Polo-like kinase5在細(xì)胞周期中的作用的初步研究.pdf

1、Polo-like kinase(PLK)家族是一類在細(xì)胞周期調(diào)控中發(fā)揮至關(guān)重要作用的絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶，它廣泛存在于真核生物中。目前已在哺乳類細(xì)胞中鑒定出4種PLK，分別是：PLK1，PLK2/SNK，PLK3/FNK/PRK及PLK4/SAK。PLK家族與腫瘤的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)，是很有前景的抗腫瘤靶點(diǎn)。在研究已知PLK家族成員的同時(shí)，人們也一直關(guān)注該激酶家族中是否存在新成員及其生物學(xué)功能。
　　 本實(shí)驗(yàn)室綜合應(yīng)用生物信息

2、學(xué)和分子細(xì)胞生物學(xué)技術(shù)，在小鼠中克隆到一個(gè)可能編碼絲/蘇氨酸激酶的基因，該蛋白具有一個(gè)N-末端激酶催化結(jié)構(gòu)域和一個(gè)C-末端polo-box結(jié)構(gòu)域，與PLK蛋白激酶非常相似。進(jìn)一步的序列同源性分析顯示，該蛋白與PLK蛋白激酶家族高度同源，其中與小鼠PLK1、PLK2、PLK3、PLK4的同源性分別為34％、39％、41％、26％，該蛋白與PLKl的相似性(54％)和同源性(34％)均比PLK4與PLK1的相似性(32％)和同源性(16％)

3、高，提示其可能是PLK家族的一個(gè)新成員。因而，初步將其歸為PLK激酶家族新成員，并命名為mPLK5(mouse PLK5 or mammalian PLK5)。本研究通過western blot分析表明mPLK5的分布具有組織特異性，主要在小鼠的大腦、小腦和脊髓等組織表達(dá)。細(xì)胞免疫熒光研究提示：外源性表達(dá)的mPLK5主要定位于細(xì)胞核，mPLK5的polo-box結(jié)構(gòu)域的關(guān)鍵保守氨基酸位點(diǎn)突變(W417F)不改變mPLK5的亞細(xì)胞定位。細(xì)