黃酮實例和苷類

1、任務(wù)一 槐米中黃酮類化合物的提取分離技術(shù),,學(xué)習(xí)目標(biāo),一,,,三,,任務(wù)導(dǎo)入,必備知識,,,五,,,四,,,六,相關(guān)知識鏈接及拓展,課堂互動,目標(biāo)測試,一 學(xué)習(xí)目標(biāo),,,,,,,,,,2,掌握槐米蕓香苷的提取、分離及鑒定技術(shù)。熟悉槐米中黃酮類化合物的結(jié)構(gòu)及性質(zhì)。了解槐米中黃酮類化合物的提取分離新進(jìn)展。,,知識要求,熟練進(jìn)行槐米中黃酮類化合物的提取、分離及鑒定操作。學(xué)會槐米中黃酮類化合物的色譜鑒定技術(shù)。,學(xué)習(xí)目的,二、任務(wù)導(dǎo)入

2、：,槐米為豆科植物槐（Sophora japonica L.）的花蕾。其主要有效成分為蕓香苷（又稱蘆?。?，有維生素P樣作用，能保持和恢復(fù)毛細(xì)血管的正常彈性，臨床上常作為治療高血壓的輔助藥和毛細(xì)血管脆性所致出血的止血藥。近代研究顯示槐米中蕓香苷的含量可高達(dá)23.5%，但花開放后含量可降低至13%。,,（二）槐米中黃酮類成分的提取分離,（一）槐米中黃酮類主要有效成分及結(jié)構(gòu),,,三 必備知識,,,,（一）槐米中黃酮類主要效成分及結(jié)構(gòu),槐米中主

3、要有效成分為蕓香苷，還含有少量皂苷、多糖、粘液質(zhì)等。2005年版《中國藥典》規(guī)定，于60℃干燥6小時，含蕓香苷不得少于20%。當(dāng)花蕾開放后蕓香苷的含量大大降低。蕓香苷是槐米中止血的有效成分，有Vp樣作用，有助于保持和恢復(fù)毛細(xì)血管正常彈性，臨床上用作高血壓的輔助藥及毛細(xì)血管脆性引起出血的止血藥。蕓香苷又稱蘆丁，其苷元為槲皮素，它們的結(jié)構(gòu)式如下：,,,,,,槲皮素 黃色針狀結(jié)晶（稀乙醇），含2分子結(jié)晶水，熔點為314℃（分

4、解），溶于乙醇、甲醇、、丙酮、乙酸乙酯、吡啶與冰醋酸等，不溶于水、苯、石油醚、乙醚與氯仿等。,蕓香苷 淺黃色粉末或細(xì)針晶，常含三分子結(jié)晶水，熔點176℃～178℃，在冷水中溶解度為1：8000，熱水為1：200，冷乙醇為1：650，熱乙醇為1：60，可溶于吡啶及堿性溶液，幾乎不溶于苯、乙醚、氯仿及石油醚中。,,對任務(wù)流程說明,,流程說明：本流程利用蕓香苷溶于堿水，酸化后又可析出的性質(zhì)進(jìn)行提取。蕓香苷分子中因含有

5、鄰二酚羥基，性質(zhì)不太穩(wěn)定，暴露在空氣中能緩緩氧化變?yōu)榘岛稚?，在堿性條件下更容易被氧化分解。硼酸鹽能與鄰二酚羥基結(jié)合，達(dá)到保護(hù)的目的，故在堿性溶液中加熱提取蕓香苷時，往往加入少量硼砂。,,,,（二）槐米中黃酮類化合物的其他提取分離方法,,槐米中蕓香苷的提取分離 方法一：,,（二）槐米中黃酮類化合物的提取分離,方法二：,,四 知識鏈接,堿溶酸沉法提取蕓香苷注意事項 蕓香苷分子中因含有鄰二酚羥基，性質(zhì)不太穩(wěn)定，暴露在空

