2018年藥物分析項(xiàng)目18在用

1、,,第十八章 藥物制劑分析概論Chapter18 The analysis of finished pharmaceutical product劉雨農(nóng),,,,1,,,1,,,2,,,3,,,4,藥物制劑的類型及其分析特點(diǎn),片劑分析,注射劑分析,復(fù)方制劑分析,,,,5,,第一節(jié)藥物制劑類型及其分析特點(diǎn),一、藥物制劑類型二、藥物制劑的分析特點(diǎn)三、藥物制劑的穩(wěn)定性和相容性試驗(yàn)四、藥物制劑的過程分析,,,原料藥經(jīng)過一定的生產(chǎn)工藝

2、制成適合于應(yīng)用的形式,稱為藥物制劑(或劑型)。,一、藥物制劑的類型,,,二、藥物制劑的特點(diǎn),（一）藥物制劑性狀分析的特點(diǎn)：僅包括感觀。（二）藥物制劑鑒別的特點(diǎn)：弱化原料藥已鑒別項(xiàng)目（三）藥物制劑檢查的特點(diǎn)：包括雜質(zhì)、劑型、安全性（四）藥物制劑含量測(cè)定的特點(diǎn)：需預(yù)處理排除輔料干擾,,,1.藥物的穩(wěn)定性：指有效期內(nèi)在一定的溫度、濕度、光照等條件下，藥物保持其物理、化學(xué)、微生物學(xué)、藥理學(xué)及毒理學(xué)特性的能力。變化越小越穩(wěn)定。2.藥物的穩(wěn)

3、定性試驗(yàn)（1）影響因素試驗(yàn)：了解影響因素，降解途徑及產(chǎn)物（2）加速試驗(yàn)：超常貯藏條件下考察（3）長期試驗(yàn)：接近實(shí)際貯藏條件下考察,三、藥物制劑的穩(wěn)定性和相容性試驗(yàn),,,3.藥物的相容性：指組成藥物的各部分之間相互兼容，不發(fā)生物理、化學(xué)、微生物學(xué)相互作用的能力。 參照影響因素試驗(yàn)考察藥物與藥物、藥物與包材相容性,,,1.離線分析法：在生產(chǎn)過程中抽樣，在實(shí)驗(yàn)室分析；2.在線分析法：直接在生產(chǎn)環(huán)節(jié)自動(dòng)采樣分析，實(shí)時(shí)監(jiān)控；,四、藥物

4、制劑的過程分析,,,第二節(jié) 片劑分析,一、性狀分析：應(yīng)符合ChP2015四部“制劑通則”片劑項(xiàng)下規(guī)定。二、鑒別試驗(yàn)：應(yīng)排除輔料干擾三、劑型檢查：常規(guī)檢查重量差異和崩解時(shí)限四、含量測(cè)定：需預(yù)處理排除輔料干擾后進(jìn)行五、輔料及包材的分析：按ChP2015四部通則進(jìn)行,,,片劑系指藥物與適宜的輔料混勻壓制而成的圓片狀或異形片狀的固體制劑。,第二節(jié) 片劑分析,,,一、性狀 外觀完整光潔，色澤均勻 符合正文各品種項(xiàng)下

5、的性狀描述二、鑒別試驗(yàn) 采用過濾、離心、提取等操作排除輔料干擾，再依據(jù)藥物性質(zhì)，參考相應(yīng)原料藥的鑒別方法，選2~4種不同原理的分析方法，組成鑒別試驗(yàn)。,,,三、劑型檢查,常規(guī)檢查：重量差異和崩解時(shí)限 當(dāng)主藥與片劑輔料難以混合均勻時(shí)，應(yīng)以含量均勻度檢查替代重量差異檢查 當(dāng)片劑中的主藥水溶性差時(shí)，應(yīng)以溶出度測(cè)定替代崩解時(shí)限檢查,,,（一）重量差異與含量均勻度 重量差異和含量均勻度統(tǒng)稱為劑量單位均勻度（un

