實(shí)驗(yàn)一_苯酚的高效液相色譜法

1、實(shí)驗(yàn)一高效液相色譜法紫外法測(cè)定水中的苯酚含量一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?、熟悉高效液相色譜儀的結(jié)構(gòu)2、掌握苯酚的高效液相色譜紫外測(cè)定法3、熟練掌握高效液相色譜儀的操作二、實(shí)驗(yàn)原理苯酚是最簡(jiǎn)單的酚，為無(wú)色固體，有特殊氣味，顯酸性。苯酚是有機(jī)化工工業(yè)的基本原料，可通過(guò)多種途徑對(duì)環(huán)境水體造成污染，對(duì)人類、魚(yú)類以及農(nóng)作物帶來(lái)嚴(yán)重危害。根據(jù)國(guó)家環(huán)保部門有關(guān)規(guī)定，工作場(chǎng)所苯酚的最高允許質(zhì)量濃度為5106μgL，飲用水中為2μgL，地面水中為0.1mgL。苯酚的測(cè)

2、量方法有多種，如溴化容量法、比色法、高效液相色譜法等。但前兩種方法分析速度較慢、精度較低，高效液相色譜法是近年來(lái)發(fā)展起來(lái)的一種新技術(shù)，具有分析速度快、檢測(cè)靈敏度高、操作簡(jiǎn)便、樣品用量少等特點(diǎn)。三、儀器和試劑1、設(shè)備及試劑安捷倫高效液相色譜儀1100，紫外檢測(cè)器，C18色譜柱。苯酚(分析純)，甲醇(色譜純)，二次蒸餾水。2、操作條件色譜柱為C18柱；流動(dòng)相為甲醇二次蒸餾水=80∶20(體積比)；檢測(cè)波長(zhǎng)為270nm；流速為1.0mlmin

3、；進(jìn)樣量為20μL。四、實(shí)驗(yàn)步驟1、標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備稱取純苯酚600mg于100.0ml容量瓶中，用適量甲醇溶解，用甲醇稀釋至刻度。分別吸取該溶液(單位:ml)0.0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0于50ml的容量瓶中，用甲醇稀釋至刻度。得到標(biāo)準(zhǔn)系列溶液。分別采用高效液相色譜紫外法測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)溶液，記錄色譜峰面積，以濃度為橫坐標(biāo)、峰面積為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。2、樣品分析10mL三支、1.5mL一次性離心管一支2.試劑：甲醇（色譜純）；

4、苯酚標(biāo)準(zhǔn)使用溶液（10mgL）待測(cè)水樣四、實(shí)驗(yàn)步驟1標(biāo)準(zhǔn)系列配制取苯酚標(biāo)準(zhǔn)使用液0.50、1.00、2.00mL于10mL的具塞離心管中，用甲醇定容至5mL，混勻。待測(cè)。2樣品的制備取水樣約1mL于1.5mL一次性離心管中。待測(cè)。3色譜參數(shù)色譜柱：C18柱；流動(dòng)相：乙腈、水；梯度洗脫程序：洗脫時(shí)間0:004:004:015:005:018:00乙腈（%）656575756565流速：1.0mLmin；柱溫：室溫；進(jìn)樣量：20μL；檢測(cè)器