6、氣中能緩緩氧化變?yōu)榘岛稚?，在堿性條件下更容易被氧化分解。硼酸鹽能與鄰二酚羥基結(jié)合，達(dá)到保護(hù)的目的，故在堿性溶液中加熱提取蕓香苷時，往往加入少量硼砂。用堿溶酸沉法提取純化時，所用堿液濃度不宜過高，以免在強(qiáng)堿性和加熱下，破壞黃酮母核；加酸酸化時，酸性也不宜太強(qiáng)，以免生成烊鹽致使析出的黃酮類化合物又重新溶解，降低收得率。,,,,四 知識鏈接及拓展,,,,,,,,基本原理,利用溶劑對有效成分與雜質(zhì)在冷、熱情況下溶解度的差異而分離。,結(jié)晶與重結(jié)晶

7、法：利用混合物各成分不同溫度下溶解度的差別，使所需成分以結(jié)晶狀態(tài)析出，達(dá)到分離精制目的的分離方法。結(jié)晶：不是結(jié)晶狀態(tài)的固體物質(zhì)處理成結(jié)晶狀態(tài)的操作稱為～。重結(jié)晶：用適當(dāng)溶劑處理粗結(jié)晶，使不純的結(jié)晶進(jìn)一步精制成較純的結(jié)晶的過程稱為～。,結(jié)晶的關(guān)鍵：合適的溶劑理想溶劑具備的條件：（1）與被結(jié)晶成分不發(fā)生化學(xué)反應(yīng)。 （2）要對被結(jié)晶成分熱時溶解度大、冷時溶解度小。（3）對雜質(zhì)或冷熱時都溶解，或冷熱時都不溶解。（4）沸點不宜

8、太低或太高。（5）結(jié)晶性好，無毒或毒性小,二、結(jié)晶溶劑的選擇,常用溶劑：水、冰乙酸、甲醇、丙酮、氯仿、乙醇、乙酸乙酯等。 混合溶劑：不能一種選擇合適溶劑時，通常選用兩種或兩種以上溶劑組成混合溶劑。 如：乙醇－水、丙酮－水、吡啶－水等 重結(jié)晶選用的溶劑相應(yīng)有所不同,結(jié)晶分離技術(shù),（一）操作過程1. 結(jié)晶溶液的制備：制成近飽和溶液2. 趁熱過濾，除去不溶性雜質(zhì)3. 濾液放冷，析出結(jié)晶4. 抽濾，從母液中分離結(jié)晶5. 重

9、結(jié)晶6. 結(jié)晶的干燥,（二）操作注意,1. 選擇合適溶劑（溶解度、沸點）2. 結(jié)晶條件：溶液濃度、粘度、溫度、時間 濃度過大，雜質(zhì)濃度和溶液粘度也相應(yīng)增大，會阻礙結(jié)晶的析出。 降溫的速度要慢，使結(jié)晶慢慢形成，速度過快，形成的結(jié)晶顆粒小或成無定形粉末。,（三）促進(jìn)結(jié)晶的方法：1.可用玻棒磨擦器壁，或加入晶種，揮去部分溶劑的方法促進(jìn)析晶。2.采用混合溶劑的方法結(jié)晶。3.揮發(fā)溶劑。4.降低結(jié)晶溫度。5.加入無機(jī)鹽進(jìn)行

10、鹽析。如鹽酸小檗堿結(jié)晶加入5%NaCl進(jìn)行鹽析。,（四）結(jié)晶純度的判斷,結(jié)晶外觀的色澤是否均勻、晶形一致程度是否具有一定的熔點和較小的熔距薄層色譜或紙色譜技術(shù)，經(jīng)數(shù)種不同的展開系統(tǒng)展開是否均能得到單一近圓形的斑點來判斷結(jié)晶的純度。必要時，可制備衍生物，采用高效薄層色譜、氣相色譜、高效液相色譜來進(jìn)一步確定結(jié)晶的純度。,,結(jié)晶錄像演示,五 課 堂 互 動,1．依據(jù)蕓香苷溶解度的性質(zhì)，說明水提取精制之的原理。 2．用前面所學(xué)的知識，

