2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、R-苯基乙?;状?R-PAC)是一種重要的手性有機合成中間體,在制藥業(yè)中常作為前體物質(zhì)來合成苯丙胺類藥物,如麻黃堿,去甲麻黃堿及安非他命等等。本研究利用生物轉(zhuǎn)化的方法,選擇海棲熱袍菌乙酰羥酸合酶的催化亞基(TmAHAS-CSU)為生物催化劑,以丙酮酸及苯甲醛為反應(yīng)底物,在硫胺素焦磷酸及其它輔因子的存在下,以最優(yōu)化的實驗條件制備得到了R-PAC,分離后產(chǎn)率為83.6%,純度為98.3%(HPLC檢測結(jié)果)。同時,我們還測定了該生物催化劑

2、轉(zhuǎn)化苯甲醛衍生物及類似物的可能性,結(jié)果顯示其有較寬的底物譜。
  首先,我們利用本實驗室前期制備的能夠過表達(dá)海棲熱袍菌乙酰羥酸合酶催化亞基(TmAHAS-CSU)的重組工程菌株EcR(DE3)-pET28a-TmAHAS-CSU,采取自誘導(dǎo)方式制備了TmAHAS-CSU,并經(jīng)過Ni-NTA親和層析得到了純化后的目的蛋白。然后我們分別利用純化后的TmAHAS-CSU蛋白及重組工程菌株全菌為催化劑探討了生物轉(zhuǎn)化法制備R-PAC的方法。

3、
  在酶TmAAS-CSU催化的反應(yīng)中,為了使R-PAC產(chǎn)率最大化,對其合成體系進(jìn)行優(yōu)化,最終確定最佳反應(yīng)體系為50mM的磷酸鹽(PBS)緩沖液,pH8.0,反應(yīng)時間40min,反應(yīng)溫度為80℃,助溶劑DMSO含量1%,底物丙酮酸(Pyr)和苯甲醛(BA)的最佳比例為1.25∶1,最佳濃度分別為50mM和40mM。在實驗中我們還發(fā)現(xiàn),以重組工程菌株的全菌催化該反應(yīng)時能夠獲得更加理想的產(chǎn)率。
  此外,還以苯甲醛的衍生物以及

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