TNFR-1在小鼠毛囊周期中的表達及其作用初步探討.pdf

1、毛囊是表皮重要的附屬器官，它控制著毛發(fā)的生長，對動物的生存有重要的作用。在動物的一生中毛囊都會經(jīng)歷生長期、退化期和靜止期的周期性的循環(huán)變化來實現(xiàn)毛發(fā)生長和更新。在生長期，毛母質(zhì)細胞會迅速增殖分化形成內(nèi)根鞘和毛干，毛囊得以向下生長，與此同時，部分毛囊細胞也發(fā)生一定程度的細胞凋亡，以此避免細胞的過度增殖；退化期，毛囊因其下段細胞發(fā)生大量凋亡而變短且毛乳頭逐漸上移；在毛乳頭上移至毛囊隆突區(qū)bulge下方時毛囊即進入靜止期。在與毛囊周期性循環(huán)的

2、維持相關(guān)的各種信號通路中，TNF-α信號通路起著重要作用。TNF-α信號轉(zhuǎn)導可引起許多細胞內(nèi)的反應來促進細胞增殖，分化，調(diào)亡和誘發(fā)炎癥。TNFR-1作為 TNF-α信號轉(zhuǎn)導中起重要的也是起最主要作用的膜受體，其在出生后的小鼠毛囊周期中的表達部位及在小鼠毛囊周期中的表達規(guī)律尚沒有系統(tǒng)的研究。
　　目的：研究腫瘤壞死因子受體1（TNFR-1）在毛囊周期中表達的規(guī)律及初步作用。可以為揭示其在毛發(fā)周期中及周期的各階段轉(zhuǎn)換中所起的作用奠定一

3、定基礎(chǔ)，也可以為研究胞外信號通路在毛囊中的作用機制帶來啟發(fā)，特別是為進一步研究TNF-α信號通路對毛囊周期的調(diào)控提供了基礎(chǔ)依據(jù)。
　　方法：采用石蠟切片免疫熒光、Western blot、RT-PCR等方法檢測小鼠毛囊生長期、退化期和靜止期各時期TNFR-1的表達情況（取出生后P8d、P15d、P18d、P24d4個時相點）；免疫熒光檢測毛囊細胞分化標記物AE13和AE15的周期性表達；TUNEL檢測毛囊周期中的細胞凋亡情況。

4、r>　　結(jié)果：實驗結(jié)果表明在所有4個時相點的皮膚中TNFR-1都存在不同強度的表達，TNFR-1 mRNA從生長期中期(P8d)到生長期末期(P15d)表達量升高到較高水平，退化期(P18d)和靜止期(P24d)表達維持在較低水平；TNFR-1蛋白在生長期中期(P8d)和生長期末期(P15d)表達最強，而退化期(P18d)到靜止期(P24d)表達減弱并維持較弱的表達。免疫熒光的結(jié)果顯示:TNFR-1在生長期主要表達于表皮層，毛囊的毛干和

5、內(nèi)根鞘以及毛母質(zhì)，生長末期在外根鞘還出現(xiàn)明顯表達；退化期在外根鞘、毛干及表皮層有表達，在次級毛芽出現(xiàn)很強的特異性表達；在靜止期表皮層及杵狀毛中呈現(xiàn)弱表達。AE13在生長期主要表達于表皮層以及毛干的皮質(zhì)和毛小皮；退化期P18d在毛干尤其是毛干基部端（即角質(zhì)化區(qū)域和杵狀毛形成區(qū)）強表達；在靜止期P24d弱表達于表皮層及杵狀毛中。AE15在生長中期P8d主要表達于毛囊內(nèi)根鞘和毛干髓質(zhì)，從熒光亮度來看表達最強；生長末期P15d在內(nèi)根鞘和毛干髓質(zhì)

6、也有表達，但是表達強度明顯變?nèi)?；退化期P18d僅在毛囊殘余內(nèi)根鞘有少許表達；在靜止期P24d毛囊中無明顯AE15表達。TUNEL檢測細胞凋亡結(jié)果顯示：在生長期TUNEL陽性染色主要出現(xiàn)在表皮層，毛囊的毛干、內(nèi)根鞘以及毛母質(zhì)，生長末期還出現(xiàn)在外根鞘；在退化期P18d出現(xiàn)在外根鞘、表皮層以及毛干基部端；在靜止期P24d出現(xiàn)在表皮層、杵狀毛、bulge區(qū)和皮脂腺。
　　結(jié)論：在毛囊周期中，TNFR-1的表達具有高度的時空特異性，其表達與