sur2bkir6.1通道開放劑介導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞保護(hù)效應(yīng)分子途徑的研究

1、 分類號 密 級 公 開 UDC 保密期限 博 士 學(xué) 位 論 文 博 士 學(xué) 位 論 文 題 目 SUR2B/Kir6.1 通道開放劑介導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞保護(hù)效應(yīng)分子途徑的研究 通道

2、開放劑介導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞保護(hù)效應(yīng)分子途徑的研究 作者姓名 陳學(xué)軍 陳學(xué)軍 指導(dǎo)教師 汪 海 研究員 研究員

3、培養(yǎng)單位 軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院衛(wèi)生學(xué)環(huán)境醫(yī)學(xué)研究所 軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院衛(wèi)生學(xué)環(huán)境醫(yī)學(xué)研究所 專業(yè)名稱 藥理學(xué) 藥理學(xué) 論文提交日期 2016 年 5 月 9 日 學(xué)位授予單位

4、 中 國 人 民 解 放 軍 軍 事 醫(yī) 學(xué) 科 學(xué) 院 中 國 人 民 解 放 軍 軍 事 醫(yī) 學(xué) 科 學(xué) 院 答辯委員會主席 田增明 田增明 教授 教授 中 國 人 民 解 放 軍 軍 事 醫(yī) 學(xué) 科 學(xué) 院 制 中 國 人 民 解 放 軍 軍 事 醫(yī) 學(xué) 科 學(xué) 院 制 目

5、錄 縮略詞表 縮略詞表 ....................................................................................................................... 1 中文摘要 中文摘要 .........................................................................

6、.............................................. 3 英文摘要 英文摘要 ....................................................................................................................... 8 材料和方法 材料和方法 .........................

7、........................................................................................ 19 1 實(shí)驗(yàn)材料 實(shí)驗(yàn)材料 .................................................................................................................

8、19 1.1 實(shí)驗(yàn)動物 ....................................................................................................... 19 1.2 細(xì)胞 .............................................................................................

9、.................. 19 1.3 主要藥品和試劑 ........................................................................................... 19 1.4 主要儀器和設(shè)備 .............................................................................

10、.............. 21 2 實(shí)驗(yàn)方法 實(shí)驗(yàn)方法 ................................................................................................................. 21 2.1 細(xì)胞復(fù)蘇、傳代及種板 ........................................................

11、....................... 21 2.2 反轉(zhuǎn)錄 PCR ................................................................................................... 21 2.3 免疫細(xì)胞化學(xué) ................................................................

12、............................... 23 2.4 RNAi 實(shí)驗(yàn) ...................................................................................................... 23 2.5 Western blot 實(shí)驗(yàn) ...........................................

13、............................................... 24 2.6 內(nèi)皮細(xì)胞活力檢測 ....................................................................................... 25 2.7 NO 含量檢測 ...................................................

14、.............................................. 25 2.8 內(nèi)皮細(xì)胞 [Ca2+]i 的測定 .............................................................................. 25 2.9 微血管張力實(shí)驗(yàn) ....................................................

15、....................................... 26 2.10 統(tǒng)計學(xué)分析 ................................................................................................. 26 實(shí)驗(yàn)結(jié)果 實(shí)驗(yàn)結(jié)果 .....................................................

16、................................................................ 27 第一部分 第一部分 KCOs 對內(nèi)皮細(xì)胞 對內(nèi)皮細(xì)胞 KATP 通道亞型選擇性的研究 通道亞型選擇性的研究 ................................. 27 1 EA.hy926 細(xì)胞表達(dá)的 細(xì)胞表達(dá)的 KATP 通道亞基驗(yàn)證 通道亞基驗(yàn)證 .................

17、.................................. 27 1.1 RT-PCR 法驗(yàn)證內(nèi)皮細(xì)胞 KATP 各個亞基的表達(dá) ..................................... 27 1.2 免疫細(xì)胞化學(xué)方法驗(yàn)證內(nèi)皮細(xì)胞 KATP 各亞基的表達(dá) ........................... 28 2 內(nèi)皮細(xì)胞 內(nèi)皮細(xì)胞 KATP 各亞基在 各亞基在 KCOs 促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞 促進(jìn)內(nèi)皮

18、細(xì)胞 NO 釋放中的作用 釋放中的作用 ........... 29 2.1 KCOs 促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞釋放 NO 的作用 ...................................................... 29 2.2 內(nèi)皮細(xì)胞 SUR2B 亞基在 KCOs 促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞 NO 釋放中的作用 ...... 31 2.3 內(nèi)皮細(xì)胞 SUR2A 亞基在 KCOs 促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞 NO 釋放中的作用......

19、 35 2.4 內(nèi)皮細(xì)胞 Kir6.1 亞基在 KCOs 促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞 NO 釋放中的作用 ........ 38 2.5 內(nèi)皮細(xì)胞 Kir6.2 亞基在 KCOs 促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞 NO 釋放中的作用 ........ 42 結(jié) 語 ....................................................................................................