金華豬與長白豬脂肪代謝和消化功能發(fā)育差異的研究.pdf

1、本試驗(yàn)以斷奶后的金華和長白仔豬為試驗(yàn)對象，進(jìn)行了飼養(yǎng)試驗(yàn)、屠宰試驗(yàn)，從脂肪代謝相關(guān)酶、生理生化指標(biāo)、基因表達(dá)和消化道結(jié)構(gòu)功能以及消化酶活性的發(fā)育等方面揭示兩品種豬生產(chǎn)性能、胴體組成、脂肪沉積變化的種間差異并初步探討了其機(jī)理，為豬脂肪沉積調(diào)控技術(shù)的創(chuàng)建以及地方品種和外來品種間的雜交利用提供科學(xué)依據(jù)。
　　 選擇年齡相同的金華和長白仔豬各18頭（共36頭），分別于28日齡斷奶后，按照品種分成2組，每組3個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)6頭（公母各半

2、）。金華豬與長白豬在相同的條件下飼養(yǎng)，自由采食、自由飲水。預(yù)試期7天，正試90天。在每個(gè)屠宰日齡(35，80和125日齡)，分別從各組的每個(gè)重復(fù)中選取體重相近的試驗(yàn)豬2頭（公母各半），每個(gè)品種6頭，共12頭。按常規(guī)方法進(jìn)行屠宰，測定胴體組成。并采集血清、垂體、肝臟、肌肉和皮下脂肪以及胃腸道組織樣品進(jìn)行相關(guān)指標(biāo)分析。
　　 根據(jù)Genebank登錄的豬垂體生長激素(GH)、肝臟類胰島素生長因子-I(IGF-I)、脂肪組織中脂肪酸合

3、成酶(FAS)、激素敏感脂肪酶(HSL)、瘦素(Leptin)、脂蛋白脂酶(LPL)和內(nèi)參β-actin基因序列設(shè)計(jì)引物，分別以垂體、肝臟和脂肪組織mRNA為模扳，經(jīng)過反轉(zhuǎn)錄和PCR反應(yīng)，克隆得到了相應(yīng)的CH、IGF-I、FAS、HSL、Leptin、LPL相內(nèi)參β-actin的基因片段。對測序結(jié)果進(jìn)行序列分析表明，得到的GH、IGF-I、FAS、HSL、Leptin、LPL和內(nèi)參β-actin基因序列與Genebank登錄的相應(yīng)基因片

4、段（登錄號分別為：AY536527、NM214256、EF589048、AY686758、AF026976、AY686761和DQ845171）同源性均達(dá)到了98％以上。在此基礎(chǔ)上，進(jìn)一步探討了PCR反應(yīng)中適宜的退火溫度、Mg2+濃度和循環(huán)數(shù)，構(gòu)建了適合相應(yīng)基因序列的優(yōu)化半定量RT-PCR法，以用于研究金華豬與長白豬脂肪代謝相關(guān)基因mRNA表達(dá)變化及種間差異。
　　 1.飼養(yǎng)試驗(yàn)結(jié)果表明：長白豬與金華豬相比有較高的始重、終重和平

5、均日增重（P<0.05），長白豬的平均日增重比金華豬高39.44％，而平均料重比比金華豬低24.11％(P　　 2.屠宰試驗(yàn)結(jié)果表明：金華豬與長白豬胴組成和肉品質(zhì)參數(shù)的發(fā)育性變化模式基本相同，與長白豬相比金華豬的胴體脂肪率、平均背膘厚、肌內(nèi)脂肪量、大理石紋評分和肉色評分較高(P<0.05)，而胴體瘦肉率、眼肌面積和滴水損失較低(P<0.05)。
　　 3.垂體和肝

6、臟樣品分析結(jié)果顯示：金華豬與長白豬垂體GH mRNA豐度發(fā)育模式基本一致，隨日齡增加而下降（P<0.05）。與長白豬相比金華豬垂體組織中GH mRNA豐度較低（P0.05)，且金華豬顯著低于長白豬(P<0.05)。長白

7、豬肝臟IGF-I mRNA豐度與胴體脂肪率存在負(fù)相關(guān)，相關(guān)系數(shù)為：-0.730（P<0.05）。
　　 4.脂肪樣品分析結(jié)果表明：金華豬與長白豬皮下脂肪HSL和FAS活性發(fā)育模式一致，35和80日齡時(shí)較低，125日齡時(shí)顯著升高(P<0.05)。與長白豬相比金華豬FAS的活性和FAS/HSL活性比值較高(P<0.05)，而HSL活性則較低(P<0.05)；FAS mRNA、Leptin mRNA和LPL mRNA豐度發(fā)育模式基本一

8、致，隨日齡增加而升高（P<0.05），金華豬的FAS mRNA、Leptin mRNA和LPL mRNA豐度較高(P<0.05)。HSL mRNA無顯著性發(fā)育變化（P>0.05），金華豬顯著低于長白豬(P<0.05)。金華豬與長白豬FAS mRNA、FAS/HSL mRNA、Leptin mRNA和LPL mRNA豐度與其胴體脂肪率存在顯著正相關(guān)（金華豬r：0.802，0.804，0.876,0.871,P<0.05;長白豬r:0.73

9、4,0.749,0.803,0.784,P<0.05）。
　　 5.血清指標(biāo)分析結(jié)果示顯：金華豬與長白豬血清瘦素、GH、IGF-I、胰島素、FT和FT、FFA濃度發(fā)育模式一致，血清瘦素、IGF-I、胰島素和FFA濃度隨日齡的增加而顯著升高(P<0.05)，而血清GH、FT3和FTA水平則隨日齡的增加而顯著降低（P<0.05）。與長白豬相比金華豬的血清瘦素和胰島素水平較高(p<0.05)，而血清GH、IGF-I、FT3和FT4和F

10、FA濃度較低(p<0.05)。金華豬與長白豬血清瘦素、IGF-I、胰島素水平與胴體脂肪率呈顯著性正相關(guān)(P<0.05)，相關(guān)系數(shù)為別為：0.567(P<0.05)，0.572(P<0.05)，0.482(P<0.05)和0.607(P<0.05)，0.578(P<0.05)，0.534(P<0.05);而血清GH和FT3水平與胴體脂肪量呈顯著性負(fù)相關(guān)（P<0.05），相關(guān)系數(shù)分別為：-0.443(P<0.05)，-0.541(P<0.0

11、5)和-0.463(P<0.05),-0.481(P<0.05)。
　　 6.內(nèi)源消化酶活性變化結(jié)果表明：金華豬與長白豬胃粘膜及其內(nèi)容物中胃蛋白酶、胰腺中胰蛋白酶、胰淀粉酶、胰脂肪酶活性的發(fā)育模式一致，隨日齡的增加而升高（P

12、模式基本一致，其中麥芽糖和蔗糖酶活性隨日齡的增加而升高（P　　 7.消化器官形態(tài)分析結(jié)果顯示：小腸（十二指腸、空腸和回腸）粘膜絨毛高度和隱窩深度的發(fā)育模式基本相同。絨毛高度隨日齡的增加而升高(P<0.05)，而隱窩深度則隨日齡的增加而變淺(P<0.05)。與長白