11、說明用“堿溶酸沉法”從槐米中提取蕓香苷的原理及注意事項。,任務(wù)二 黃芩中黃酮類化合物的提取分離技術(shù),,學(xué)習(xí)目標(biāo),一,,,三,,任務(wù)導(dǎo)入,必備知識,,,五,,,四,,,六,相關(guān)知識鏈接及拓展,課堂互動,目標(biāo)測試,一 學(xué)習(xí)目標(biāo),,,,,,,,,,2,掌握黃芩中黃酮類化合物的提取、分離及鑒定技術(shù)。熟悉黃芩中黃酮類化合物的結(jié)構(gòu)及性質(zhì)。了解黃芩中黃酮類化合物的存在及生物活性。,,知識要求,熟練進(jìn)行黃芩中黃酮類化合物的提取、分離及鑒定操

12、作。學(xué)會黃芩中黃酮類化合物的色譜鑒定技術(shù)。,學(xué)習(xí)目的,二、任務(wù)導(dǎo)入：,黃芩為唇形科植物黃芩（Scutellaria baicalensis Georgi）的干燥根。從其中分離出的黃酮類化合物有黃芩苷、黃芩素、漢黃芩苷、漢黃芩素、木蝴蝶素Ａ等20多種。其中黃芩苷（4.0%～5.2%）是主要有效成分，有抗菌消炎、降低轉(zhuǎn)氨酶等作用。黃芩苷元的磷酸酯鈉鹽可用于治療過敏、哮喘等疾病。,,,分別加入10倍、8倍量水煮提兩次，每次1 h，過濾,,,

13、,藥 渣,濾 液,,,,,加HCl調(diào)pH1~2，80℃保溫30min，靜置，離心沉淀,濾 渣,濾 液,黃芩粗粉,加適量水?dāng)嚢?，?0%NaOH調(diào)至pH7再加等量乙醇，過濾,沉 淀,上清液,,,,,,,,,濾 液,沉 淀,,加HCl調(diào)pH1~2,充分?jǐn)嚢?，加熱?0℃保溫30min，過濾,水洗，50%乙醇洗滌，再用95%乙醇洗滌或重結(jié)晶,黃芩苷,問題2,問題1,問題1,問題3,問題4,問題5,通過對黃芩苷的提取提出以下問題:,問題1：中

14、藥黃芪中主要含何種類型化合物？其結(jié)構(gòu)、 性質(zhì)如何？如何進(jìn)行檢識？問題2：從黃芩中提取黃酮類化合物的方法是什么？ 為何采用此方法提??？問題3：在提取分離過程中2次加鹽酸目的是什么？問題4：在提取分離過程中加氫氧化鈉目的是什么？問題5：為何加50%乙醇或95%乙醇？,（二）黃芩中黃酮類成分的提取分離,（一）黃芩中黃酮類主要有效成分及結(jié)構(gòu),,,三 必備知識,,黃芩苷（baical

15、in） 黃芩素（baicalein） 漢黃芩苷（wogonoside） 漢黃芩素（wogonin）,,（一）黃芩中黃酮類主要效成分及結(jié)構(gòu),黃芩中黃芩苷為主要有效成分，黃芩苷為淡黃色針晶，熔點223℃，幾乎不溶于水，難溶于甲醇、乙醇、丙酮，可溶于熱乙酸，易溶于堿性溶液。黃芩苷經(jīng)水解能生成苷元黃芩素，黃芩素分子中具有鄰三酚羥基，易被氧化為醌類衍生物而顯綠色

16、。這是黃芩在放置過程中或處理不當(dāng)時易變綠的原因。,黃芩苷 （“銀黃片”主要成分）,黃芩素,漢黃芩苷,漢黃芩素,首先分析黃芩苷結(jié)構(gòu)：,,葡萄糖醛酸,回答以下問題:,問題1：中藥黃芪中主要含何種類型化合物？其結(jié)構(gòu)、 性質(zhì)如何？如何進(jìn)行檢識？問題2：從黃芩中提取黃酮類化合物的方法是什么？ 為何采用此方法提??？問題3：在提取分離過程中2次加鹽酸目的是什么？問題4：在提取分離過程中加氫

17、氧化鈉目的是什么？問題5：為何加50%乙醇或95%乙醇？,問題1：中藥黃芪中主要含何種類型化合物？其 結(jié)構(gòu)、性質(zhì)如何？如何進(jìn)行檢識？ 中藥黃芪中主要含黃芩苷，為黃酮類化合物，分子中連葡萄糖醛酸，在植物體內(nèi)以鎂鹽形式存在，故能溶于水，在熱水中溶解度較大。 實際工作中采用水煎煮法提取黃芩苷。 利用黃酮類化合物性質(zhì)進(jìn)行檢識。,問題2：從黃芩中提