6、iformity of dosage units)，系指多個(gè)劑量單位中所含藥物量的均勻程度。ChP2010規(guī)定：標(biāo)示量不大于25mg或主藥含量不大于25%（g/g）的片劑應(yīng)檢查含量均勻度。凡規(guī)定檢查含量均勻度的片劑，不再檢查重量差異。,,,1. 重量差異檢查法,,,判斷 超出限度片 ≤2片 超出限度1倍片≤1片,規(guī)定,糖衣片在包衣前檢查薄膜衣片在包衣后檢查,,,取樣品10片（個(gè)），按規(guī)定方法

7、分別測(cè)定每片（個(gè)）以標(biāo)示量為100的相對(duì)含量X，計(jì)算X、A、S,A + 1.8 S =？,2. 含量均勻度檢查法,,,,（1）A + 1.80 S≤15.0,符合規(guī)定,不符合規(guī)定,（2）A + S＞15.0,（3）A + 1.80 S＞15.0，且 A+ S≤15.0,判斷標(biāo)準(zhǔn),符合規(guī)定,（若改變限度，則改變15.0）,,,,,（二）崩解時(shí)限與溶出度 崩解時(shí)限（disintegration）系指口服固體制劑應(yīng)在規(guī)定時(shí)間內(nèi)，于規(guī)

8、定條件下全部崩解溶散或成碎粒，除不溶性包衣材料或破碎的囊殼外，全部通過篩網(wǎng)。如有少量不能通過篩網(wǎng)，應(yīng)已軟化或輕質(zhì)上漂且無硬心。 溶出度（dissolution）系指在規(guī)定條件下藥物從片劑等制劑中溶出的速率和程度。 凡規(guī)定檢查溶出度的制劑，不再檢查崩解時(shí)限。,,,儀器：升降式崩解儀.（藥典附錄XA) 主要結(jié)構(gòu)為能升降的金屬支架與下端鑲有篩網(wǎng)的吊藍(lán),并附有擋板。,1. 崩解時(shí)限檢查,,,,,規(guī)定 素片

9、 ≤15′（37℃） 薄膜衣片≤30′（37℃） 糖衣片 ≤60′（37℃） 泡騰片 ≤5′ （15℃~25℃） 腸溶衣片=120′（鹽酸溶液） ≤60′（pH6.8）,,,2. 溶出度測(cè)定方法 取6片（個(gè)）分別置溶出度儀的6 個(gè)轉(zhuǎn)籃（或燒杯）中，3

10、7±0.5℃恒溫 下，在規(guī)定的溶液里按規(guī)定的轉(zhuǎn)速操 作，在規(guī)定時(shí)間內(nèi)測(cè)定藥物的溶出量。,Ch.P. 轉(zhuǎn)籃法、漿法、小杯法,,,溶出度儀,,,轉(zhuǎn)籃法,,,漿法,,,1000ml,,,小杯法,,,250ml,適用于含量較低的片劑溶出度,,,,,3. 片劑釋放度的測(cè)定,釋放度 藥物從緩釋制劑、控釋制劑、腸溶制劑及透皮貼劑等在規(guī)定條件下釋放的速率和程度。,注意 凡檢查釋放度的制劑，不再進(jìn)行崩解時(shí)限的檢查,,,釋放度測(cè)

11、定方法 第一法 用于緩釋、控釋制劑 至少三個(gè)時(shí)間點(diǎn)取樣 第二法 用于腸溶制劑 酸中釋放量、緩沖液釋放量 第三法 用于透皮貼劑 漿法,,,第一法至少在三個(gè)時(shí)間點(diǎn)取樣，并須及時(shí)補(bǔ)充與所取溶出液體積相同的溶出介質(zhì)。 第一取樣時(shí)間點(diǎn)為0.5~2小時(shí)，作為判斷制劑突釋的依據(jù)

