利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)培育馬鈴薯solanumtuberosuml.高淀粉及抗病新品系

1、Y9 3 7 毫0 8分類號U D C甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)密級——單位代碼 ! ! ! 塑學(xué)位論文利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)培育馬鈴薯( S o l a n u mt u b e r o s u m L ．)高淀粉及抗瘸新品系D e v e l o p o fh i g h s t a r c hc o n t e n t a n d a n t i - d i s e a s e s p o t a t o( S o 紐n u m t u b e r o

2、 s u m L ．) l i n e sb yg e n et r a n s f o r m a t i o n賈笑英指導(dǎo)教師姓名至董 墼夔 ?一i 笪重壅些盔堂 莖型 ! 塑! ! ! 1 2學(xué)科專韭名稱縫塑擅焦直麴 研究方向生塑蕉壅壟堡塹童登主塑瘞援率漪學(xué)位級別 壤土～—— 論文提交日期 ；塵l 墮簪4 勇2 8 日論文答辯日期! ! ! ! 壘! 墨! 旦 學(xué)位授予日期 2 0 0 6 年6 月1 6 日答辯委員會主席 至塹圭

3、 墼塑評 閼 入 陳耀鋒 教授魏育明 研究員港學(xué)彪 教授l | _ 肅農(nóng)業(yè)大學(xué)農(nóng)學(xué)博士學(xué)位論文 摘要和其定點突變基因鰣西3 3 6 ( 降低了腺苷二磷酸葡萄糖焦磷艘化酶對激活因子果糖～6一磷酸( F 6 P ) 的依賴襤和對掬割因子豫苷一l ～磷酸( A M P ) 豹敏感性) 的表達載{ 謄p B I P G和p B I P G 3 3 6 進行遺傳轉(zhuǎn)化，獲褥了轉(zhuǎn)基因馬鈴薯。通過P C R 擴增和S o u t h e r n 雜交表

4、明鰣耵基因已整合到受體馬鈴薯的基因組中，R T —P C R 檢測初步表明耵西蒸因在轉(zhuǎn)基因植橡塊莖中表達。轉(zhuǎn)基因檀株A G P a s e 酶活性、淀粉和還原瓣的測定表明，總的趨勢是A G P a s e 活性有不問程度的提高，淀粉含量增加，還原糖含篷有所下降。在轉(zhuǎn)基因馬鈴薯中突變基因的裘達效果也明顯優(yōu)于未突變的基因，其表達量的增加導(dǎo)毀馬鈴薯淀粉含量明顯增加。以匿個馬鈴薯霞倍體栽培晶種隴薯3 號、甘農(nóng)薯2 號、臺灣紅皮和布爾班克的試管苗

5、莖段為受體材料，分別用組成型植物表達載體p B I H M ( C a M V3 5 S 伽M e l 3 ’)和誘導(dǎo)型表達載體p B I W H M ( 艦m l ～冉礦, 女／e 1 3 ’) 進幸亍遺傳轉(zhuǎn)化，獲得了轉(zhuǎn)基因馬鈴薯。綴P C R 、S o u t h e r n 和R T —P C R 簽定表明h r p 慕因己整合到馬鈴薯基因綴中并在轉(zhuǎn)基毯植株中轉(zhuǎn)錄和表達。離體葉片接種檢測表明組成型表達和損傷或病原誘導(dǎo)表達h r p