18、取黃酮類化合物的方法是什 么？為何采用此方法提??？ 實際工作中采用水煎煮法提取黃芩苷。 主要因為黃芩苷，分子中連葡萄糖醛酸，在植物體內(nèi)以鎂鹽形式存在，故能溶于水，在熱水中溶解度較大。,問題3：在提取分離過程中2次加鹽酸目的是什么？ 因為黃芩苷分子中有羧基存在，故分子顯酸性。第一次加鹽酸的目的是為了使黃芩苷鎂鹽轉(zhuǎn)變成黃芩苷。第二

19、次加鹽酸目的中和NaOH，即堿溶酸沉。,問題4：在提取分離過程中加氫氧化鈉目的是什么？ 黃芩苷因含有羧基，故加氫氧化鈉使之形成黃芩苷鈉鹽，增大其在水中溶解度，有利于黃芩苷的提出。問題5：為何加乙醇？其目的是什么 黃芩苷易溶于50%乙醇或95%乙醇，本操作是純化黃芩苷。,,,,（二）黃芩中黃酮類化合物的其他提取分離方法,,黃芩中黃酮類化合物的分離 方法一：,方法二：,,,,四 知識

20、鏈接及拓展,,,,,,,,苷（glycosides）又稱糖苷、甙或配糖體，是糖及其衍生物的端基碳原子與另一非糖物質(zhì)（稱為苷元或配基）連接而成的化合物。 苷糖與苷元連接的化學(xué)鍵稱為苷鍵，形成苷鍵的原子稱為苷鍵原子。 苷類在中藥中分布很廣泛，且具有多方面的生物活性，是一類重要的中藥化學(xué)成分。,,按照苷鍵原子進(jìn)行分類,,硫苷,,,紅景天苷（醇苷）,,,,苦杏仁苷（氰苷）,山慈姑苷（酯苷）,天麻苷（酚苷）,,蘿卜苷,

21、,,巴豆苷 蟲草苷,蘆薈苷,,氧苷：苷鍵原子為氧。 硫苷：苷鍵原子為硫。 氮苷：苷鍵原子為氮。 碳苷：苷鍵原子為碳。,,苷 類,苷的分類——按苷鍵原子分,,1．氧苷：最常見的是醇苷、酚苷和酯苷。 醇苷是由糖的端基羥基與苷元上的醇羥基脫水縮合而成的苷。,紅景天苷,龍膽苦苷,具有致適應(yīng)作用的紅景天苷,治療肝炎的龍膽苦苷,（2）酚苷,酚苷是由糖的端基羥基與苷元上酚羥基脫水而成的苷。,天

22、麻苷,丹皮苷,天麻中的鎮(zhèn)靜成分天麻苷,丹皮中的丹皮苷,（3）酯苷,是由糖的端基羥基與苷元上的羧基脫水而成的苷。其苷鍵既有縮醛的性質(zhì)又有酯的性質(zhì)，故稀酸稀堿均易使其水解。,,R=H 山慈菇苷AR=OH 山慈姑苷B,具有抗霉菌作用,（4）氰苷,氰苷是由糖的端基羥基與氰醇衍生物分子中的羥基脫水形成的苷，且多為α-氰基。氰基性質(zhì)不穩(wěn)定，易為稀酸和酶水解，其苷元α-羥氰性質(zhì)也不穩(wěn)定，易分解為醛和酮，并釋放出易引起中毒的氫氰酸。,,苦杏仁中具鎮(zhèn)

23、咳作用的苦杏仁苷,R＝葡萄糖 苦杏仁苷R＝H 野櫻苷,（二）硫苷,硫苷可看成由糖的端基羥基與苷元上的巰基（-SH）脫水縮合而成的苷，且其水解后的苷元不含巰基。,,蘿卜中的蘿卜苷,（三）氮苷,氮苷是由糖的端基碳直接與苷元上的氮原子相連的苷。 如：核苷類、腺苷、鳥苷、尿苷以及巴豆中的巴豆苷。,,,腺苷,巴豆苷,（四）碳苷,是由糖的端基碳直接與苷元上的碳原子相連的苷。碳苷的苷元多為黃酮、蒽醌、蒽酮、沒食子酸等