12、； 第二取樣時(shí)間點(diǎn)為累積釋放量為50%的時(shí)間，表征制劑的釋藥特性； 最后取樣時(shí)間點(diǎn)為累積釋放量為75%以上的時(shí)間，該點(diǎn)可表征制劑釋藥的完全程度。,預(yù)處理,,干擾：氧化還原滴定；排除：預(yù)處理或除去改用其他測(cè)定法,四、含量測(cè)定 （一）糖類的干擾和排除,,,排除 1. 改用氧化電位稍低的氧化劑,,,排除 2. 改用非氧化還原測(cè)定方法,酸堿滴定法非水滴定法沉淀滴定法光譜法色譜法,,（二）硬脂酸鎂的

13、干擾和排除 硬脂酸鎂和棕櫚酸鎂,1. 干擾：配位滴定法；排除：加掩蔽劑，或提取后測(cè)定,9.7 < pH < 12,,,pH＜9 Mg2+不與EDTA反應(yīng)pH＞12 Mg2+ → Mg(OH)2↓,,,排除（1）改變pH,,,（2）掩蔽法,,,2. 干擾,硬脂酸根離子在g.HAc中堿性↑,亦消耗HClO4滴定液,非水堿量法,,,（2）提取法,提取,USP,Ch.

14、P.,g.HAc,CHCl3,,,（3）改用其他方法,二羥丙茶堿 非水堿量法,二羥丙茶堿片 UV法,,,第三節(jié) 注射劑分析,一、性狀分析：應(yīng)符合正文各品種項(xiàng)下的性狀描述二、鑒別試驗(yàn)：輔料不干擾時(shí)參考相應(yīng)原料藥的鑒別方法三、劑型檢查及安全性檢查：按照ChP2015四部“制劑通則”注射劑項(xiàng)下規(guī)定項(xiàng)目檢查裝量、滲透壓摩爾濃度、可見異物、不溶性微粒、細(xì)菌內(nèi)毒素或熱原；按照ChP2015四部“指導(dǎo)原則”進(jìn)行安全性檢查。

15、四、含量測(cè)定：直接測(cè)定或排除溶劑、輔料干擾后測(cè)定 五、輔料及包材的分析：實(shí)施嚴(yán)格控制,,,一、性狀分析： 溶液型注射液應(yīng)澄明；混懸型若有可見沉淀，振搖時(shí)應(yīng)容易分散均勻；乳狀液型應(yīng)穩(wěn)定，不得有相分離現(xiàn)象。 符合正文各品種項(xiàng)下的性狀描述二、鑒別試驗(yàn) 輔料不干擾，依據(jù)藥物性質(zhì)，參考相應(yīng)原料藥的鑒別方法，選2~4種不同原理的分析方法，組成鑒別試驗(yàn)。,,,三、劑型檢查及安全性檢查：按照ChP2015四部“制劑通則

16、”注射劑項(xiàng)下規(guī)定項(xiàng)目檢查裝量：不得少于標(biāo)示量滲透壓摩爾濃度：每千克溶劑中溶質(zhì)的毫滲透壓摩爾為單位。 采用測(cè)量溶液的冰點(diǎn)下降來間接測(cè)定。 、可見異物：不得有可見異物不溶性微粒：應(yīng)用光阻法或顯微計(jì)數(shù)法控制大小及數(shù)量細(xì)菌內(nèi)毒素或熱原：應(yīng)符合規(guī)定按照ChP2015四部“指導(dǎo)原則”進(jìn)行安全性檢查。,,,燈檢法在規(guī)定條件下目視可以觀察到的不溶性物質(zhì)，其粒度或長度通常大于50μm，在帶有遮光板的日光燈（光照度可在

17、 1000~4000lx調(diào)節(jié)）下用肉眼檢視可見異物 。,,,光散射法,,,（四） 不溶性微粒 適用范圍 溶液型靜脈用注射液 注射用無菌粉末 注射用濃溶液 測(cè)定方法 光阻法 顯微計(jì)數(shù)法,照不溶性微粒檢查法檢查,√,,,不溶性微粒檢查方法：光阻法 （1）狹小檢

