新發(fā)急性乙肝監(jiān)測技術

1、江蘇省疑似急性乙型肝炎監(jiān)測,全省監(jiān)測點概況,2013年全省監(jiān)測點共報告急性乙肝病例257例，2014年報告211例，同比下降17.90%。,存在問題,1、標本采樣血清樣本收集要求(1)、各監(jiān)測點疑似急性乙肝病例，并且 抗-HBc IgM檢測S/N值大于6血清樣本(2)、血清量：約0.5ml，不少于0.3 ml (3)、血清統(tǒng)一采用1.5m血清凍存管-20 ℃冷凍保存，擰緊瓶蓋，避免運輸過程中滴漏血清標本編號要求 血清樣本重新

2、編號，分成三部分共11個數(shù)字:第一部分為縣（區(qū)）國標碼（身份證號前6位）、第二部分為采血年份后2位數(shù)字（如2014年為14）、 第三部分為該監(jiān)測點血清順序號（或稱流水號）（3位連續(xù)數(shù)字，如001）樣本標簽粘貼要求(1)、標簽應選用耐寒、防水性能好材料 (2)、標簽內容包括血清標本編號和姓名至少兩項（姓名可手寫），清晰可見，以備核對數(shù)據(jù)庫格式要求將《抗-HBc IgM 1:1000標本采樣、檢測登記表》完整錄入excel文件，建

3、立樣本數(shù)據(jù)庫。,存在問題,血清凍存管擺放要求將血清標本凍存管按照上交的數(shù)據(jù)庫中血清樣本順序，在凍存盒中按盒孔位置依次從左到右、從上到下有序擺放。送檢冷藏送檢。2、流調問題：相互協(xié)調，注意流調表的質量，附卡六項必填等,Company Logo,,監(jiān)測目的,提高乙肝病例分類診斷的準確性了解監(jiān)測地區(qū)急性乙肝發(fā)病情況明確急性乙肝發(fā)病的危險因素,監(jiān)測地區(qū),全省范圍內全面展開，國家監(jiān)測點（江陰、武進、張家港、丹陽、寶應、泰興）仍

4、按照原方案要求繼續(xù)開展工作。,Company Logo,項目內容,乙肝病例分類診斷及報告 《乙型病毒性肝炎診斷標準》（ws299-2008） 傳染病網(wǎng)絡直報系統(tǒng)實驗室檢測 抗-HBc IgM1:1000檢測流行病學調查 本地病例監(jiān)測地區(qū)報告的、現(xiàn)住址為本轄區(qū)的 （異地病例參照蘇疾控2013年16號文） 不能明確診斷為慢性乙肝的病例標本采集

5、 同上,乙肝病例分類診斷及報告,工作流程,乙肝病例分類診斷及報告,監(jiān)測乙肝病例報告要點： 攜帶者：不報告 HBsAg（+） 且無癥狀/體征 且ALT持續(xù)正常明確HBsAg（+）>6個月 慢性反復就診：不報告 癥狀/體征反復出現(xiàn)

6、 或ALT反復異常 慢肝首次發(fā)作：報告 癥狀/體征首次出現(xiàn) 或ALT首次異常,乙肝病例分類診斷及報告,既往未檢測HBsAg，或結果不詳 本次HBsAg陽性 無相關癥狀，且ALT正常（攜帶者不報告） 有相關癥狀，或ALT正常 血清學：HBsAg陰轉，抗HBs陽轉（

7、報急肝） 抗-HBcIgM1:1000陽性（報急肝） 抗-HBcIgM1:1000陰性（報慢肝）,標本采集和檢測,檢測所有乙肝報告病例ALT。不具備檢測抗-HBc IgM 1:1000條件的醫(yī)療機構，須采集病例血樣，送市疾控中心統(tǒng)一檢測抗-HBc IgM 1:1000。（1）醫(yī)療機構應采集每例病例5ml血標本，分離血清后分裝A、B兩管，A管（約1.0ml）用于市疾控中心檢測

8、抗-HBc IgM 1:1000，B管（約1.0ml）用于復核檢測。血清管上須標明病例姓名及登記表編號，相應填寫“標本采樣、檢測登記表”（附件3）內容。務于每月30日前將凍存血清標本及“采樣、檢測登記表”復印件送至市疾控中心。（2）市疾控中心收到血標本后10天內須完成抗-HBc IgM 1:1000檢測工作。,流調數(shù)據(jù)錄入及實驗室結果,完成個案調查后，縣（市、區(qū)）疾控中心須在3日內錄入數(shù)據(jù)，統(tǒng)一匯總至市疾控中心，市疾控每月將數(shù)據(jù)及實驗

9、室結果報至省疾控中心。,乙肝病例報告卡附卡,HBsAg陽性時間：>6個月/6個月內/未測或不祥抗-HBcIgM1:1000稀釋檢測結果：陽性/陰性/未測本次ALT首次出現(xiàn)乙肝癥狀和體征的時間肝組織穿刺檢測結果：急性病變/慢性病變/未測恢復期血清HBsAg陰轉，抗HBs陽轉：陽性/陰性/未測,www.themegallery.com,乙肝報告系統(tǒng),評價指標,附卡相關信息填寫完整率>90%報告乙肝病例的ALT檢測率到

10、達100%病例個案流調率>95%以市為單位當年疑似新發(fā)急性乙肝病人早期核心抗體IgM 1:1000檢測率>70%。,,急性乙肝Anti-HBc IgM實驗室SOP,待測樣品要求,本試劑適用樣品為稀釋的人血清或血漿，含有EDTA、檸檬酸鈉或肝素等抗凝劑的樣品均可用于本實驗。國產(chǎn)試劑均需將血清樣本1:1000稀釋，進口試劑如美國雅培試劑不需要稀釋。輕度溶血（血紅素低于20mg/L）、輕度黃疸（膽紅素低于200mg/ L）

11、的樣品可用于檢測，重度溶血和重度黃疸的樣品檢測結果不準確。血清樣品可在2-8℃儲存約1周，長期儲存應置于-20℃低溫凍存，避免反復凍融。冷凍樣品檢測前需充分融解并混勻。如樣品有雜質、渾濁現(xiàn)象，檢測前應3500轉/分離心5分鐘，取上清液檢測。,待測樣品稀釋方法,稀釋液為0.9%生理鹽水。在潔凈的15ml帶蓋離心管中加入10ml生理鹽水，再將10μl 血清樣本加入10ml生理鹽水中，顛倒混勻。若沒有15ml帶蓋離心管，也可用1.5

12、ml帶蓋EP管進行倍比稀釋，注意充分混勻。不建議直接在1ml生理鹽水中加入1μl血清,此種操作容易出現(xiàn)誤差。,國產(chǎn)試劑為定性試劑，不能作為定量試劑使用。不同批次試劑最好不要混用。各廠家之間實驗操作方法差異較大，加酶、加抗原、溫育時間、洗板次數(shù)等步驟均不相同，實驗前仔細閱讀說明書，嚴格按照試劑說明書進行操作。一次檢測未使用完的剩余試劑注意密封，保持干燥和潔凈。,國產(chǎn)試劑的使用,其他注意事項,避免在有揮發(fā)性物質及次氯酸類消毒劑（如8