簡介：點擊查看更多ULK1激活JNK信號通路的分子機(jī)制及生物學(xué)功能.pdf精彩內(nèi)容。

簡介：目的對來源于廣西眼鏡蛇毒的神經(jīng)生長因子NGF蛋白的基因進(jìn)行體外擴(kuò)增、克隆及序列分析，并表達(dá)。研究廣西眼鏡蛇毒神經(jīng)生長因子誘導(dǎo)人類小涎腺腺樣囊性癌細(xì)胞NACC凋亡的影響。方法采用TRIZOL法從廣西眼鏡蛇毒腺中提取總RNA，經(jīng)RTPCR擴(kuò)增出廣西眼鏡蛇毒中的NGF的CDNA，測序后與其它來源的NGF比較同源性；將來源于廣西眼鏡蛇毒的NGF蛋白的基因克隆至融合表達(dá)載體PET40B中，轉(zhuǎn)化至大腸桿菌BL21DE3中，經(jīng)IPTG誘導(dǎo)表達(dá)出NGF。利用蛋白印跡分析其是否有NGF抗原活性及用PCI2細(xì)胞進(jìn)行生物活力測定并通過細(xì)胞計數(shù)法與天然蛇毒NGF的活性比較。應(yīng)用HE染色觀察細(xì)胞形態(tài)學(xué)改變，流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞凋亡率的變化。結(jié)果廣西眼鏡蛇毒中的NGF可在大腸桿菌中克隆和表達(dá)。DNA軟件分析其有110AMINOACIDS，MOLECULARWEIGHT為1234693DALTONS，等電點為7643。經(jīng)蛋白印跡分析可知其具有NGF抗原活性，PCI2細(xì)胞生物活力測定結(jié)果顯示經(jīng)純化的融合蛋白具有NGF生物活力，為進(jìn)一步研究NGF的結(jié)構(gòu)和功能關(guān)系提供更多的信息。形態(tài)學(xué)觀察到用藥后的NACC細(xì)胞質(zhì)空泡、核固縮、核染色質(zhì)聚集等形態(tài)學(xué)變化現(xiàn)象。流式細(xì)胞儀檢測到試驗組細(xì)胞凋亡率高于對照組，說明廣西眼鏡蛇毒神經(jīng)生長因子能誘導(dǎo)NACC細(xì)胞凋亡。

簡介：南京醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文淋巴增殖性疾病分子生物學(xué)與分子遺傳學(xué)研究姓名張亞平申請學(xué)位級別碩士專業(yè)內(nèi)科學(xué)（血液病學(xué)）指導(dǎo)教師李建勇陳麗娟20080612南京醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文論文獨創(chuàng)性聲明本論文逋巴籃迸酏OD魚姐叫噬漣』』土遂籃動卜是我個人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果。論文中除了特別加以標(biāo)注和致謝的地方外，不包含其他人或機(jī)構(gòu)已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果。其他同志對本研究的啟發(fā)和所做的貢獻(xiàn)均在論文中作了明確的聲明并表示了謝意。專業(yè)』墜齜作者簽名立牛日期J竺叢虹論文使用授權(quán)聲明本人完全了解南京醫(yī)科大學(xué)有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定，即學(xué)校有權(quán)保留送交論文的復(fù)印件，允許論文被查閱和借閱；學(xué)?？梢怨颊撐牡娜炕虿糠謨?nèi)容，可以采用影印、縮印或其它復(fù)制手段保存論文。保密的論文在解密后遵守此規(guī)定。作者簽名J趨璽產(chǎn)一導(dǎo)師簽名日期型∥，弓

簡介：外傷后細(xì)菌性致死性肉芽腫FATALBACTERIAGRANULOMAAFTERTRUMAFBGT是一種病程短、致死率高的新疾病21世紀(jì)前還未被皮膚病學(xué)界所認(rèn)識直至1996年才由西京醫(yī)院皮膚科發(fā)現(xiàn)并命名多個病人的皮損行透射電鏡檢查發(fā)現(xiàn)炎細(xì)胞內(nèi)外存在類似短桿菌將患者皮損組織行多次嚴(yán)格的細(xì)菌培養(yǎng)發(fā)現(xiàn)致病菌為一種革蘭陽性厭氧短桿菌細(xì)菌生化鑒定支持該致病菌為痤瘡丙酸桿菌PROPIONIBACTERIAACNESPACNES或放線菌而API系統(tǒng)鑒定為PACNES并且根據(jù)該致病菌藥敏試驗結(jié)果挽救了一例患者1外傷后細(xì)菌性致死性肉芽腫致病菌分子生物學(xué)鑒定2外傷后細(xì)菌性致死性肉芽腫動物模型初步構(gòu)建該實驗結(jié)果確認(rèn)FBGT的致病菌是PACNES加深了對FBGT的認(rèn)識并利用家兔構(gòu)建成功FBGT的動物模型為進(jìn)一步深入研究該病的發(fā)病機(jī)理打下了一定的實驗動物學(xué)基礎(chǔ)對構(gòu)建更加完備的動物模型有一定啟示

