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文檔簡介
1、血栓栓塞性疾病嚴(yán)重威脅人類的生命健康,是發(fā)病率高的疾病之一,近年來得到了各學(xué)科研究人員越來越多的關(guān)注。發(fā)展早期、無創(chuàng)的血栓診斷方法和技術(shù)對血栓疾病的治療具有重要意義。本論文的研究主要基于四嗪(Tetrazines)和反式環(huán)辛烯烴(trans-cyclooctene,TCO)生物共軛正交反應(yīng)的原理,設(shè)計(jì)了兩步法微氣泡血栓靶向的微氣泡超聲分子顯影增強(qiáng)策略,利用Tetrazines和TCO之間高選擇性和快速的狄爾斯-阿爾德(Diels-Ald
2、er)生物正交偶聯(lián)反應(yīng)實(shí)現(xiàn)超聲微氣泡的血栓早期超聲影像診斷,并攜帶抗凝藥物實(shí)現(xiàn)血栓的早期治療。本論文的研究內(nèi)容主要包括以下三個方面:
(1)首先,將正交分子四嗪-聚乙二醇-N-羥基琥珀酰亞胺酯(Tetrazine-PEG5-NHS)化學(xué)偶聯(lián)到1,2-二硬脂?;?sn-甘油基-3-磷酸乙醇胺-N-[氨基(聚乙二醇)-2000](DSPE-PEG2k-NH2)分子上,制備修飾Tetrazine的脂質(zhì)分子(D SPE-PEG2k-P
3、EG5-Tetrazine),然后以DSPE-PEG2k-PEG5-Tetrazine和二硬脂?;字D憠A(DSPC)為膜材,通過振搖法制備攜載Tetrazine分子的脂質(zhì)微氣泡(Tetra-MBs)。進(jìn)而,將靶向血小板活化分子的p-選擇素抗體(antiCD62p)與反式環(huán)辛烯-聚乙二醇-N-羥基琥珀酰亞胺酯(TCO-PEG4-NHS)分子化學(xué)偶聯(lián)制備攜載反式環(huán)辛烯分子的CD62p抗體復(fù)合物(TCO-PEG4-antiCD62p)。通
4、過形貌表征和結(jié)構(gòu)表征,驗(yàn)證了Tetra-MBs和TCO-PEG4-antiCD62p的成功制備和合成。
(2)其次,采用體外平行平板流動腔實(shí)驗(yàn),驗(yàn)證了Tetra-MBs與TCO-PEG4-antiCD62p預(yù)先靶向的活化血小板之間的靶向效率,結(jié)果顯示,在體外試驗(yàn)下約17%的微氣泡能夠快速靶向至預(yù)先靶向處理的活化血小板表面。進(jìn)而,在大鼠深靜脈血栓模型上,采用兩步法驗(yàn)證了Tetra-MBs對早期深靜脈血栓的靶向速率、超聲造影增強(qiáng)效
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