用于高效液相色譜—原子熒光光譜聯(lián)用的硫脲預還原氫化物發(fā)生接口技術及其在硒形態(tài)分析中的應用.pdf

1、聯(lián)用技術已經(jīng)成為元素形態(tài)分析中應用最廣泛的方法。高效液相色譜和原子光譜聯(lián)用是聯(lián)用技術中發(fā)展最快、應用最多的聯(lián)用技術。硒元素是一個典型的雙功能元素，當生物體內硒含量太低時，會出現(xiàn)硒缺乏癥狀；而硒含量太高時，又有可能導致硒中毒；不僅如此，生物體對硒的吸收和代謝與其存在的形態(tài)有密切的關系。硒形態(tài)分析的分析方法學研究已成為元素形態(tài)分析研究領域的一個熱點。本論文主要貢獻是提出硫脲(TU)在線預還原六價硒(Se(Ⅵ))的方法、并研究了可能的還原機制

2、；所提出的“在線—動力學控制預還原”方法與傳統(tǒng)硼氫化鉀/鹽酸(KHB4/NaOH-HCl)氫化物發(fā)生(HG)體系聯(lián)合使用，作為離子對高效液相色譜(IP-HPLC)和非色散原子熒光光譜(AFS)聯(lián)用技術的接口成功地應用于生物樣品中硒形態(tài)分析。此外建立了HPLC與動態(tài)反應池電感耦合等離子體質譜(DRCICP-MS)聯(lián)用的方法并應用于血液樣品中硒代氨基酸的分析。本論文含三個部分： 第一章首先對硒在自然界中的存在及其生物學功能進行了闡述

3、，解釋了硒形態(tài)分析工作的重要性和現(xiàn)實意義。其次，對硒形態(tài)分析中采用的各種聯(lián)用技術方法進行了詳細的介紹，分為分離方法、接口技術、檢測技術以及樣品處理和保存方法等幾部分。 第二章發(fā)展了TU在線預還原Se(Ⅵ)的新方法；解決了Se(Ⅵ)直接KBH4/NaOH-HCl還原效率太低的、無法直接在線進樣的困難。經(jīng)在線TU預還原，Se(Ⅵ)的發(fā)生效率提高了10倍以上。并以此為接口，建立了IP-HPLC分離，TU預還原HG-AFS檢測體系，對四

4、種常見的硒形態(tài)硒代胱氨酸、硒代蛋氨酸、亞硒酸和硒酸進行分離檢測。并將建立的方法成功地應用于富硒酵母、培養(yǎng)的富硒大蒜和標準參考物質NIST1946(冷凍魚器官)中硒形態(tài)分析。 第三章建立了HPLC和DRCICP-MS聯(lián)用的分析方法對高硒地區(qū)，湖北省恩施自治州湖北民族學院附屬醫(yī)院門診患者血漿中含硒蛋白的酶解產(chǎn)物中的硒代氨基酸進行形態(tài)分析，結果顯示樣品血漿中硒代半胱氨酸的含量基本保持在一定范圍；而硒代蛋氨酸的濃度有很大差異，其濃度與總