反膠束純化胰蛋白酶及含膦二肽的微水合成驗(yàn)證.pdf

1、反膠束萃取具有使用條件溫和,萃取效率高,成本低,溶劑可重復(fù)利用,不引起蛋白質(zhì)和酶變性等許多優(yōu)點(diǎn),用于分離和純化蛋白質(zhì)等生物大分子具有巨大的應(yīng)用前景.本論文運(yùn)用該技術(shù)進(jìn)行了從粗胰酶中分離純化胰蛋白酶的研究,對(duì)反膠束中胰蛋白酶STM圖像進(jìn)行了探討,驗(yàn)證了在AOT反膠束中用胰凝乳蛋白酶催化合成乙酰氨基苯丙?；?丁膦酸酰胺的反應(yīng).觀察AOT/異辛烷反膠束中胰蛋白酶的STM形貌,發(fā)現(xiàn)該酶的構(gòu)象發(fā)生了變化,卷曲程度增加,空間結(jié)構(gòu)更緊密,相對(duì)于水中"

2、剛性"增強(qiáng),處于"部分活化"狀態(tài).由于處于"相對(duì)剛性"結(jié)構(gòu),其π-π共軛程度減弱,反膠束中紫外光譜、熒光光譜相對(duì)于水中均發(fā)生了藍(lán)移.本文驗(yàn)證了在0.1mol/L AOT反膠束中,40℃,pH值9.40條件下,α-胰凝乳蛋白酶催化α-N-乙酰苯丙氨酸乙酯與α-氨基丁膦酸合成含膦二肽的反應(yīng).實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明:通過(guò)檢測(cè)游離氨基與鄰苯二甲醛反應(yīng)產(chǎn)生的熒光,得到反應(yīng)30min、60min后游離氨基比反應(yīng)前顯著降低,因而證實(shí)乙酰氨基苯丙酰基-丁膦酸酰胺