18、測(cè)區(qū)域 （2）微粒阻擋入射光 （3）信號(hào)強(qiáng)度變化 （4）信號(hào)頻度變化,,,不溶性微粒檢查方法：顯微計(jì)數(shù)法 （1）抽濾、洗滌 （2）干燥 （3）顯微測(cè)量（100×）,,,（五）無菌：照無菌檢查法檢查應(yīng)符合規(guī)定。,,,（五） 無菌檢查 方法 直接接種法 薄膜過濾法（孔徑≤0.45mm）,兩種方法均由陽性對(duì)照、陰性對(duì)照和供試品檢查三部分組

19、成。,,,無菌檢查方法：（1）直接接種法 好氧菌、厭氧菌：硫乙醇酸鹽液體培養(yǎng)基 真菌：改良馬丁培養(yǎng)基 接種后培養(yǎng)14天 陽性對(duì)照 陰性對(duì)照,,,（2）薄膜過濾法,,,薄膜過濾法,方法驗(yàn)證：檢驗(yàn)量的供試品在檢驗(yàn)條件下無抑菌作用,,,（六） 細(xì)菌內(nèi)毒素或熱原 細(xì)菌內(nèi)毒素 照細(xì)菌內(nèi)毒素檢查法 檢查 熱原照熱原檢查法檢查,,,1. 細(xì)菌內(nèi)毒素 細(xì)菌細(xì)胞壁的組分，由脂多糖組成。

20、 當(dāng)細(xì)菌死亡或自溶后便會(huì)釋放出內(nèi)毒素。因此，細(xì)菌內(nèi)毒素廣泛存在于自然界中。如自來水中內(nèi)毒素的含量為1~100 EU/ml。 熱原主要來源于細(xì)菌內(nèi)毒素 熱原檢查和細(xì)菌內(nèi)毒素檢查擇一即可。,,,細(xì)菌內(nèi)毒素檢查原理：鱟試劑與細(xì)菌內(nèi)毒素的凝集反應(yīng)。 1956年美國人Bang發(fā)現(xiàn)美洲鱟血液遇革蘭氏陰性菌時(shí)會(huì)產(chǎn)生凝膠。其后Levin和Bang研究發(fā)現(xiàn)微量革蘭氏陰性菌內(nèi)毒素也可以引起凝膠反應(yīng)，從而創(chuàng)立了鱟試

21、劑檢測(cè)法。,,,鱟試劑是從鱟的藍(lán)色血液中提取變形細(xì)胞溶解物，經(jīng)低溫冷凍干燥而成的生物試劑。目前國際上銷售的鱟試劑有兩種，一種稱美洲鱟試劑；另一種稱東方鱟鱟試劑兩者有相同的功效。,,,在美國，鱟試驗(yàn)被稱作為“細(xì)菌內(nèi)毒素試驗(yàn)”收載于1980年20版美國藥典。隨后英、德、意、日以及中國相繼在藥典中收載了這一檢查法。此后鱟試驗(yàn)逐漸替代家兔熱原試驗(yàn)，但部分藥品由于自身特殊性無法通過稀釋法消除干擾，因此鱟試驗(yàn)還無法完全取代家兔熱原試驗(yàn)。,,,細(xì)菌內(nèi)

22、毒素 檢查方法：（1）凝膠法 樣品管 陽性對(duì)照管 陰性對(duì)照管 樣品陽性對(duì)照管,,細(xì)菌內(nèi)毒素 檢查方法：（2）光度測(cè)定法 濁度法：終點(diǎn)濁度法、動(dòng)態(tài)濁度法 顯色基質(zhì)法：凝固酶催化底物,,2. 熱原檢查法,（1）3只家兔 （2）測(cè)定正常體溫 （3）耳靜脈注射 （4）每隔30min測(cè)定體溫，6次 （5）最高體溫-正常體溫,,2. 熱原檢查法,結(jié)果判斷（1）體溫升

23、高均低于0.6℃，且體溫升高總和低于1.4℃。（2）復(fù)試（另取5只），其中體溫升高超過0.6℃的不超過一只，8只家兔體溫升高總和不超過3.5℃。,,,四、含量測(cè)定（一）溶劑水的干擾及其排除（二）溶劑油的干擾及其排除（三）抗氧劑的干擾及其排除,,（一）溶劑水的干擾及其排除 干擾非水溶液滴定法 排除方法：堿性藥物通過堿化、有機(jī)溶劑提取游離藥物；揮干有機(jī)溶劑后再測(cè)定。,,注射用植物油：麻油、茶油、核桃油。排除的方

