治療性疫苗

1、第八章 治療性疫苗 （Chapter VIII Cure Vaccine） 第一節(jié) 概述（Outline） 多數(shù)學(xué)者認(rèn)為治療性疫苗應(yīng)為發(fā)生疾病后為治療疾病所采用的疫苗，但對(duì)一些感染后免疫用的疫苗也可視為廣義的治療性疫苗。 治療性疫苗的研制和應(yīng)用已覆蓋了多種疾病。細(xì)菌方面，已有用麻風(fēng)菌素治療麻風(fēng)菌感染、用布氏桿菌素治療布魯菌感染、用滅活的自身菌苗治療

2、金黃色葡萄球菌皮膚反復(fù)感染等。,病毒方面則已開展了對(duì)人類免疫缺陷病毒（HIV），單純皰疹病毒（HSV），乙肝病毒（HBV）感染等的治療性疫苗的研制。此外還研制了針對(duì)自身免疫病和腫瘤的治療性疫苗。因此廣義治療性疫苗是指在已感染病原生物或患某些疾病的機(jī)體中，通過(guò)誘生機(jī)體的特異性或非特異性免疫應(yīng)答，以達(dá)到治療或防止疾病惡化的生物制品。,一、治療性疫苗發(fā)展的基礎(chǔ)（foundation of curing vaccine developme

3、nt）治療性疫苗雖已經(jīng)歷了近100年的歷史，但近來(lái)重新引起了人們的重視，其主要原因是由于具備了更好的基礎(chǔ)。,1、微生物的持續(xù)性感染日益受到重視細(xì)菌及病毒均可引起持續(xù)性感染，例如結(jié)核病，麻風(fēng)病，反復(fù)發(fā)作的葡萄球菌感染，HBV，HIV，HSVII，以及丙型肝炎病毒（HCV）感染等。由于微生物的急性感染較容易通過(guò)藥物控制，持續(xù)性感染已成為棘手的重要問(wèn)題。人們已逐漸認(rèn)識(shí)到，為控制持續(xù)性微生物感染，必須考慮如何提高機(jī)體的免疫力。,2、基因重

4、組技術(shù)的發(fā)展與應(yīng)用 目前基因重組與表達(dá)技術(shù)已日趨成熟，不少微生物基因的表達(dá)產(chǎn)物已獲得，并可對(duì)其生物學(xué)特性進(jìn)行研究，提供了用于發(fā)展治療性疫苗的組分。各種抗原成分的組合、拼接或用微生物抗原基因與不同細(xì)胞因子基因組成表達(dá)嵌合性蛋白，或使表達(dá)蛋白與藥物交聯(lián)的治療性疫苗為開發(fā)治療性疫苗提供了廣闊的前景。,3、免疫學(xué)理論的發(fā)展 由于對(duì)HIV免疫的研究，大大推動(dòng)了抗感染免疫的理論發(fā)展。對(duì)不同感染過(guò)程中體液與細(xì)胞免疫應(yīng)答的詳細(xì)分析、

5、抗原提呈、細(xì)胞內(nèi)信號(hào)傳遞途徑的進(jìn)一步了解、微生物對(duì)免疫細(xì)胞感染所造成的后果、以及裸DNA免疫的機(jī)制等均對(duì)發(fā)展治療性疫苗起了推動(dòng)作用。,二、治療性疫苗的特點(diǎn)（specialty of curing vaccine）治療性疫苗與預(yù)防性疫苗的根本不同點(diǎn)：1）對(duì)象不同：前者是已被感染或患病的機(jī)體，后者是健康的人群；2）目的不同：前者用于治療患者或防止疾病惡化，后者是用于預(yù)防；3）應(yīng)用不同：前者須考慮患者的禁忌癥和適應(yīng)癥，后者對(duì)未被感染的人

6、群。研究注意以下特點(diǎn)：,1、免疫原的選擇與優(yōu)化治療性疫苗所用免疫原的選擇需在深入研究治療對(duì)象的免疫應(yīng)答基礎(chǔ)上選定。根據(jù)病原學(xué)的特點(diǎn)，一般選用的微生物抗原應(yīng)為能引起中和性抗體及可誘生殺傷性T細(xì)胞（CTL）免疫應(yīng)答的抗原；但還必須考慮患者的免疫應(yīng)答，即患者已產(chǎn)生和未產(chǎn)生的免疫應(yīng)答。為了更有效地刺激患者的免疫應(yīng)答，有學(xué)者開展了嵌合免疫原或聯(lián)合免疫原型的疫苗。,,,2、動(dòng)物模型的建立 為考核治療性疫苗的療效，需要建立模擬

