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文檔簡介
1、研究目的:
通過觀察實驗大鼠腓腸肌糖酵解酶(LDH、PK、HK和ALD)和有氧氧化酶(SDH、MDH和CCO)水平和調節(jié)因子(HIF1α和PGC1)基因表達的變化,從機體糖酵解酶、有氧氧化酶及其調節(jié)的角度探討低氧訓練對機體糖代謝潛能的影響。
研究方法:
選用6周齡雄性SD大鼠90只,經2周適應性訓練后,篩選出60只,隨機分為6組:1)恒定負荷低住低練組(S-LoLo),2)恒定負荷高住高練組(S-HiHi)
2、,3)恒定負荷高住低練組(S-HiLo),4)遞增負荷低住低練組(P-LoLo),5)遞增負荷高住高練組(P-HiHi),6)遞增負荷高住低練組(P-HiLo)。采用水平動物跑臺進行耐力訓練,恒定負荷常氧訓練強度為35m/min,恒定負荷低氧訓練強度為30m/min,遞增負荷常氧訓練以35m/min訓練1周后,在第2周內分2次遞增負荷強度到39m/min,然后以此強度進行訓練,遞增負荷低氧訓練以30m/min訓練1周后,在第2周內分2次
3、遞增負荷強度到34m/min,然后以此強度進行訓練,持續(xù)時間為4w,每周訓練5d。所有訓練組均在4w末最后一次訓練恢復24h后取材。采用半自動生化分析儀測定HK、ALD和MDH活性,核酸蛋白分析儀測定LDH和PK活性,紫外分光光度計測定SDH活性,酶標儀測定CCO含量,采用實時熒光定量PCR(RQ-PCR)技術測試HIF1α和PGC1mRNA。
研究結果
1.與S-LoLo相比,S-HiHi大鼠腓腸肌LDH活性有所下
4、降,PK、HK和ALD活性無明顯變化,S-HiLo大鼠腓腸肌LDH、ALD活性都有升高(P<0.01,P>0.05),PK、HK活性均有下降(P>0.05,P<0.01);S-HiLo大鼠腓腸肌LDH活性顯著高于S-HiHi,ALD活性略有上調,HK活性顯著低于后者,PK活性無明顯變化。
與S-LoLo相比,S-HiHi大鼠腓腸肌SDH活性非常顯著性提高(P<0.01),MDH活性和CCO含量有所升高,S-HiLo大鼠腓腸肌S
5、DH和MDH活性均明顯下降(-41.3%,P<0.01;-41.2%,P<0.05),CCO含量略有下降;與 S-HiLo相比,S-HiHi大鼠腓腸肌SDH、MDH活性均非常顯著性升高(P<0.01),CCO含量略有增加。
與S-LoLo相比,S-HiLo大鼠腓腸肌HIF1αmRNA表達量明顯增加(P<0.05),S-HiHi有所降低,S-HiLo大鼠腓腸肌HIF1αmRNA表達量明顯高于S-HiHi(P<0.05);與S-L
6、oLo相比,S-HiHi大鼠腓腸肌PGC1mRNA表達量明顯增加(P<0.05),S-HiLo略有下降,S-HiHi大鼠腓腸肌PGC1mRNA表達量非常顯著性高于S-HiLo(P<0.01)。
2.P-HiHi大鼠腓腸肌LDH、PK、HK和ALD活性均低于P-LoLo(P>0.05,P<0.05,P<0.05,P>0.05);P-HiLo較P-LoLo LDH和ALD活性均顯著升高(P<0.05),PK和HK活性有增加趨勢;P
7、-HiLo大鼠腓腸肌LDH、PK、HK和ALD活性較P-HiHi均有非常顯著性增加(P<0.01)。
P-HiHi大鼠腓腸肌SDH、MDH、CCO水平均高于P-LoLo,其中,MDH、CCO水平具顯著性差異(P<0.05,P<0.05),P-HiLo大鼠腓腸肌SDH活性與P-LoLo相比有降低趨勢,MDH活性有所增加(P>0.05),CCO含量無明顯變化;P-HiHi大鼠腓腸肌SDH活性和CCO含量較P-HiLo明顯升高(P<
