金華豬與長白豬β-防御素表達(dá)水平、免疫和抗氧化功能的品種差異研究.pdf

1、本課題以初生、20日齡、40日齡和60日齡的金華豬和長白豬為研究對象，通過相關(guān)試劑盒測定及熒光定量PCR方法，比較了兩個品種豬在四個日齡階段體內(nèi)防御素基因的表達(dá)量、免疫功能以及抗氧化能力，探討了它們隨日齡的變化規(guī)律以及存在的品種差異。主要研究結(jié)果如下：
　　 1.選取初生、20日齡、40日齡和60日齡的金華豬和長白豬各三頭，屠宰取各腸段樣品，熒光定量PCR法檢測各日齡階段兩個品種豬各腸段三種防御素的表達(dá)水平。結(jié)果表明，①隨日齡變

2、化趨勢：從初生到60日齡，pBD-1和pBD-3基因在兩個品種豬各腸段的表達(dá)量總體呈現(xiàn)隨日齡的變化而上升的趨勢，而pBD-2基因在兩個品種豬結(jié)腸和回腸中的表達(dá)量隨日齡的變化呈先下降后上升的趨勢。②品種間差異比較：在20日齡、40日齡和60日齡時，金華豬各腸段中三種β-防御素基因的表達(dá)量均高于長白豬。在初生和20日齡時，金華豬pBD-1基因在十二指腸的表達(dá)量極顯著高于長白豬(P<0.01)；在60日齡時，金華豬pBD-1基因在空腸、回腸和

3、結(jié)腸中的表達(dá)量顯著高于長白豬(P<0.05)，金華豬pBD-2基因在十二指腸、回腸和結(jié)腸的表達(dá)量均顯著高于長白豬(P<0.05)，金華豬pBD-3基因在十二指腸、空腸和回腸的表達(dá)量顯著高于長白豬(P<0.05)，結(jié)腸中的表達(dá)量極顯著的高于長白豬(P<0.01)，提示金華豬腸道防御素基因表達(dá)水平高于長白豬。
　　 2.選取初生、20日齡、40日齡和60日齡的金華豬和長白豬各三頭，屠宰取血清及各腸段樣品，試劑盒法和熒光定量PCR法測

4、定各日齡階段兩個品種豬血清及腸道相關(guān)免疫指標(biāo)。結(jié)果表明，①隨日齡變化趨勢：從初生到60日齡，金華豬和長白豬血清中免疫球蛋白和腸道分泌型免疫球蛋白A(sIgA)的含量隨日齡的變化呈現(xiàn)先下降后上升的趨勢，這與仔豬階段從母乳中獲得免疫球蛋白及斷奶應(yīng)激有關(guān)；兩個品種豬腸道中細(xì)胞因子基因的表達(dá)量隨日齡的變化整體呈現(xiàn)上升趨勢；血清中補體C3、C4隨豬日齡的變化呈現(xiàn)先下降后上升的趨勢，與28日齡的斷奶應(yīng)激有關(guān)；血清中溶菌酶活力隨豬日齡的變化呈現(xiàn)上升的

5、趨勢?？梢?，隨豬的生長，免疫系統(tǒng)逐漸完善，免疫功能逐漸加強。
　　 ②品種間差異比較：金華豬的血清免疫球蛋白的含量在初生、20日齡、40日齡和60日齡四個日齡階段均高于長白豬，且在初生時，金華豬血清中IgA和IgM的含量均顯著高于長白豬(P<0.05)，而IgG在60日齡金華豬血清中的含量極顯著高于長白豬(P<0.01)；金華豬血清溶菌酶的活力在四個日齡階段均極顯著的高于長白豬(P<0.01)；細(xì)胞因子IL-6在初生金華豬的十二

6、指腸和60日齡金華豬的結(jié)腸的表達(dá)量均極顯著的高于長白豬(P<0.01)，IL-8在60日齡金華豬四個腸段的表達(dá)量顯著高于長白豬(P<0.05)，TNF-α基因在60日齡金華豬的十二指腸和結(jié)腸的極顯著的高于長白豬(P<0.01)，在40日齡和60日齡金華豬的回腸中TNF-α基因的表達(dá)量顯著高于長白豬(P<0.05)。綜上，在初生、20日齡、40日齡和60日齡四個日齡階段，金華豬體內(nèi)免疫球蛋白含量、補體水平、溶菌酶活力、sIgA含量及腸道細(xì)

7、胞因子基因表達(dá)量均高于長白豬，提示金華豬的免疫功能要高于長白豬。
　　 3.選取初生、20日齡、40日齡和60日齡的金華豬和長白豬各三頭，屠宰取血清樣品，試劑盒法測定各日齡階段兩個品種豬血清中五種抗氧化指標(biāo)。結(jié)果表明：①隨日齡變化趨勢：從初生到60日齡，金華豬和長白豬血清中GSH-Px和CAT的活性隨日齡的變化呈現(xiàn)上升的趨勢，MDA的含量隨日齡的變化呈現(xiàn)下降的趨勢，而T-SOD的活性和T-AOC隨日齡的變化呈現(xiàn)先下降后上升的趨勢

8、，可能受28日齡的斷奶應(yīng)激影響較大。整體趨勢是金華豬和長白豬抗氧化能力隨日齡的變化，抗氧化能力提高。②品種間差異比較：金華豬血清中五個抗氧化指標(biāo)初生、20日齡、40日齡和60日齡四個日齡階段均高于長白豬，表明金華豬的抗氧化能力高于長白豬。其中，金華豬血清中GSH-Px的含量在60日齡顯著的高于長白豬(P<0.05)，在20日齡和40日齡極顯著的高于長白(P<0.01)，金華豬的總抗氧化能力T-AOC在初生和40日齡也極顯著的高于長白豬(

9、P<0.01)，提示金華豬的抗氧化能力高于長白豬。
　　 4.通過對不同日齡金華豬和長白豬體內(nèi)防御素基因表達(dá)量、免疫功能以及抗氧化能力的研究揭示：隨豬日齡的變化，兩個品種豬腸道防御素表達(dá)水平、免疫功能以及抗氧化能力呈現(xiàn)上升的趨勢，整體趨勢相一致；不同品種間比較，地方優(yōu)良品種金華豬防御素基因表達(dá)水平、免疫功能以及抗氧化能力均高于國外引進(jìn)品種長白豬，提示防御素的表達(dá)可能與機體的免疫和抗氧化能力有關(guān)，同時揭示抗菌肽的表達(dá)可能與豬的抗病