7、人體感染的動(dòng)物模型。一種是在靈長(zhǎng)類動(dòng)物，如黑猩猩，猿猴中尋找相似的持續(xù)感染，如猴免疫缺陷?。⊿IV），或是在非靈長(zhǎng)類動(dòng)物中尋找類似感染，如類似人乙肝病毒的土撥鼠或鴨乙肝動(dòng)物模型；或模擬人HSVⅡ，在雌性豚鼠中建立生殖道皰疹病毒感染等。另一種建立有病毒基因整合的轉(zhuǎn)基因動(dòng)物，如用HBV基因建立的轉(zhuǎn)基因小鼠。,,3、臨床應(yīng)用的重要性 治療性疫苗和預(yù)防性疫苗的很重要區(qū)別是前者需要臨床醫(yī)生的積極參與（禁忌癥與適應(yīng)癥）。由于治療

8、性疫苗的對(duì)象是患者，因此常伴有免疫低或其他病理變化，在使用疫苗時(shí)需較預(yù)防性疫苗更為慎重。選擇對(duì)象時(shí)應(yīng)有嚴(yán)格標(biāo)準(zhǔn)，對(duì)每種疫苗的療效也應(yīng)用不同的評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)。在免疫應(yīng)答出現(xiàn)時(shí)還可能伴有免疫損傷而出現(xiàn)不良反應(yīng)，需要醫(yī)生協(xié)同進(jìn)行判斷。,第二節(jié) 治療性疫苗的種類 （category of curing vaccine）1、根據(jù)治療性疫苗針對(duì)疾病種類的不同可分為：①細(xì)菌型治療性疫苗；②病毒型治療性疫苗；③腫瘤治療性疫苗；④自身免疫

9、病治療性疫苗。2、根據(jù)治療性疫苗的作用機(jī)制可分為：①特異性治療性疫苗；②非特異性治療性疫苗。,3、根據(jù)所用免疫原的種類可分為：①核酸型治療疫苗；②重組蛋白型治療疫苗；③天然蛋白型治療疫苗；④免疫復(fù)合物型治療疫苗；⑤嵌合型治療疫苗。,（一）非特異性治療性疫苗（nonspecific curing vaccine）這類疫苗的特點(diǎn)為屬非特異地誘生機(jī)體的細(xì)胞免疫應(yīng)答，其作用較弱，一般均作為聯(lián)合治療的一部分。如卡介苗主要用于

10、非特異地提高機(jī)體的細(xì)胞免疫，但作用較弱而被用作一種協(xié)同治療，聯(lián)合用于腫瘤病人。除卡介苗外，短小棒狀桿菌（革蘭氏陽(yáng)性桿菌）以及其他的一些細(xì)菌均曾被用作非特異的治療性疫苗。,（二）細(xì)菌型治療性疫苗（bacteria curing vaccine）細(xì)菌性感染因有抗生素等治療，可以控制，故治療性疫苗僅限于少數(shù)幾種慢性感染，如結(jié)核病、麻風(fēng)病及布魯氏病等。20世紀(jì)初，為治療金黃色葡萄球菌引起的反復(fù)發(fā)作的癤及癰，Wright采用自患者分離的加熱

11、滅活的葡萄球菌為治療性疫苗，獲得成功，奠定了細(xì)菌型治療性疫苗的基礎(chǔ)。,,1986年Convit曾報(bào)道聯(lián)合使用滅活的麻風(fēng)菌苗與卡介苗治療300名麻風(fēng)病人，結(jié)果可使60%的嚴(yán)重麻風(fēng)病人病灶中清除麻風(fēng)菌，并且降低了復(fù)發(fā)率。其機(jī)制為病人的特異性細(xì)胞免疫得以提高，并不再對(duì)麻風(fēng)桿菌處于耐受狀態(tài)。倫敦大學(xué)醫(yī)學(xué)院的Stanford，從烏干達(dá)的土壤中分離了一株分支桿菌（Mycobacterium vaccae），并用滅活的該菌苗聯(lián)合藥物治療結(jié)核患者，

