定了藥物聯(lián)合應(yīng)用的合并指數(shù)，結(jié)果表明板藍(lán)根多糖125μ g/ml、黃芪多糖250μg/ml、和重組豬α干擾素50U/mL三者聯(lián)合使用時(shí)，抑制病毒的效果最好，豬偽狂犬病病毒的抑制率達(dá)到70.26％。