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1、,1,分子生物學(xué)技術(shù),,,2,,3,,4,,5,Kary Banks Mullis,1993年諾貝爾化學(xué)獎,,6,,,,,7,,8,,9,,10,,,11,,12,2n,,13,,,,14,,,,,15,,16,,17,,18,,19,,20,,21,,22,,23,,24,,25,,26,,27,,28,引物,,29,,30,,31,,32,,33,,34,,35,,36,,37,,38,,39,,40,熔解曲線(Dissociati
2、on curve)是指隨溫度升高DNA的雙螺旋結(jié)構(gòu)降解程度的曲線。熔解曲線分析可以用來確定不同的反應(yīng)產(chǎn)物,包括非特異性產(chǎn)物,總的DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)降解一半的溫度稱為熔解溫度(Tm),不同序列的DNA,Tm值不同。DNA中G-C含量越高,Tm值越高,成正比關(guān)系。,擴增反應(yīng)完成后進行,,41,退火溫度(AnnealingTemperature)是指引物和模板結(jié)合時候的溫度參數(shù),當50%的引物和互補序列表現(xiàn)為雙鏈DNA分子時的溫度。它是影響PC
3、R特異性的較重要因素。在理想狀態(tài)下,退火溫度足夠低,以保證引物同目的序列有效退火,同時還要足夠高,以減少非特異性結(jié)合。合理的退火溫度從55℃到70℃。退火溫度一般設(shè)定比引物的Tm低5℃。,,,42,,43,,44,,45,,46,,47,,48,,49,,50,,51,,52,,53,,54,,55,,56,,57,,,58,,59,艾滋病毒進入人體后,需要經(jīng)過一段時間血液才會產(chǎn)生艾滋病毒抗體,在此期間抗體檢測呈陰性,這段時間即為窗口期
4、。感染者體內(nèi)的HIV數(shù)量會在這時達到一個峰值,傳染性極強。急性感染期也出現(xiàn)在這段時間。多數(shù)人在感染艾滋病毒后有3至12周“窗口期”,在此期間,人體仍在產(chǎn)生艾滋病毒抗體,但這些抗體尚無法測出。,,60,,61,,62,bDNA的檢測原理,,63,,64,,65,,66,,67,,68,,69,,70,,71,,72,,73,免疫學(xué)方法技術(shù),,74,,75,,76,,77,,78,,79,,80,,81,,82,,83,,84,,85,,8
5、6,,87,,88,,89,,90,,91,,92,,93,,94,,95,,96,,97,,98,,99,,100,,101,,102,,103,,104,,,105,,106,,107,,108,,109,,110,,111,,112,,113,,114,,115,,116,,117,,118,,119,,120,,121,,122,,123,,124,,125,,126,,127,,128,,129,,130,,131,,132,
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