12、聯(lián)合療法使87%的患者治愈，而單用藥物治療的患者僅有78%治愈。,近來(lái)，已經(jīng)開始研究針對(duì)幽門螺桿菌感染的治療性疫苗。由于幽門螺桿菌引起的感染為慢性，加上長(zhǎng)期用藥后總會(huì)發(fā)生耐藥性，開展這一治療性疫苗的研究有一定價(jià)值。,（三）病毒型治療性疫苗 （virus curing vaccine）在病毒型疫苗中研究的最多的是：生殖道單純皰疹的治療性疫苗，慢性乙肝治療性疫苗，HIV感染的治療性疫苗。目前這些疫苗已有臨床研究的資料。此外，也

13、有學(xué)者在研究HCV，人類乳頭狀瘤病毒疫苗，并認(rèn)為有可能用于治療患者。,1、單純皰疹治療性疫苗1987年Stanberry 等在豚鼠的生殖道模型中發(fā)現(xiàn)，用HSV作預(yù)防性免疫，不僅可預(yù)防HSV感染，還可減少75%的病毒發(fā)作的次數(shù)與縮短病期。用克隆表達(dá)的HSV糖蛋白gD2也同樣有效。實(shí)驗(yàn)中，疫苗明顯地誘生了對(duì)HSVⅡ的中和抗體，并且使對(duì)gD2的抗體效價(jià)增高了4倍。由于抗體的效價(jià)并不與HSV的復(fù)發(fā)呈相關(guān)性，認(rèn)為疫苗的效果可能與細(xì)胞免疫或細(xì)胞因

14、子有關(guān)。治療性疫苗可以改變病毒慢性感染（持續(xù)性感染）的病程。結(jié)果還提示可進(jìn)一步修飾gD2抗原，或改變佐劑以提高療效。,2、人類免疫缺陷病毒（HIV）的治療性疫苗 HIV感染導(dǎo)致的慢性進(jìn)行性免疫缺陷，最終發(fā)生致死的嚴(yán)重后果。 HIV的包膜抗原成分gp160曾經(jīng)克隆表達(dá)后，先用于正常人體，證明無(wú)毒性，以后1991年用于治療30名處于HIV感染第1、2期的患者。,最近，除gp160外，其他的HIV的包膜抗原，如gp120，p

15、24病毒樣顆粒、重組的金絲雀痘病毒gp160等疫苗均仍在研究中。第12屆世界艾滋病大會(huì)，Valentine等已報(bào)道，用多種藥物先治療，再用滅活、但去除了gp120的疫苗免疫，可誘生強(qiáng)而顯著的對(duì)p24的細(xì)胞增殖應(yīng)答。這些發(fā)現(xiàn)又一次激發(fā)了對(duì)HIV治療性疫苗的研制熱情。,3、人類乳頭狀瘤病毒治療性疫苗 人類乳頭狀瘤病毒（HPV）可引起皮膚疣，生殖道疣等，其中的某些類型是潛在的致宮頸癌的病毒。1999年已報(bào)道美國(guó)學(xué)者用

16、HPV的L2E7融合基因表達(dá)蛋白治療25名生殖道疣的II期臨床研究結(jié)果。應(yīng)用重組表達(dá)的HPV蛋白與Aldrogel（氫氧化鋁類）共免疫，25名患者在治療后8周完全清除了生殖道疣。,（四）裸核酸型治療性疫苗 （naked nucleic acid） 1993年經(jīng)Merck公司在流感病毒預(yù)防性疫苗的研制中證實(shí)，裸DNA確有免疫原性后，已成為全球疫苗研究的最熱點(diǎn)。作為治療性疫苗，裸DNA已被用于治療腫瘤、自身免疫病、

