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文檔簡介
1、L-鳥氨酸具有生物活性,在生物體多種細(xì)胞和組織中都存在,對人體肝臟細(xì)胞具有重要意義。原因在于它不僅充當(dāng)前體物質(zhì),在氨基酸代謝中扮演很重要的角色,還在尿素循環(huán)中起到承上啟下的作用,幫助生物體解除過多的氨,降低其對機(jī)體的毒性具有很重要的作用。歸結(jié)國內(nèi)外生產(chǎn)L-鳥氨酸的途徑主要有以下幾種,分別是提取法,化學(xué)法,酶法和發(fā)酵法。本論文利用的是酶法轉(zhuǎn)化精氨酸生產(chǎn)L-鳥氨酸。本論文首先通過合適的發(fā)酵條件獲得大量的菌體細(xì)胞,再通過制備PVA-微晶纖維素
2、復(fù)合水凝膠生產(chǎn)固定化細(xì)胞,最后利用填充床反應(yīng)器實(shí)現(xiàn)連續(xù)轉(zhuǎn)化。為今后擴(kuò)大化生產(chǎn)L-鳥氨酸提供一定的理論基礎(chǔ)和思路。
本實(shí)驗(yàn)對蘇云金芽孢桿菌進(jìn)行了放大培養(yǎng),確定了發(fā)酵時(shí)間為20h、溫度為35℃、通氣量為1.5vvm、攪拌速率為300r·min-1、接種量為1.0%。
本實(shí)驗(yàn)采用PVA-微晶纖維素制備了固定化細(xì)胞,確定了PVA濃度為0.1g·mL-1、SiO2濃度為0.04g·mL-1、微晶纖維素濃度為0.04g·mL-1
3、、游離菌體添加量為0.1g·mL-1。
本實(shí)驗(yàn)對利用固定化細(xì)胞在搖床中轉(zhuǎn)化精氨酸實(shí)驗(yàn)進(jìn)行了研究,確定了反應(yīng)液中精氨酸添加量為50g·L-1、每100mL轉(zhuǎn)化液中添加固定化細(xì)胞的量為20g、搖床轉(zhuǎn)速為150r·min-1、轉(zhuǎn)化時(shí)間為24h、制備固定化細(xì)胞時(shí)的冷凍溫度為-4℃、冷凍時(shí)間(單次)為26h、冷凍-解凍次數(shù)為3次。
本實(shí)驗(yàn)確定了在填充床反應(yīng)器中固定化細(xì)胞轉(zhuǎn)化精氨酸實(shí)驗(yàn)的條件:填充床規(guī)格為40mm×300mm、停
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