24、，尤以黃酮碳苷最多。,,蘆薈苷,碳苷（單糖苷）,原生苷和次生苷,原生苷,苦杏仁苷酶,次生苷（野櫻苷）,苷的理化性質(zhì),性狀形態(tài) 苷類多為固體，糖基少的易形成結(jié)晶，糖基多的多呈具吸濕性的無定形的粉末。顏色 苷類有的無色，有的如黃酮、蒽醌苷呈深淺不同的黃色、橙色。味 一般無味或稍具苦味，也有很苦（龍膽苦苷）或很甜（甜菊苷,旋光性 苷有旋光性，且多為左旋，但水解后變?yōu)橛倚?。另外，苷無還原性，但水解后的單糖卻有還原

25、性。故比較苷類水解前后旋光性和還原性的改變，均有助于檢識苷類的存在。溶解性 一般來說，苷類具親水性，可溶于水、甲醇、乙醇等極性有機(jī)溶劑，不溶于乙醚、苯、石油醚等極性小的有機(jī)溶劑。而苷元具親脂性，可溶于有機(jī)溶劑，不溶于水。,苷鍵的裂解,通過苷鍵的裂解反應(yīng)切斷苷鍵，可以了解苷元的結(jié)構(gòu)及糖的種類，確定苷元與糖及糖與糖之間的連接方式。常用切斷苷鍵的方法有：酸水解堿水解酶水解氧化開裂,,苷鍵屬于縮醛結(jié)構(gòu)，易被稀酸水解。酸水解難易與

26、苷鍵原子的電子云密度及其所處空間環(huán)境有密切關(guān)系。苷鍵原子上的電子云密度越高或其附近的空間位阻越小，則苷鍵原子越易質(zhì)子化，也就越易水解。苷+5%HCl→苷元+糖,1. 酸水解,酸水解機(jī)理,氫質(zhì)子向苷原子進(jìn)攻，苷鍵原子發(fā)生質(zhì)子化，然后苷鍵斷裂.生成苷元和糖的陽碳正離子中間體，在水中陽碳離子溶劑化，再脫去氫離子形成糖分子。苷鍵原子發(fā)生質(zhì)子化是關(guān)鍵，苷原子堿性越強(qiáng)越易水解。,,,酸水解規(guī)律,苷鍵原子不同，水解難易不同。水解由易至難為：

27、 氮苷、氧苷、硫苷、碳苷。糖的環(huán)狀結(jié)構(gòu)大小不同，水解難易不同。呋喃糖苷較吡喃糖苷易水解，由于酮糖多為呋喃環(huán)結(jié)構(gòu)，醛糖多為吡喃環(huán)結(jié)構(gòu)，故酮糖苷較醛糖苷易水解。糖的C2位取代基的性質(zhì)不同，水解難易不同。水解由易至難：2-去氧碳苷，2-羥基糖苷，2-氨基糖苷。吡喃糖苷中，C5上的取代基越大，越難水解。故水解由易至難為: 五碳糖苷、甲基五碳糖苷、六碳糖苷、七碳糖苷 若C5上接COOH則最難水解。,一般苷類在稀酸條件下即可發(fā)生酸

28、水解。對某些難水解的苷需較劇烈的水解條件（如長時間在酸中加熱），但這樣又易使苷元結(jié)構(gòu)變化生成脫水苷元。兩相水解反應(yīng)：適于水解后對酸不穩(wěn)定的苷元，即在反應(yīng)混和液中加入與水不相混溶有機(jī)溶劑（如苯），使水解釋放出的苷元能迅速轉(zhuǎn)溶于有機(jī)層，從而避免其在酸水中停留時間過長而被破壞。,,酸水解注意事項：,糖苷/水+H++CHCl3 Δ苷元/CHCl3+糖/水,2. 堿水解,一般苷鍵對稀堿穩(wěn)定，故很少用稀堿來水解苷鍵，但酚苷、酯苷以及烯醇苷或