17、傳染病等。,1、裸核酸作為治療性疫苗（DNA疫苗）的優(yōu)點(diǎn)（1）誘生表位-靶向免疫應(yīng)答（2）擴(kuò)大免疫原性的幅度（3）誘生CTL （4）便于加入免疫調(diào)控因子,,,,,2、DNA疫苗用于腫瘤治療用基因工程的方法修飾腫瘤細(xì)胞或免疫細(xì)胞，使其分泌某些細(xì)胞因子從而可誘生炎癥反應(yīng)或免疫應(yīng)答，達(dá)到清除腫瘤的效果。由于腫瘤中很少具有特異性抗原，因此只能用轉(zhuǎn)染細(xì)胞因子的基因進(jìn)行研究。在腫瘤DNA免疫治療中的另一個(gè)問(wèn)題是，多次注入轉(zhuǎn)染的基因細(xì)胞

18、后，是否會(huì)引起對(duì)細(xì)胞因子的免疫應(yīng)答而失效或造成不良后果。,3、DNA疫苗用于治療自身免疫病為研究DNA免疫是否可用于治療自身免疫病，學(xué)者們用鼠的實(shí)驗(yàn)性自身免疫性腦炎（EAE），一種T細(xì)胞介導(dǎo)的自身免疫病模型進(jìn)行了研究。實(shí)驗(yàn)證明，用針對(duì)致病V基因產(chǎn)物的單克隆抗體，或用致病性TCRV區(qū)的抗原決定簇合成肽免疫，均有治療自身免疫性腦炎（EAE）的作用。這一結(jié)果顯示DNA免疫在自身免疫病中可使TH1類免疫應(yīng)答向TH2類免疫應(yīng)答轉(zhuǎn)化，從而對(duì)具

19、有對(duì)多發(fā)性硬化癥，青年型糖尿病，類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎等自身免疫性疾病有潛在的治療作用。,4、DNA疫苗用于治療結(jié)核病對(duì)于DNA免疫預(yù)防結(jié)核病的研究，在小鼠中顯示了很好的效果。Tascon于1996年用編碼分枝桿菌65kDa熱休克蛋白（hsp65）的質(zhì)粒DNA免疫小鼠，動(dòng)物不僅可誘生特異的體液與細(xì)胞免疫，還可抵抗用結(jié)核桿菌的攻擊。DNA免疫所獲得的免疫保護(hù)作用可與用卡介苗免疫的效果相同。用hsp65蛋白免疫鼠則無(wú)此作用。,用編碼分枝桿菌另

20、一種蛋白（36kDa富含脯氨酸）的DNA免疫也對(duì)小鼠具有保護(hù)作用。當(dāng)以hsp65DDNA和IL-12DNA聯(lián)合免疫則反而效果下降，說(shuō)明互相有拮抗作用。當(dāng)先用化療，再用DNA免疫，則可清除結(jié)核菌，誘生特異的體液和細(xì)胞免疫。,5、DNA疫苗用于治療艾滋病 用編碼HIV的gp160的DNA疫苗肌肉注射免疫，在動(dòng)物中可誘生抗體。在猴免疫缺陷病毒感染的模型中，HIV DNA免疫也顯示有一定療效。Calarota等（1998）用編碼HIV調(diào)控因

21、子的基因組建的DNA疫苗治療了9名無(wú)癥狀的HIV感染者，結(jié)果8名患者產(chǎn)生了特異的CTL，并且未發(fā)生副反應(yīng)。MacGregor等（1998）對(duì)15例無(wú)癥狀的HIV感染者，用編碼env和rev的DNA疫苗進(jìn)行了注射。有些患者出現(xiàn)了gp120的抗體或?qū)p160的CTL。臨床顯示DNA免疫的安全性和潛在的肝免疫原性。,第三節(jié) 乙型肝炎復(fù)合物型治療性疫苗（ Curing vaccine of Compound HBV ）一、乙型肝炎治

22、療性疫苗的研究進(jìn)展（research advance）80年代初國(guó)外已有報(bào)道用乙肝預(yù)防性疫苗治療HBsAg陽(yáng)性兒童，無(wú)癥狀攜帶者及慢性肝炎患者的臨床研究，均被證明無(wú)效。從90年代初，法國(guó)學(xué)者又開始了用預(yù)防性疫苗治療乙肝患者的研究。1994年P(guān)ol等用重組GenHavacB疫苗（CHO細(xì)胞表達(dá)）的HBsAg+PreS2,20μg/次，每月一次，共三次，治療慢性乙肝患者，以后進(jìn)一步用疫苗治療加用干擾素，結(jié)果32名患者31%血清HBVDN

