藍(lán)豬耳toreniafournieril.肌動蛋白基因的克隆及生物信息學(xué)分析

1、西南大學(xué)碩士學(xué)位論文藍(lán)豬耳（Torenia fournieri L.）肌動蛋白基因的克隆及生物信息學(xué)分析姓名：魏琦超申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：植物學(xué)指導(dǎo)教師：高峰20060501C l o n i n g a n d S e q u e n c e A n a l y s i s o f A c t i n G e n e sf r o m 7 b 坨刀缸加以，乃彪訂L ．M a j o r ：B o t a n y P o s t g

2、r a d u a t e ：W e iQ i - C h a oT u t o r ：P r o f ．G a o F e n gA b s t r a c tz b 陀玎脅如“塒抬，fL i sa ni m p o r t a n t n o w e r p l a n t t h a tg r o w s i ns e m i ·t m p i c sa I l dt r o p i c s ，塒m s p e c i

3、a l 鋤dn m 【c dm e g a s p o r e ，a J l d “i sa l s oa m o d e l p l a I l t w l l i c hc a n b eu s e dt o s t u d yt h ed e v e I o p m e n to ff l o w e ra p p a r a t u sa n d Ⅱ1 ep r o 乒e s so f i m p r e g n a t i o

4、 n ．I nm i ss t u d y ，t 、Ⅳoa c t mg e n e sw e r e i s 0 1 a t e d f o r m ef i r s t t i m e f 而m 力“r 門把，f ，b y u s i n gp 0 1 y m e r a s e c h a i nr e a c t i o n ( P C R ) t e c h n i q u e ．C h a m c t e r i z a t

5、 i o n a n d f u n c t i o n a lp r e d i c t i o no f 血e 鉚o n o v e l g e n e sw e r ep e r f o 鋤e d ．T h er e s u l t s o fi s o l a t i o na 1 1 d a n a l y s i s o ft h e g e n e sa r eV e r y h e l p f u l t oe l u

6、c i d a t e t h e i r m 0 1 e c u l a re v o l u t i o n ，缸1 c t i o n a l e x p r e s s i o n i nt h ed e V e l o p m e n to fn o w e ra p p a r a t I l s ，p r o g r e s so f i m p r c g n a t i o n 趾dp o t e m i a l 印p

7、 l i c a t i o ni n a r t i f l c i a l i I l t e r v e n t i o na 1 1 db l o c k i n go f t h e e m b r y od e v e l o p m e n t ．T h e m 萄o re x p e r i m e n t a lr e s u l t s f r o mt h j sw o r k w e r e a sf o l l

8、 o w s ：1 1 l r e e m e t h o d s ，l o w p H e x 打a c t i o n m e d i u I I l w i t h h i 出s a l t s p r e c i p i t a t i o n ，s D Sp r e c i p i 詛t i o na J l dc T A B p r e c i p i 協(xié)廿o n ，w e r eu s e d t oe x t r a c

9、 tg e n o m i cD N A 舶m m e l e a v e so f．加“r 胛f P r f ．T h eD N A s 鋤p l e s 丘o m t h e 山r e e m e t h o d s w e r e t e s t c du s i n gU V s c a I 】血n 舀a g a r o s eg e le l e c 仃o p h o r e s i sa I l d P C R ．T h c

10、d i 髓r c n c e s i ny i e l d a 1 1 d q u a l i t yo ft h e o b t a i n e dD N As 枷p l e sw e r ec o m p 捫d ，a 1 1 dC T A Bp r e c i p 脅i o nw a s d e t e m i n e d t ob em e b e s tm 劬o df o r廿1 ep r a c t i c a l w o r

11、 k ～W e d e s i g I l e da n d s y m h e s i z e dt 、v op a i r so f p r i m e r s a c c o r d i n g t on u c l e o t i d I es e q u e n c e so f跏喀n 珊脅虎口a c t i ng e n e so fa 1 1 d o t h e rh i 曲e r p l a n t s ．B yu s

12、i n gt h et o t a l D N A o f 力“M f e ，f a st e m p l a t e ，1 3 8 3 b pa 1 1 d1 3 5 5 b p 劬g m e m sw e r e 鋤p l i f i e du s i n gP C R ．T h es e q u e n c ea n a l y s i so f m e t w of h g m e m s d e m o n s t m t e

13、 d m a t Ⅱ1 en u c l e o t i d es e q u e n c e s b e l o n g e d t o t h ea c t i ng e n ef 砌l y o f 如“M f P r f ．n 、Ⅳa sp r o v e d b yb l a s t i n gG e n B a I l k d a 協(xié)b a s e t h a t 山e t 、v os e q u e n c e sw e r

14、 en o V e ls e q u e n c e sw h j c h w e r e c a l l e d “阡卅C 丌”a 1 1 d “礬4 ( ：刀”r e s p e c t i V e l y ．A 1 i g n m e n t o f c l o n e d 劬g m e m s r e v e a l e dm a t m 4 C ”a I l d Z B 爿C 刀s h a r e dh o m o l o g