29、β－吸電子基取代苷時，遇堿就能被水解。,4-羥基香豆素苷,3. 酶水解,特點：條件溫和：不改變的苷元的結(jié)構(gòu)，得到苷元或次生苷和低聚糖，并可獲知苷元與糖、或糖與糖之間的連接方式。專屬性強(qiáng)：某種酶往往只能水解某一種或某一類苷鍵。 如轉(zhuǎn)化糖酶可水解β果糖苷鍵 麥芽糖酶可水解α-葡萄糖苷鍵,4. 氧化開裂法,Smith降解法 是常用的氧化開裂法，適于酸水解時苷元易被破壞的苷或難水

30、解的碳苷，能避免采用劇烈酸水解而導(dǎo)致苷元結(jié)構(gòu)遭破壞，對苷元的結(jié)構(gòu)研究有重要意義。,Smith降解法,適用范圍： 某些采用酸催化水解時苷元結(jié)構(gòu)容易發(fā)生 改變的苷類 難水解的碳苷優(yōu)點：可以得到完整的苷元缺點：此法不適合苷元上有1，2-二元醇結(jié) 構(gòu)的苷類。,常見鑒定糖紙層析顯色劑： 鄰苯二甲酸-苯胺 常見鑒定苷的反應(yīng)： Moli

31、sh反應(yīng),五、苷的檢識,Molish反應(yīng)（α-萘酚-濃硫酸反應(yīng)）： 方法：于糖或苷的水溶液中加入3%α-萘酚乙醇溶液混合后，沿管壁滴加濃硫酸，使酸層集于下層，則于兩液層交界處呈現(xiàn)紫（棕）色環(huán)。,苷的提取與分離,苷：極性隨著糖基的增多而增大。糖基增多，苷元所占比例相應(yīng)變小，親水性增大。苷元：一般可溶于低極性有機(jī)溶劑。,(一)苷的提取,苷的種類不同，性質(zhì)不同，提取分離方法也不同。原生苷類：需抑制或破壞酶的活性。如：甲醇、乙醇、沸水提取

32、或在藥材中加入一定量碳酸鈣。次生苷或苷元：利用酶水解，工業(yè)上一般采用發(fā)酵法來酶解。在提取過程中要盡量避免與酸與堿接觸，以防苷類被酸或堿水解。,通常是將生藥的乙醇或甲醇提取物順次以石油醚脫脂，以乙醚或氯仿抽出苷元，以乙酸乙酯抽出單糖苷或少糖苷，再以丁醇提取多苷。,(二)苷的分離,經(jīng)初步提取得到的苷類往往不同程度地混有其他物質(zhì)，需進(jìn)一步分離純化。PH梯度萃取法：鉛鹽沉淀法：酚性物質(zhì)與非酚性物質(zhì)；鄰二酚羥基或羧基的成分與一般酚羥基凝

33、膠過濾法：大孔吸附樹脂法：其他色譜柱：如硅膠、聚酰胺、活性炭等。,五 課 堂 互 動,1．聚酰胺柱色譜用于分離黃酮類化合物（苷、苷元）的原理、方法及洗脫規(guī)律。 2．簡述黃酮類化合物的酸性規(guī)律及在黃酮苷元分離中的應(yīng)用。 3．何謂交叉共軛體系，它與黃酮類化合物顏色的關(guān)系如何？,任務(wù)三 葛根中黃酮類化合物的提取分離技術(shù),,學(xué)習(xí)目標(biāo),一,,,三,,任務(wù)導(dǎo)入,必備知識,,,五,,,四,,,六,相關(guān)知識鏈接及拓展,

34、課堂互動,目標(biāo)測試,一 學(xué)習(xí)目標(biāo),,,,,,,,,,2,掌握葛根大豆苷元的提取、分離及鑒定技術(shù)。熟悉葛根中黃酮類化合物的結(jié)構(gòu)及性質(zhì)。氧化鋁柱色譜的原理及操作。了解葛根中黃酮類化合物的存在及生物活性。,,知識要求,熟練進(jìn)行葛根中黃酮類化合物的提取、分離及鑒定操作。學(xué)會葛根中黃酮類化合物的色譜鑒定技術(shù)。,學(xué)習(xí)目的,任務(wù)導(dǎo)入：,葛根為豆科植物野葛(Pueraria lobata(Willd.)Ohwi )或甘葛藤(Pueraria t