23、A轉(zhuǎn)陰，4名降低（13%）。,此后，巴斯德研究所開展了多中心雙盲對(duì)照的大規(guī)模臨床研究；Coullin等于1999年已報(bào)道在治療者中，27名患者中的7名出現(xiàn)了對(duì)HBsAg的特異性淋巴細(xì)胞增殖反及釋放更高的TH1類的細(xì)胞因子。我國(guó)在這一研究中缺少雙盲對(duì)照，及所用檢測(cè)試劑的標(biāo)準(zhǔn)化與可比性間尚有不足之處。,Chisari等以HBsAg為治療性疫苗的病毒表位也做了許多工作。他們找到了能在HLAA2人體中誘生CTL應(yīng)答的表位肽（p18-27）；

24、Vitello等（1995）用該肽加入破傷風(fēng)類毒素肽p830-843，再加入2個(gè)分子的棕閭酸作為類脂成分，制成的治療性疫苗（商品名為TheradigmHBV），可100%的誘生CTL。,在裸核酸免疫（DNA免疫）治療性方面，用轉(zhuǎn)基因鼠取得了很有希望的結(jié)果。法國(guó)學(xué)者（Michel，1995）首先在正常鼠中證明，以編碼有HBsAg100 μg的裸DNA免疫可引起細(xì)胞及抗體免疫應(yīng)答。Shimizu等（1998）在5種不同品系的HBV轉(zhuǎn)基因

25、鼠中發(fā)現(xiàn)，體外用細(xì)胞因子激活樹突狀細(xì)胞（DC），可以有效地激活轉(zhuǎn)基因鼠中的CTL，并認(rèn)為處理DC較DNA免疫更強(qiáng)。,二、免疫復(fù)合物型乙型肝炎治療性疫苗（ Immunocompound Curing Vaccine for HBV ）我國(guó)863高技術(shù)計(jì)劃支持下，早在1988年起，已開始了對(duì)治療性乙肝疫苗的研究。根據(jù)我國(guó)多數(shù)乙肝患者是幼齡感染乙肝病毒，加之慢性乙肝患者血清中無(wú)有效的抗HBsAg抗體及細(xì)胞免疫應(yīng)答，研究課題組提出了多數(shù)患

26、者處于對(duì)HBsAg免疫耐受的狀態(tài)，而治療性疫苗的抗原應(yīng)以HBsAg為靶抗原，通過(guò)消除機(jī)體對(duì)HBsAg的免疫耐受性，以產(chǎn)生有效免疫應(yīng)答的治療患者的路線。分以下階段進(jìn)行。,1、建立動(dòng)物實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ?利用鴨乙肝動(dòng)物模型，研究幼齡感染鴨是否可造成模擬人感染的對(duì)HBsAg的免疫耐受狀態(tài)。在獲得確可建立實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型的基礎(chǔ)上，確立了免疫耐受動(dòng)物模型的標(biāo)準(zhǔn)，規(guī)定了觀察時(shí)間，以及判斷消除免疫耐受狀態(tài)的指標(biāo)，建立了可供研究人乙肝

27、免疫耐受狀態(tài)的動(dòng)物模型并進(jìn)行了消除免疫耐受性的實(shí)驗(yàn)研究。,2、探討消除免疫耐受狀態(tài)的治療策略在主動(dòng)免疫與被動(dòng)免疫中進(jìn)行了選擇。主動(dòng)免疫的優(yōu)點(diǎn)為：注入有效的免疫原方法簡(jiǎn)單，安全性較高，通過(guò)調(diào)動(dòng)機(jī)體本身的免疫應(yīng)答，故有效持續(xù)的時(shí)間可較長(zhǎng)。其缺點(diǎn)為，如患者的免疫應(yīng)答普遍低下，則效果會(huì)較差。,被動(dòng)免疫包括輸入經(jīng)細(xì)胞因子激活或改造的自身免疫細(xì)胞或輸入具有對(duì)HBsAg強(qiáng)免疫應(yīng)答的他人免疫細(xì)胞等。由于已證實(shí)被動(dòng)輸入抗HBs僅能短暫使血清中的HB

