幾種血管內(nèi)皮細胞損傷標志物和碘離子的熒光檢測.pdf

1、一些貴金屬納米粒子和貴金屬納米復合材料在可見光區(qū)具有特征吸收光譜，與能量供體的熒光發(fā)射光譜部分重疊，在基于熒光共振能量轉(zhuǎn)移的化學/生物傳感中獲得了廣泛的關(guān)注。本文制備了抗體包被的貴金屬納米復合材料和核殼型貴金屬納米粒子，對兩種血管內(nèi)皮細胞損傷標志物開展了定量檢測，并完成了碘離子的高靈敏測量。
　　本研究主要內(nèi)容包括：⑴開發(fā)了一種高靈敏度定量檢測血栓調(diào)節(jié)蛋白（TM）的熒光方法。將TM抗體和牛血清白蛋白(BSA)結(jié)合在金納米顆粒(Au

2、 NPs)上制備了BSA-AuNPs-Ab納米復合材料，通過透射電子顯微鏡和紫外可見吸收光譜對其進行表征。吖啶橙(AO)和制備的納米金復合材料之間的熒光共振能量轉(zhuǎn)移能導致AO的熒光發(fā)生淬滅。在TM的存在時，AO從納米金復合材料的表面有效分離而使熒光部分恢復。在濃度為0.1 pgmL-1-5ngmL-1的范圍內(nèi)，熒光強度增加值與TM濃度的對數(shù)呈線性關(guān)系，檢測下限為12 fg mL-1。利用該方法還考察了H2O2誘導血管內(nèi)皮細胞（HUVEC

3、-C）受損后可溶性血栓調(diào)節(jié)蛋白(sTM)的釋放。研究發(fā)現(xiàn)，培養(yǎng)基中釋放的sTM含量隨著H2O2與細胞的接觸時間的延長而增大。⑵合成了石墨烯量子點(GQDs)和金包銀核殼型納米粒子(Ag@Au NPs)并用透射電子顯微鏡對它們進行了表征，將血管性血友病因子抗體(vWF Ab)修飾在Ag@Au NPs表面制備了納米復合物(Ag@Au-Ab NCs)。由于熒光共振能量轉(zhuǎn)移，GQDs的熒光可被Ag@Au-Ab NCs有效淬滅。vWF與Ag@Au

4、-Ab NCs表面抗體的免疫反應使得GQDs與復合材料分離，導致GQDs熒光部分恢復。實驗發(fā)現(xiàn)，在濃度0.1 pg mL-1到20 ng mL-1范圍內(nèi)，熒光強度變化值與vWF濃度的對數(shù)值呈良好的線性關(guān)系，檢測下限為30 fg mL-1?；谠摲椒ㄟ€調(diào)查了H2O2誘導HUVEC-C細胞受損后vWF的釋放情況。結(jié)果表明，細胞與H2O2的接觸時間越長，細胞損傷程度越大，培養(yǎng)基中vWF的含量越高。⑶構(gòu)建了一種簡單的熒光傳感器用于碘離子的定量檢

5、測。制備了石墨烯量子點(GQDs)和金包銅納米粒子(Cu@Au NPs)，兩者之間的熒光共振能量轉(zhuǎn)移導致前者的熒光發(fā)生猝滅。I-可與Cu@Au NPs反應，破壞后者的結(jié)構(gòu)并釋放出粒徑更小的球形納米金顆粒。隨著加入I-濃度的增大，Cu@Au NPs溶液從紫色逐漸轉(zhuǎn)為紅色。在GQDs-Cu@Au NPs混合溶液中加入I-，GQDs的熒光進一步淬滅。熒光強度降低程度與I-濃度在0.05μM-5μM范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系。該方法成功用于水樣中I