35、homsonii Benth.)的干燥根，甘葛藤習(xí)稱“粉葛”。具有解肌退熱，生津，透疹，升陽止瀉的作用。用于治療外感發(fā)熱頭痛、高血壓頸項強(qiáng)痛、冠心病心絞痛、早期突發(fā)性耳聾、強(qiáng)直性脊柱炎、泄瀉等病癥。現(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究表明：葛根中的異黃酮類化合物葛根素對高血壓、高血脂、高血糖和心腦血管疾病有一定療效。,葛根中大豆苷元、葛根素等的提取工藝流程：,,流程說明：用70％的乙醇回流提取葛根粗粉，使黃酮類化合物溶于乙醇液，然后采用鉛鹽沉淀法除去醇提液中

36、的雜質(zhì)，得到純化的葛根總黃酮類化合物?？傸S酮再通過氧化鋁柱色譜進(jìn)行分離。最終得到各種異黃酮。,（二）葛根中黃酮類成分的提取分離,（一）葛根中黃酮類主要有效成分及結(jié)構(gòu),,,三 必備知識,,,（一）葛根中黃酮類主要效成分及結(jié)構(gòu),葛根中主要含異黃酮類化合物，如葛根素（C-苷）、大豆素、大豆苷等。大豆苷為無色針晶，熔點239℃～240℃，易溶于乙醇、熱水。大豆素為無色針晶，265℃升華，320℃分解，易溶于乙醇。葛根素為白色針狀結(jié)晶，熔點18

37、7℃（分解），易溶于乙醇。,,,,,,（二）葛根中黃酮類化合物的提取分離,,葛根中黃酮類化合物的分離 方法一：,,（二）葛根中黃酮類化合物的提取分離,方法二：,,四 課 堂 互 動,1．葛根素、大豆苷都是葡萄糖苷，試從結(jié)構(gòu)上分析二者不同在哪里？ 2．試分析大豆素、大豆苷、葛根素在氧化鋁色譜柱先后被洗脫出的原因。,任務(wù)四 銀杏葉中黃酮類化合物的提取分離技術(shù),,學(xué)習(xí)目標(biāo),一,,,三,,任務(wù)導(dǎo)入,必備知識,,,五,

38、,,四,,,六,相關(guān)知識鏈接及拓展,課堂互動,目標(biāo)測試,一 學(xué)習(xí)目標(biāo),,,,,,,,,,2,掌握銀杏葉中黃酮類成分的提取、分離及鑒定技術(shù)。熟悉銀杏葉中黃酮類化合物的結(jié)構(gòu)及性質(zhì)。了解銀杏葉中黃酮類化合物的存在及生物活性。,,知識要求,熟練進(jìn)行銀杏葉中黃酮類化合物的提取、分離及鑒定操作。學(xué)會銀杏葉中黃酮類化合物的色譜鑒定技術(shù)。,學(xué)習(xí)目的,任務(wù)導(dǎo)入：,銀杏葉為銀杏科植物銀杏Ginkgo biloba L.的干燥葉。具有斂肺平喘、活血化瘀

39、、止痛的作用。用于治療肺虛咳喘、冠心病、心絞痛、高血脂癥等。。,銀杏中總黃酮的提取工藝流程：,,流程說明：用70％的乙醇提取銀杏葉粗粉，使黃酮類化合物溶于醇液。提取液濃縮后加水，可沉淀水不溶性雜質(zhì)，濾液上大孔吸附樹脂，除去水溶性雜質(zhì)。,,（二）銀杏中黃酮類成分的提取分離,（一）銀杏中黃酮類主要有效成分及結(jié)構(gòu),,,三 必備知識,,,（一）銀杏中黃酮類主要效成分及結(jié)構(gòu),銀杏葉成分很復(fù)雜，以黃酮類化合物為主。主要有黃酮類化合物、二萜內(nèi)酯衍生