28、sAg滴度下降，并無(wú)治療作用，故不再考慮。被動(dòng)免疫的操作復(fù)雜，選擇對(duì)象嚴(yán)格，需特別防止污染，醫(yī)療環(huán)境的要求高。鑒于慢性乙肝感染者不同于HIV感染者或腫瘤患者，一般具有對(duì)抗原刺激的正常應(yīng)答，僅為對(duì)HBsAg有免疫耐受，因此可定位于主動(dòng)免疫。,主動(dòng)免疫策略為： ①改變抗原組分，使機(jī)體從免疫耐受轉(zhuǎn)為識(shí)別抗原而產(chǎn)生免疫應(yīng)答； ②調(diào)節(jié)抗原提呈的方式或途徑，使機(jī)體對(duì)經(jīng)調(diào)節(jié)后提呈的HBsAg產(chǎn)生免疫應(yīng)答。,3、改變抗原組分在鴨乙肝病毒包膜抗原

29、中用合成肽段及用合成肽免疫動(dòng)物的方法，選擇強(qiáng)免疫原性決定簇。最終發(fā)現(xiàn)鴨乙肝病毒PreS的第125~146氨基酸的免疫原性強(qiáng)，用該肽段免疫所獲得的抗體可與天然鴨乙肝病毒包膜結(jié)合。美學(xué)者證實(shí)該肽段位于中和性抗原表位中，更明確可用此肽作為候選治療性疫苗。用該肽段與破傷風(fēng)類毒素交聯(lián)免疫耐受鴨，可以使50%鴨的病毒DNA轉(zhuǎn)陰，但多次應(yīng)用后效果未見提高。此后進(jìn)行了用雙肽共免疫的主動(dòng)免疫法。,,將鴨乙肝病毒包膜PreS125-146肽與破傷風(fēng)類毒素

30、中的830-843（能有效地激活T細(xì)胞的肽）共免疫耐受鴨，試圖消除免疫耐受，效果比前一種組分更差。合成肽的結(jié)果說(shuō)明，試圖單用合成肽組分制備治療性疫苗的途徑以消除對(duì)乙肝病毒的免疫耐受性，成功的機(jī)會(huì)極少。,,4、調(diào)節(jié)抗原提呈途徑或方式對(duì)鴨乙肝病毒包膜抗原進(jìn)行了三種不同的調(diào)節(jié)抗原提呈實(shí)驗(yàn)。①首先獲得了鴨乙肝病毒編碼的DHBsAg+PreS克隆，再通過(guò)與痘苗病毒重組，獲得在細(xì)胞中可表達(dá)鴨乙肝病毒包膜抗原的重組痘苗。在正常鴨中，接種該重組株后

31、，鴨血清中可測(cè)及DHBsAg。證明這一重組痘苗可在鴨體內(nèi)表達(dá)抗原后，用以在免疫耐受鴨中進(jìn)行治療。結(jié)果顯示，結(jié)合痘苗病毒的復(fù)制與抗原調(diào)節(jié)提呈DHBsAg，并不能有效地消除免疫耐受性。,②第二種調(diào)節(jié)的途徑為，通過(guò)將DHBsAg與葡萄球菌Cowan I株，及抗DHBsAg組建成固相抗體抗原免疫原性復(fù)合物（SMAA），以調(diào)節(jié)DHBsAg的抗原提呈。用SMAA免疫耐受鴨后，可在約50%的耐受鴨中清除DHBsAg，在60%~70%鴨中清除病毒DNA

32、，并在部分鴨中產(chǎn)生了抗DHBs。在SMAA實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，單用DHBsAg+抗DHBsAg組建免疫原性復(fù)合物（IC，immunogenic complex），也具有可以在約50%耐受鴨中清除病毒及DHBsAg的作用。,③第三種對(duì)調(diào)節(jié)DHBsAg抗原提呈的研究是用抗原加特異的抗體可提高抗原的免疫原性，但用這種制劑消除免疫耐受的途徑未見報(bào)道。經(jīng)多次實(shí)驗(yàn)證實(shí)DHBsAg+抗DHBsAg組建成復(fù)合物，確能消除部分鴨的免疫耐受性。這一種治療性疫苗的研