8、0.05,P<0.01),兩組MDH活性無明顯差異。
與P-LoLo相比,P-HiHi和P-HiLo大鼠腓腸肌HIF1αmRNA表達均無明顯變化,P-HiHi大鼠腓腸肌HIF1αmRNA表達量較P-HiLo略有增加。與P-LoLo相比,P-HiLo大鼠腓腸肌PGC1mRNA表達量有所下降(-16%,P>0.05),P-HiHi大鼠腓腸肌PGC1 mRNA表達量明顯高于P-LoLo和P-HiLo(P<0.05,P<0.01)。<
9、br> 3.與S-LoLo相比,P-LoLo大鼠腓腸肌LDH活性有所升高,PK和ALD活性無顯著性變化(P>0.05),但兩者均呈下降趨勢,HK活性顯著下降(P<0.05);P-HiHi除LDH活性略有升高外,PK、HK和ALD活性較S-HiHi均有顯著性下降(P<0.05,P<0.01,P<0.05);P-HiLo較S-HiLo大鼠腓腸肌LDH活性無明顯變化,PK、HK和ALD活性均有不同程度的增加(P>0.05,P<0.01,P<
10、0.05)。
與S-LoLo相比,P-LoLo大鼠腓腸肌SDH活性略有升高,MDH活性、CCO含量都有下降;與S-HiHi相比,P-HiHi組SDH活性呈現非常顯著性下降(P<0.01),MDH活性無明顯變化,CCO含量有所增加;與S-HiLo相比,P-HiLo組SDH、MDH活性均有明顯增加(P<0.05,P<0.01),CCO含量無明顯變化。
P-LoLo大鼠腓腸肌HIF1αmRNA表達量與S-LoLo基本一致,
11、P-HiHi大鼠腓腸肌HIF1αmRNA表達量高于S-HiHi,P-HiLo大鼠腓腸肌HIF1αmRNA表達量明顯低于S-HiLo(P<0.05);P-LoLo大鼠腓腸肌PGC1mRNA表達量略高于S-LoLo;P-HiHi大鼠腓腸肌PGC1mRNA表達量較S-HiHi下降了93%,但不顯著;P-HiLo腓腸肌PGC1mRNA表達量較S-HiLo有增加趨勢。
4.S-LoLo:HIF-1αmRNA表達量與PK活性呈正相關,r=
12、0.862(P<0.05);S-HiHi:PGC1mRNA表達量與SDH活性呈正相關,r=0.998(P<0.01);P-LoLo:HIF-1αmRNA表達量與ALD活性呈負相關,r=-0.959(P<0.05);P-HiHi:HIF-1αmRNA表達量與PK活性呈負相關,r=-0.738(P<0.05);P-HiLo:HIF-1αmRNA表達量與LDH活性呈正相關,r=0.834(P<0.05)。
結論:
1.恒定
13、負荷不同低氧訓練比較:高住低練比高住高練更能提高骨骼肌糖酵解潛能,高住低練和高住高練HIF1αmRNA表達對糖酵解酶水平均無明顯影響;高住高練比高住低練更能提高骨骼肌有氧代謝潛能,高住高練PGC1mRNA表達對SDH活性有一定促進作用,高住低練PGC1mRNA表達對有氧氧化酶水平無明顯影響。
2.遞增負荷不同低氧訓練比較:高住低練比高住高練更能提高骨骼肌糖酵解潛能,高住低練HIF1αmRNA表達對LDH活性有一定促進作用,高住
14、高練HIF1αmRNA表達不能提高糖酵解酶水平;高住高練比高住低練更能提高骨骼肌有氧代謝潛能,高住高練和高住低練PGC1mRNA表達對有氧氧化酶水平均無明顯影響。
3.恒定負荷、遞增負荷兩種低氧訓練方案比較:高住低練訓練方式,遞增負荷比恒定負荷更能提高骨骼肌糖酵解潛能和有氧代謝潛能,遞增負荷HIF1αmRNA表達對LDH活性有一定促進作用,恒定負荷HIF1αmRNA表達對糖酵解酶水平無明顯影響,遞增負荷和恒定負荷PGC1mRN
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