酶基因的隨機突變

1、酶基因的隨機突變酶基因的隨機突變1引言：引言：酶分子的定向進化簡稱為酶定向進化，是模擬自然進化過酶分子的定向進化簡稱為酶定向進化，是模擬自然進化過程（隨機突變和自然選擇）程（隨機突變和自然選擇），在體外進行酶基因的人工隨機突變，，在體外進行酶基因的人工隨機突變，建立突變基因文庫，在人工控制條件的特殊環(huán)境下，定向選擇建立突變基因文庫，在人工控制條件的特殊環(huán)境下，定向選擇得到具有優(yōu)良催化特性的酶的突變體的技術過程。得到具有優(yōu)良催化特性的酶的

2、突變體的技術過程。酶定向進化的基本過程包括隨機突變，構建基因文庫，定酶定向進化的基本過程包括隨機突變，構建基因文庫，定向選擇等步驟。酶的定向進化的第一步是在體外人為的進行積向選擇等步驟。酶的定向進化的第一步是在體外人為的進行積陰德隨機突變，以獲得豐富多樣的突變基因，為后續(xù)的定向選陰德隨機突變，以獲得豐富多樣的突變基因，為后續(xù)的定向選擇打下基礎。擇打下基礎。酶基因的體外隨機突變首先要獲得酶基因，然后在體外進酶基因的體外隨機突變首先要獲得酶

3、基因，然后在體外進行隨機突變，體外隨機突變的技術多種多樣，主要有易錯行隨機突變，體外隨機突變的技術多種多樣，主要有易錯PCRPCR技術，技術，DNADNA重排技術，基因家族重排技術等。重排技術，基因家族重排技術等。這些突變方法的目標都是為了獲得豐富多樣的突變基因，這些突變方法的目標都是為了獲得豐富多樣的突變基因，但是各自采用的進化策略和側重點有所不同，易錯但是各自采用的進化策略和側重點有所不同，易錯PCRPCR技術是技術是從酶的單一基因

4、出發(fā)，通過改變聚合酶鏈式反應的條件，如改從酶的單一基因出發(fā)，通過改變聚合酶鏈式反應的條件，如改變底物和鎂離子濃度等，在變底物和鎂離子濃度等，在PCRPCR擴增過程中，使堿基配對錯誤擴增過程中，使堿基配對錯誤而引起基因突變；而引起基因突變；DNADNA重排技術是從兩條以上的正突變基因出重排技術是從兩條以上的正突變基因出發(fā)，經過酶切和不加引物的發(fā)，經過酶切和不加引物的PCRPCR擴增，使擴增，使DNADNA堿基序列重新排堿基序列重新排布而引

5、起的基因突變；基因家族重排技術是從基因家族的多個布而引起的基因突變；基因家族重排技術是從基因家族的多個同源基因出發(fā)，經過酶切和不加引物的同源基因出發(fā)，經過酶切和不加引物的PCRPCR擴增等，使擴增等，使DNADNA的堿基序列重新排布而引起基因突變。這些隨機突變方法可以單堿基序列重新排布而引起基因突變。這些隨機突變方法可以單2.3基因家族重排技術：又稱為基因家族改組技術，是從基因家族的若干同源基因出發(fā)，勇酶切割成隨機片段，經過不加引物的多