40、物，此外還含多糖類。銀杏葉中黃酮類化合物既有單黃酮如山奈素、槲皮素、異鼠李素及其苷，亦有雙黃酮類如銀杏雙黃酮（銀杏素）、去甲銀杏雙黃酮、金松雙黃酮、穗花杉雙黃酮等以及兒茶素類。,,,,,,,（二）銀杏中黃酮類化合物的提取分離,,銀杏中黃酮類化合物的提取還可采用以下方法： 方法一——丙酮提取法,,,（二）銀杏中黃酮類化合物的提取分離,方法二——乙醇提取法,,,四 課 堂 互 動,1．分析銀杏葉中黃酮類化學(xué)成分在提取工藝中通過

41、何種方式除去水溶性雜質(zhì)。,學(xué) 習(xí) 小 結(jié),黃酮類化合物,,提取分離,提取、分離,理化性質(zhì),物理性狀、溶解性、酸堿性、顯色反應(yīng),結(jié)構(gòu)類型,按不同的苷元與糖分類,應(yīng)用實例,黃芩、槐花、葛根、銀杏葉,（一）學(xué)習(xí)內(nèi)容,,,,,（二）學(xué)習(xí)方法與體會,進(jìn)行本章的學(xué)習(xí)時應(yīng)遵循“結(jié)構(gòu)→性質(zhì)”的認(rèn)知規(guī)律，通過分析黃酮類化合物的結(jié)構(gòu)特點，總結(jié)出該類成分的理化性質(zhì)，進(jìn)而分析其提取分離。,六 目 標(biāo) 檢 測,,,,一、判斷題 （）1.黃酮類化合物加

42、ZrOCl2試劑產(chǎn)生黃色，加枸櫞酸后黃色不褪，示3位無-OH。 （）2.多數(shù)黃酮苷元具有旋光性，而黃酮苷則無。 （）3.凡是黃類化合物都不能用氧化鋁分離。 （）4.區(qū)別黃酮和黃酮醇可用四氫硼鈉反應(yīng)。 （）5.黃酮分子中引入7或4‘-羥基，促使電子位移重排，使顏色加深。 （）6.顧名思義，黃酮類化合物都是黃色的并具有酮基。 （）7.一般常用聚酰胺色譜來分離黃酮類化合物。 （）8.用葡聚糖凝膠柱色

43、譜分離游離黃酮主要靠分子篩作用，并按分子量由大到小的順序流出柱體。,六 目 標(biāo) 檢 測,,,,二、A型題 1.聚酰胺對黃酮類化合物發(fā)生最強(qiáng)吸附作用時，應(yīng)在__中。（A.甲酰胺 B.水 C.95％乙醇 D.酸水） 2.鹽酸-鎂粉反應(yīng)為陽性的是__。（A.黃酮醇 B.異黃酮 C.查耳酮 D.橙酮） 3.四氫硼鈉反應(yīng)為陽性的是__。（A.黃酮醇 B.異黃酮 C.二氫黃酮 D.橙酮）,六 目 標(biāo)

44、 檢 測,,,,三、X型題 1.黃酮類化合物的分類主要依據(jù)其母核__。（A.三碳鏈?zhǔn)欠癯森h(huán) B.三碳鏈的氧化程度 C.B環(huán)的連接位置 D.是否連接糖鏈） 2.具有旋光性的游離黃酮有___。（A.黃酮 B.異黃酮 C.黃烷醇 D.二氫黃酮） 3.中藥槐米的主要有效成分___。（A.蘆丁 B.可用水進(jìn)行重結(jié)晶 C.可用堿溶酸沉法提取 D.能發(fā)生Molish反應(yīng)） 4.分離黃酮類化

45、合物常用的方法有___。（A.，水蒸氣蒸餾法 B.聚酰胺色譜法 C.硅膠色譜法 D.葡聚糖凝膠色譜法） 5. 5，7，3’，4‘-四羥基二氫黃酮可發(fā)生下列反應(yīng)中的___。（A.HCl－Mg反應(yīng) B.四氫硼鈉反應(yīng) C.氨性氯化鍶反應(yīng) D.Molish反應(yīng)）,六 目 標(biāo) 檢 測,,,,三、X型題,6. 蘆丁可發(fā)生下列反應(yīng)中的___。（A.鹽酸-鎂粉反應(yīng) B.四氫硼鈉反應(yīng) C.氨性氯化鍶反應(yīng) D.Molish