PBDE-209和Cd的聯(lián)合肝毒性效應(yīng)及機(jī)理研究.pdf

1、多溴聯(lián)苯醚和重金屬都是水體、大氣、土壤中檢出率比較高的污染物，二者往往同時(shí)存在于環(huán)境中，呈現(xiàn)共同暴露的狀態(tài)。因此，對(duì)于二者共同暴露是否會(huì)產(chǎn)生更為嚴(yán)重的聯(lián)合毒性需要引起關(guān)注。本文選取了應(yīng)用廣泛的十溴聯(lián)苯醚(PBDE-209)和毒性較大的重金屬鎘(Cd)來(lái)研究二者共同暴露所產(chǎn)生的聯(lián)合毒性。采用兩種人肝癌細(xì)胞系，HepG2細(xì)胞和SMMC-7721細(xì)胞作為實(shí)驗(yàn)材料，研究PBDE-209和Cd共同暴露對(duì)肝臟細(xì)胞的聯(lián)合毒性效應(yīng)。具體研究?jī)?nèi)容和結(jié)論如

2、下:
　　1)首先進(jìn)行了PBDE-209和Cd對(duì)人肝癌細(xì)胞系單獨(dú)暴露實(shí)驗(yàn)，并用AB法檢測(cè)細(xì)胞活性。發(fā)現(xiàn)兩種細(xì)胞對(duì)PBDE-209在考察濃度范圍內(nèi)無(wú)明顯濃度依賴(lài)性，對(duì)Cd有明顯濃度依賴(lài)性。根據(jù)單獨(dú)暴露實(shí)驗(yàn)結(jié)果成功篩選了共同暴露濃度。
　　2)探究了PBDE-209和Cd共同暴露對(duì)人肝癌細(xì)胞系細(xì)胞狀態(tài)、線粒體和細(xì)胞膜的毒性效應(yīng)。觀察了共同暴露后細(xì)胞形態(tài)變化。通過(guò)MTT法證明共同暴露極可能造成了線粒體損傷。另外，通過(guò)檢測(cè)LDH證明

3、，在考察的濃度范圍內(nèi)，細(xì)胞膜并沒(méi)有明顯損傷，毒性效應(yīng)并不是通過(guò)損傷細(xì)胞膜造成的。
　　3)使用JC-1熒光探針檢測(cè)PBDE-209和Cd共同暴露后人肝癌細(xì)胞系的線粒體膜電位變化。結(jié)合MTT實(shí)驗(yàn)結(jié)果，確定PBDE-209和Cd共同暴露會(huì)造成人肝癌細(xì)胞系線粒體損傷。同時(shí)，流式結(jié)果顯示PBDE-209和Cd共同暴露會(huì)引起人肝癌細(xì)胞系細(xì)胞凋亡。因此，PBDE-209和Cd共同暴露產(chǎn)生的聯(lián)合毒性是通過(guò)線粒體通路引起人肝癌細(xì)胞系細(xì)胞凋亡造成的