24、法：1. 有機(jī)溶劑稀釋法： 對(duì)某些含量較高，而測(cè)定方法中規(guī)定取樣量較少的注射劑，可經(jīng)有機(jī)溶劑稀釋以使油溶液對(duì)測(cè)定的影響減至最小。2. 萃取法：可選擇適當(dāng)?shù)娜軇瑢⑺幬锾岢龊笤龠M(jìn)行測(cè)定。3. 柱色譜法,（二）溶劑油的干擾及其排除,,常用抗氧劑 Na2SO3 、 NaHSO3 、 Na2S2O3 Na2S2O5,干擾 氧化還原滴定,（三）抗氧劑的干擾及其排除,排除方法加掩蔽劑 丙酮或

25、甲醛加酸或加熱使抗氧劑分解加弱氧化劑氧化,,1. 加掩蔽劑 丙酮或甲醛,排除方法,,。,2. 加酸或加熱使抗氧劑分解,△,NaCl + H2SO3,NaCl + H2SO3 +S↓,,,先將抗氧劑氧化,3. 加弱氧化劑,,,,五、輔料及包材的分析：實(shí)施嚴(yán)格控制（p448）（一）輔料的分析：（二）包材的分析：,,,第四節(jié) 復(fù)方制劑分析,一、復(fù)方制劑分析的特點(diǎn)：含兩種或兩種以上有效成分的制劑。1.高通量分析法：多組分同

26、時(shí)分析。常采用HPLC。計(jì)算分光光度法。2.適當(dāng)分離后，再分析。,,,,二、復(fù)方制劑分析示例復(fù)方磺胺甲噁唑片的分析ChP2015（p449）HPLCChP2010（p451）雙波長分光光度法。,磺胺甲噁唑（SMZ）,甲氧芐啶（TMP）,,,。,ChP2000采用雙波長紫外-可見分光光度法混合組分光譜法測(cè)定的三種情況,,,,雙波長分光光度法原理,測(cè)定波長 A測(cè)＝A樣1 +A干1,參比波長 A參＝A樣2 +A干2

27、,選擇 A干1＝A干2,?A＝A測(cè)-A參＝(A樣1+A干1)-(A樣2+A干2) ＝A樣1-A樣2,*干擾組分在此兩個(gè)波長處吸收度相等*被測(cè)組分在此兩波長處的?A足夠大,,,,,1.TMP2.SMZ3.SMZ+TMP,,,,SMZ ?A對(duì) = A257 - A304±,TMP ?A對(duì) = A239 - A295±,SMZ ?A樣 = A257 - A3

28、04±,TMP ?A樣 = A239 - A295±,,,例1采用紫外分光光度法測(cè)定片劑含量。 取片劑10片，精密稱重，為3.5622g,研細(xì)。取上述片粉適量，精密稱重為0.0433g，置250ml量瓶中，加規(guī)定溶劑使溶解并稀釋至刻度，搖勻，濾過，精密量取續(xù)濾液5ml.置100ml量瓶中加規(guī)定溶劑稀釋至刻度，搖勻，在257nm波長處測(cè)定溶液的吸光度為0.485.已知藥物的吸收系數(shù)為715，片劑標(biāo)示

29、量為每片0.30g. 求片劑含量為標(biāo)示量的百分?jǐn)?shù)。,,解：,,,例2異煙肼片的含量測(cè)定。取標(biāo)示量為100mg的本品20片，總重量為2.2680g，研細(xì)，稱取片粉0.2887g，置100ml量瓶中，加水溶解并稀釋至刻度，搖勻，濾過，精密量取續(xù)濾液25ml，用溴酸鉀滴定液（0.01733mol/L）滴定，消耗17.92ml.每1ml溴酸鉀滴定液（0.01667mol/L）相當(dāng)于3.429mg異煙肼，求其含量占標(biāo)示量的百分率%