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文檔簡介
1、目的:觀察不同濃度(0,1,5,10,50,100,120μmol/L)的白藜蘆醇(resveratrol, Res)對體外培養(yǎng)大鼠心肌微血管內(nèi)皮細(xì)胞(myocardial microvascular endothelial cells,MMVECs)血管生成的影響及其可能機制。
方法:植塊法培養(yǎng)并鑒定大鼠 MMVECs,取第二代細(xì)胞進(jìn)行實驗;并在加入不同濃度的Res處理后觀察:1)其對MMVECs增殖、遷移和體外管腔樣結(jié)構(gòu)形
2、成能力的影響;2)采用 Western blot測定 MMVECs中沉默信息調(diào)節(jié)因子1(Silence information regulator type1, SIRT1)、腺苷酸活化蛋白激酶(AMP-activated protein kinase, AMPK)和內(nèi)皮型一氧化氮合酶(endothelial nitric oxide synthase, eNOS)磷酸化水平的改變,評價其在Res促血管形成過程中的作用價值。
3、結(jié)果:
1)與對照組相比,Res呈劑量依賴性促進(jìn)了內(nèi)皮細(xì)胞的增殖、遷移和體外管腔形成,這一促血管新生過程伴隨有SIRT1蛋白表達(dá)的增加及AMPK和eNOS磷酸化程度的增加,其效應(yīng)在濃度為100μmol/L時最顯著。
2)給于SIRT1抑制劑,Nicotinamide預(yù)處理后雖抑制了Res誘導(dǎo)的SIRT1的激活但對其促使的內(nèi)皮細(xì)胞增殖、遷移和體外管腔形成及 Res誘導(dǎo)的 AMPK和 eNOS磷酸化無影響。
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