33、制已獲我國(guó)發(fā)明專利（1997年授權(quán)）。,5、研制并開發(fā)可供人體應(yīng)用的治療性疫苗為盡快開發(fā)，可供人體應(yīng)用的治療性疫苗，選擇了乙肝疫苗及人高效價(jià)抗乙肝免疫球蛋白（HBIG）組建免疫復(fù)合物型治療性疫苗。在抗原抗體配比，制備疫苗的工藝，產(chǎn)品標(biāo)化，效力試驗(yàn)的參比實(shí)驗(yàn)等技術(shù)方面進(jìn)行了研究，與下游單位協(xié)同合作，現(xiàn)已進(jìn)入中試。,6、研究復(fù)合物型疫苗的作用機(jī)制 為研究復(fù)合物型疫苗的作用機(jī)制，選用了免疫學(xué)基礎(chǔ)研究較成熟的小鼠為研究模型。結(jié)果證明復(fù)合物型

34、乙肝治療性疫苗的作用機(jī)制為:1）通過(guò)復(fù)合物中抗體的Fc段，與抗原提呈細(xì)胞表面的Fc受體結(jié)合，促進(jìn)了細(xì)胞攝取抗原。當(dāng)用酶消化去除抗HBs的Fc段，雖可形成抗原-抗體Fab段的復(fù)合物，但不能增強(qiáng)被巨噬細(xì)胞所攝取。,當(dāng)用異種動(dòng)物（如羊）的抗HBs組建復(fù)合物，因與鼠的巨噬細(xì)胞的Fc受體不相應(yīng)，也不能促進(jìn)抗原的攝入與提呈。2）復(fù)合物中的抗原經(jīng)提呈后可比單純抗原更有效地激活T細(xì)胞增殖，釋放更多的γ-干擾素和IL-2，屬TH1類應(yīng)答。復(fù)合物在正常

35、小鼠中誘生的抗HBS較單純抗原誘生的抗體高10倍以上。,第四節(jié) 治療性疫苗的開發(fā)現(xiàn)狀（exploitation status of curing vaccine）目前，全世界發(fā)達(dá)國(guó)家與發(fā)展中國(guó)家的多數(shù)政府與企業(yè)均投入大量人力與物力開發(fā)治療性疫苗。①微生物的重組蛋白疫苗，因其抗原性及保護(hù)性抗原明確，而且預(yù)防性疫苗應(yīng)用的基礎(chǔ)較扎實(shí)，容易被批準(zhǔn)，是開發(fā)的熱點(diǎn)，短期內(nèi)可見效果。,②腫瘤及自身免疫病的治療性疫苗中的少數(shù)可能會(huì)有所發(fā)展，以腫

36、瘤的可能較大，并且是作為綜合治療的一部分。③DNA疫苗今后在一些微生物感染中的治療性疫苗的作用不可低估。現(xiàn)將所公布的治療性疫苗的開發(fā)現(xiàn)狀列于表8-1。,表8-1 治療性疫苗的開發(fā)現(xiàn)狀,第五節(jié) 我國(guó)治療性疫苗的開發(fā)戰(zhàn)略（exploitation strategy of our curing vaccine） 傳染病仍是危害我國(guó)人民健康的重要疾病。微生物引起的持續(xù)性感染占很高比重。發(fā)展治療性疫苗將對(duì)治療持續(xù)性感染作出有益的貢獻(xiàn)。

37、開發(fā)治療性疫苗所需經(jīng)費(fèi)相對(duì)比較低廉，便于推廣和應(yīng)用；我國(guó)具有較強(qiáng)的預(yù)防性疫苗的研制與生產(chǎn)單位及經(jīng)驗(yàn)，已在乙肝治療性疫苗進(jìn)行了較系統(tǒng)的研究與開發(fā)，在國(guó)際上治療性疫苗也僅開始起步，如果我國(guó)能抓緊時(shí)機(jī)，選準(zhǔn)目標(biāo)產(chǎn)品，將能有所創(chuàng)新，并占有一定的市場(chǎng)份額。,（1）以微生物引起的慢性感染為對(duì)象。包括： ①持續(xù)性病毒感染如乙肝、丙肝、人類乳頭狀瘤病毒感染、人類免疫缺陷病毒感染等。②細(xì)菌性感染可選擇結(jié)核及布魯氏菌感染等。 先進(jìn)行蛋白