微生物檢驗的標準化與自動化課件

1、微生物檢驗的標準化與自動化對臨床診斷的意義復旦大學附屬華東醫(yī)院 趙 虎2010-5-12,臨床微生物檢驗的工作與流程微生物檢驗標準化的含義及其意義微生物檢驗自動化的含義及其意義,主要內容,一、臨床微生物檢驗 的工作與流程,涂片鏡檢,接種培養(yǎng),標本采集,鑒 定,藥 敏,病原報告,,,,,,,工作之一—病原學診斷,工作之一—臨床咨詢,,病原學診斷,耐藥監(jiān)測,流行病學調查,臨床咨詢、會診,,,,實驗室

2、 臨床 患者,,,高質量的微生物實驗室報告,對正確的臨床決策很重要,臨床的顧慮,臨床投訴率最高速度慢檢出率低準確率低,如何提高微生物檢驗質量——標準化、自動化,合格的標本采集和送檢標準化的工作流程自動化的檢測系統(tǒng)縮短報告時間 —血培養(yǎng)三級報告臨床報告與咨詢,信心源于質量,二、微生物檢驗的標準化,標準化質量體系的認證ISO15189CAP國際標準和指南的應用WHO標準CLSI藥敏分析指南,標準化的含義,國

3、際標準與指南,規(guī)范檢驗流程提高檢驗質量實現(xiàn)檢驗結果互認提高員工素質增加在醫(yī)療市場競爭力作為醫(yī)療糾紛舉證的證據(jù)提高學術地位,標準化的意義,標準化現(xiàn)狀—不容樂觀,自動化程度低手工操作多主觀判斷多技術人員的經驗和技術要求高缺乏統(tǒng)一的國際標準儀器廠商缺乏有效的溝通和比對,實現(xiàn)統(tǒng)一的國際、國家或地區(qū)標準 ——標準化的SOP及執(zhí)行及時更進國際標準或指南的更新 ——及時引進、翻譯和培訓標準化質量認證體系的認證 —

4、—ISO15189或CAP及時主動與臨床溝通 ——咨詢、建議和改進儀器的自動化改進 ——樣本處理、接種、培養(yǎng)、鑒定和藥敏,標準化的進程,標準化的具體內容,樣本采集的標準化—采集的類型、時機、方法樣本運送的標準化—容器、時間、溫度樣本處理的標準化—鏡檢、液化樣本接種的標準化—手工（四區(qū)）、自動細菌培養(yǎng)的標準化—培養(yǎng)基、溫度、CO2、時間細菌鑒定的標準化—手工、板條、儀器體外藥敏試驗的標準化—KB法、MIC法,樣本采

5、集的標準化,樣本采集的標準化類型：根據(jù)感染的類型，合理選擇正確的臨床樣本，有局部癥狀或體征者，取感染局部標本，如痰、咽拭、中段尿、胸腹水等，如確切局部癥狀體征者，取血。時機：正確選擇恰當?shù)臉颖静杉瘯r機，如痰標本—晨痰；血培養(yǎng)—早期、發(fā)熱前、抗菌藥物治療前。方法：注射器抽取、棉拭沾取。部位：如盆腔炎，經陰道后穹窿抽取。,樣本運送的標準化,樣本運送的標準化容器：塑料、無菌、螺旋蓋時間：盡快（一般2h內，腦脊液15min內，厭氧菌

6、床邊接種）溫度：中段尿標本低溫（4℃） 其他標本常溫,樣本處理的標準化,樣本處理的標準化鏡檢：痰標本接種前革蘭染色、鏡檢，低倍鏡下白細胞≥25，上皮細胞≤10洗凈：滅菌生理鹽水清洗痰液液化：痰標本液化（胰酶）,樣本接種的標準化,樣本接種的標準化手工（四區(qū)）：接種環(huán)、燒灼自動：不同廠商,細菌培養(yǎng)的標準化,細菌培養(yǎng)的標準化培養(yǎng)基：血瓊脂平板、麥康凱、中國藍、巧克力瓊脂、其他選擇培養(yǎng)基溫度：35-37℃CO2

7、： 初代培養(yǎng)，尤其呼吸道標本時間：24-48h，血培養(yǎng)5d,細菌鑒定的標準化,細菌鑒定的標準化自配試劑手工板條半自動儀器全自動分析系統(tǒng),體外藥敏試驗的標準化,體外藥敏試驗的標準化KB法：培養(yǎng)基種類（M-H瓊脂）、質量（厚度4mm，pH）、藥敏紙片質量MIC法:5個稀釋濃度—肉湯稀釋法、微量肉湯稀釋法、全自動微生物分析系統(tǒng),上海在微生物標準化進程中的工作,三、微生物檢驗的自動化,高度自動化操作，減少人為誤差統(tǒng)一的標準,自

8、動化含義,微生物實驗室的自動化與生化、免疫檢測的自動化程度相去尚遠。手工操作多：樣本處理、涂片染色、接種培養(yǎng)。主觀判斷多：儀器的自動化程度低、鑒定的參數(shù)少，需結合細菌形態(tài)和染色性、菌落形態(tài)特征、以及多個機外補充試驗結果。,自動化現(xiàn)狀-不盡人意,,自動化的障礙,方法的局限，關鍵環(huán)節(jié)離不開人工樣本處理、涂片染色、分純、挑選致病菌、配置菌液、血清學實驗、藥敏紙片法……對微生物實驗室的投入較少人員、設備、資金……,自動化的進展-血培養(yǎng)

9、,手工,第一代,第二代,第三代,,,,,血培養(yǎng)檢測技術的進展,,檢測靈敏度增加,鑒定藥敏系統(tǒng)自動化,手 工,半自動,全自動,全自動,,鑒定藥敏系統(tǒng)自動化,自動化系統(tǒng)發(fā)展趨勢,提高速度－－－快簡化流程－－－快，方便專家系統(tǒng)－－－準,臺灣長庚醫(yī)院,今后的發(fā)展趨勢——速度快、檢出率高到目前為止，微生物檢測的標準依然以細菌生長過程中顯示的特性為依據(jù)，快速的分子生物學方法只在鑒定和初篩步驟及科研應用分子生物學方法的發(fā)展瓶頸技術難度—細

10、菌型別多無法確認細菌的活動能力無法確定耐藥情況RNA逆轉錄受條件限制,分子生物學方法-非培養(yǎng)法,現(xiàn)代化和標準化的重要性,若微生物實驗室發(fā)展過度滯后將對感染的正確診斷和治療構成嚴重威脅不利于感染的病原學診斷；不利于抗菌藥物的用藥控制，導致耐藥菌和藥 物費用增長過快；不利于醫(yī)院感染暴發(fā)的早期發(fā)現(xiàn)和控制；不利于感染發(fā)病機制的研究和防治；不利于臨床醫(yī)師對不斷變遷的感染病原菌和耐 藥性的正確認識，影響危重病的搶救成功