釔離子對(duì)氟喹諾酮藥物熒光增強(qiáng)效應(yīng)的研究及應(yīng)用

1、釔離子對(duì)氟喹諾酮藥物熒光增強(qiáng)效應(yīng)的研究及應(yīng)用,答辯人：趙昕昕專業(yè)：食品質(zhì)量與安全指導(dǎo)教師：孫春燕,主要內(nèi)容,緒論實(shí)驗(yàn)部分 釔離子對(duì)氟喹諾酮類藥物的熒光增強(qiáng)效應(yīng) 釔-銪-氟喹諾酮類藥物配合物熒光性初探結(jié)論致謝,Fluoroquinolones FQs,氟喹諾酮類藥物是指人工合成的具有4-喹諾酮環(huán)基苯結(jié)構(gòu)的新型抗菌藥，種類繁多，廣泛應(yīng)用于臨床醫(yī)學(xué)。,,依諾沙星(ENX)環(huán)丙沙星(

2、CPFX)諾氟沙星(NFLX)洛美沙星(LMFX)氟羅沙星(FLRX)氧氟沙星 （OFL） 培氟沙星 （PEF） 氟甲喹 （FLU）蘆氟沙星(RFX)斯帕沙星(SPFX)加替沙星(GFLX) 格帕沙星（GPFX）帕珠沙星（PZFX）沙拉沙星（SAR）,緒論,獸藥殘留問(wèn)題,檢驗(yàn)方法,微生物法免疫分析法高效液相法熒光光度法,熒光增強(qiáng)機(jī)理不同,稀土離子+氟喹諾酮類藥物 （Eu3+,Tb3+等）——稀土離子特征熒

3、光稀土離子+氟喹諾酮類藥物 （La3+，Y3+等）——增強(qiáng)氟喹諾酮的熒光稀土離子共發(fā)光效應(yīng)表面活性劑增敏,稀土離子與氟喹諾酮類藥物配合物的熒光性質(zhì),立題思想,稀土離子Y增強(qiáng)氟喹諾酮類藥物的熒光性,,檢測(cè)氟喹諾酮類藥物,,以下分別為環(huán)丙沙星，培氟沙星，依諾沙星的結(jié)構(gòu)圖,,,儀器與設(shè)備,熒光分光光度計(jì)（上海三科儀器有限公司970CRT型）Cary 100 紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì)（美國(guó)瓦里安公司）920 穩(wěn)態(tài)熒光分光光度計(jì)（英

4、國(guó)Edinburgh公司）pH計(jì) (PHS-3C,上海康儀有限責(zé)任公司),三氧化二釔標(biāo)準(zhǔn)品 三氧化二銪標(biāo)準(zhǔn)品 環(huán)丙沙星 培氟沙星依諾沙星,實(shí)驗(yàn)部分,,釔離子對(duì)氟喹諾酮類藥物的熒光增強(qiáng)效應(yīng),材料與試劑,熒光光譜檢測(cè),5 ml 1.0 ×10-4 mol/L 釔離子溶液,1 ml 1.0 ×10-5 mol/L 環(huán)丙沙星/培氟沙星/依諾沙星,2 ml 0.2 mol/L Tris-H

5、C1緩沖溶液,++加二次蒸餾水定容至10ml，放置15分鐘，用熒光分光光度計(jì)測(cè)定熒光強(qiáng)度,,實(shí)驗(yàn)方法,結(jié)果與討論 ———紫外可見(jiàn)吸收光譜,,,,1.0 ×10-5 mol/L環(huán)丙沙星的紫外可見(jiàn)吸收光譜,1.0 ×10-5 mol/L培氟沙星的紫外可見(jiàn)吸收光譜,1.0 ×10-5 mol/L依諾沙星的紫外可見(jiàn)吸收光譜,熒光光譜,,環(huán)丙沙星加入釔離子前后的熒光光譜圖,,培氟

6、沙星加入釔離子前后的熒光光譜圖,,依諾沙星加入釔離子前后的熒光光譜圖,,實(shí)驗(yàn)條件：5.0×10-5 mol/L釔離子溶液，1ml 1.0 ×10-6 mol/L氟喹諾酮類藥物，2ml 0.2 mol/L Tris-HC1緩沖溶液,,緩沖溶液對(duì)體系的影響,不同緩沖溶液對(duì)Y3+-培氟沙星體系熒光強(qiáng)度的影響實(shí)驗(yàn)條件：5.0×10-5 mol/L釔離子溶液，1ml 1.0 ×10-6 mol/L氟喹諾

7、酮類藥，2ml 緩沖溶液,,pH值對(duì)體系的影響,pH值對(duì)Y3+-環(huán)丙沙星體系熒光強(qiáng)度的影響,pH=5.0,pH=5.0,pH=5.5,pH值對(duì)Y3+-培氟沙星體系熒光強(qiáng)度的影響,pH值對(duì)Y3+-依諾沙星體系熒光強(qiáng)度的影響,實(shí)驗(yàn)條件：5.0×10-5 mol/L釔離子溶液，1 ml 1.0 ×10-6 mol/L氟喹諾酮類藥物， 2 ml 0.2 mol/L Tris-HC

8、1緩沖溶液,Y3+濃度對(duì)體系的影響（以培氟沙星為例）,釔離子對(duì)培氟沙星熒光強(qiáng)度的影響實(shí)驗(yàn)條件：1 ml 1.0 ×10-6 mol/L培氟沙星溶液，2 ml 0.2 mol/L Tris-HC1緩沖溶液,干擾離子的影響 與體系穩(wěn)定性試驗(yàn),以釔-培氟沙星為例，加入的干擾物質(zhì)的相對(duì)熒光強(qiáng)度在±5%范圍內(nèi)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，結(jié)果表明實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明100倍的K+、Na+、Mg2+、Ca2+;100倍

9、的Zn2+、Fe3+;10倍的Ni2+、Mn2+、Pb2+對(duì)體系均無(wú)干擾。 體系在配位后即刻產(chǎn)生熒光，隨著時(shí)間的增加熒光強(qiáng)度有微弱的增強(qiáng)，在15分鐘后熒光強(qiáng)度達(dá)到最大值，之后保持穩(wěn)定，同時(shí)可在2天內(nèi)保持穩(wěn)定。,分析應(yīng)用,培氟沙星在濃度范圍為1.0 ×10-6 mol/L-20.0×10-6 mol/L時(shí)，呈現(xiàn)很好的線性關(guān)系檢出限為8.5×10-8 mol/L,樣品測(cè)定,線性方程為y = 20.285

10、x - 23.152，測(cè)定結(jié)果準(zhǔn)確度高且靈敏度高。,工作曲線及檢出限,機(jī)理的初步探討,La3+，Lu3+，Y3+，Sc3+等離子在與氟喹諾酮類藥物藥物結(jié)合后，由于其結(jié)構(gòu)穩(wěn)定，不能產(chǎn)生能量轉(zhuǎn)移而增強(qiáng)稀土離子的特征峰。而當(dāng)其m1電子能級(jí)在配合物的S1能級(jí)之上時(shí)，這些稀土離子相當(dāng)于一個(gè)惰性原子，與氟喹諾酮類藥物形成一個(gè)螯合物，并使配位體轉(zhuǎn)變?yōu)閯傂云矫娼Y(jié)構(gòu)或加強(qiáng)了其剛性，使原來(lái)不發(fā)熒光或弱熒光的配位體轉(zhuǎn)變?yōu)榘l(fā)強(qiáng)熒光的物質(zhì)。,討 論,本文對(duì)

11、稀土離子釔對(duì)氟喹諾酮類藥物的熒光增強(qiáng)效應(yīng)進(jìn)行了研究，對(duì)各種影響因素進(jìn)行了條件優(yōu)化，并對(duì)機(jī)理進(jìn)行了初步探討，建立了利用釔增強(qiáng)氟喹諾酮藥物熒光檢測(cè)該類藥物的新方法。該方法具有操作簡(jiǎn)單，檢測(cè)快速且靈敏度高的特點(diǎn)，干擾少，穩(wěn)定性好，若與分離技術(shù)相結(jié)合，在食品中氟喹諾酮類藥物殘留的檢測(cè)方面具有良好的應(yīng)用前景。,釔-銪-氟喹諾酮類藥物配合物熒光性初探,實(shí)驗(yàn)材料，儀器及溶液：實(shí)驗(yàn)方法：優(yōu)化實(shí)驗(yàn)條件： pH值及緩沖溶液的

12、影響 釔離子的影響 表面活性劑的影響,實(shí)驗(yàn)結(jié)果與討論,依諾沙星，銪-依諾沙星的熒光發(fā)射光譜圖,依諾沙星，銪-依諾沙星，銪-釔-依諾沙星的熒光發(fā)射光譜圖,實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明當(dāng)銪離子與依諾沙星形成配合物時(shí)發(fā)生能量轉(zhuǎn)移，依諾沙星的熒光強(qiáng)度減弱，同時(shí)銪的熒光強(qiáng)度增強(qiáng)。但加入釔之后，銪的特征峰沒(méi)有熒光增強(qiáng)效應(yīng)，只是增強(qiáng)了依諾沙星的熒光強(qiáng)度,綠線：依諾沙星黃線：銪-依諾沙星,紅線：依諾沙星黃線

13、：銪-依諾沙星綠線：銪-釔-依諾沙星,實(shí)驗(yàn)結(jié)果與討論,在表面活性劑的影響試驗(yàn)中，Triton X- 100對(duì)體系無(wú)增敏作用，CTMA，SDBS和SDS則有不同程度的增敏作用，其中以SDS效果最好。說(shuō)明在實(shí)驗(yàn)條件下，釔離子只能微弱的增強(qiáng)銪-依諾沙星的敏化熒光特性，對(duì)銪-依諾沙星體系的能量轉(zhuǎn)移并無(wú)太大影響。,銪-釔-依諾沙星，銪-釔-依諾沙星-SDS的熒光發(fā)射光譜圖,黃線：銪-釔-依諾沙星綠線：銪-釔-依諾沙星-SDS,討論,本文

14、在文獻(xiàn)報(bào)道的基礎(chǔ)上對(duì)釔-銪-氟喹諾酮類藥物的熒光增敏作用進(jìn)行了初步探索，但結(jié)果并不理想，分析可能是由于產(chǎn)生共發(fā)光效應(yīng)的稀土離子的選擇及實(shí)驗(yàn)條件有所誤差，反應(yīng)的實(shí)驗(yàn)條件有待進(jìn)一步優(yōu)化。,在此對(duì)孫春燕老師辛勤的教育和指導(dǎo)表示衷心的感謝。同時(shí)，在論文實(shí)驗(yàn)過(guò)程給予支持和建議的盧靜老師，王海波老師，卜秀娟老師以及食品質(zhì)量與安全的全體指導(dǎo)老師表示誠(chéng)摯的謝意。 感謝在論文工作中給予我?guī)椭椭С值暮|(zhì)云同學(xué)，趙磊同學(xué)，劉立國(guó)同學(xué)，周立灶同學(xué)，我