簡介：腫瘤目前仍是臨床難以治療的疾病之一，對人類的健康有很大危害，現(xiàn)在臨床治療腫瘤的主要方法是手術(shù)、化療、放療，一方面給病人帶來生存的希望，同時也給病人帶來較大創(chuàng)傷?；?、放療副作用較大，使病人恢復(fù)的較慢，多年來眾多學(xué)者一直在尋找尋找有效治療惡性腫瘤的藥物，尤其是篩選高效、低毒、低成本的天然藥物，倍受生物學(xué)和醫(yī)學(xué)界的關(guān)注。姬松茸AGRICUSBLAZEIMURILL又名小松菇、柏氏蘑菇、巴西蘑菇，屬擔(dān)子菌亞門，層菌綱，傘菌目，蘑菇黑傘科，蘑菇黑傘屬。1965年，日裔巴西人古本隆壽將在巴西圣保羅皮埃達(dá)德郊外農(nóng)場草地上采到的一種不知名的美味食用菌送到了日本。日本三重大學(xué)農(nóng)學(xué)部的巖出亥之助教授對這種無名菌種進(jìn)行了菌種分離和培養(yǎng)實驗，并取名為姬松茸，中文為小松口蘑之意。1967年，由比利時的海涅曼博士鑒定為新種，并命名為，與雙孢蘑菇ABISPUS同屬。此后，開始了姬松茸的基礎(chǔ)研究。1975年，日本的室內(nèi)高壟栽培法首次獲得成功，經(jīng)努力改良才確立了現(xiàn)在的大規(guī)模人工栽培方法。1995年中國科學(xué)院植物所梁凈教授用來自巴西原始森林的野生菌種在福建栽培成功，命名為國產(chǎn)姬松茸。多年來，很多學(xué)者對姬松茸的有效成分及其藥用價值進(jìn)行了深入的研究，發(fā)現(xiàn)姬松茸多糖具有抗腫瘤、提高機(jī)體免疫力及抗突變、殺菌作用，還可改善肝臟功能并促進(jìn)造血。因此該物質(zhì)已受到人們的廣泛重視。但是，姬松茸多糖對哪些腫瘤有抑制作用，尤其是作用的分子機(jī)理是什什么都有待深入研究。關(guān)于姬松茸多糖的抗癌性，國內(nèi)外學(xué)者主要是用姬松茸粗提物和荷瘤小鼠進(jìn)行研究，而無人將姬松茸分離純化后的有效成分處理白血病細(xì)胞和胃癌細(xì)胞進(jìn)行抗腫瘤研究。因此，本研究采用噻唑藍(lán)MTT還原法、流式細(xì)胞分析技術(shù)、DNA瓊脂糖凝膠電泳技術(shù)、端粒酶活性測定、CASPASE3蛋白表達(dá)分析、BCL2蛋白表達(dá)分析及光鏡和透射電鏡觀察等技術(shù)和方法對AGARICUSBLAZEIMURRILL水溶性多糖提取物FA2BΒ和AZT的誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡，F(xiàn)A2BΒ對化療藥的增敏作用及其相應(yīng)機(jī)理等進(jìn)行了深入研究。結(jié)果表明1FA2BΒ可明顯抑制體外培養(yǎng)人胃癌MKN45細(xì)胞和人急性早幼粒細(xì)胞性白血病HL60細(xì)胞的增殖。FA2BΒ作用72H對人胃癌MKN45細(xì)胞的抑制率可達(dá)4944％以上，而對人急性早幼粒細(xì)胞性白血病HL60細(xì)作用96H抑制率高達(dá)82％AZT可明顯抑制體外培養(yǎng)人胃癌MKN45細(xì)胞的增殖，作用72H后抑制率高達(dá)5637％證明FA2BΒ、AZT具有良好抗癌效果。2實驗首次證明，AZT、FA2BΒ可明顯誘導(dǎo)體外培養(yǎng)人胃癌MKN45細(xì)胞和人急性早幼粒細(xì)胞性白血病HL60細(xì)胞的凋亡。并能改變上述細(xì)胞的細(xì)胞周期時相分布，使細(xì)胞在G期發(fā)生嚴(yán)重阻滯，這是誘導(dǎo)人胃癌MKN45細(xì)胞和急性早幼粒細(xì)胞性白血病細(xì)胞HL60凋亡的重要分子機(jī)理之一。3本實驗同時證明，AZT、FA2BΒ可使體外培養(yǎng)人胃癌MKN45細(xì)胞和人急性早幼粒細(xì)胞性白血病HL60細(xì)胞的端粒酶活性明顯降低，這是提取物抑制體外培養(yǎng)人胃癌細(xì)胞和人急性早幼粒細(xì)胞白血病細(xì)胞增殖的又一重要分子機(jī)理。4本研究首次發(fā)現(xiàn)，AZT、FA2BΒ可上調(diào)體外培養(yǎng)人胃癌MKN45細(xì)胞和人急性早幼粒細(xì)胞性白血病HL60細(xì)胞的CASASE3基因表達(dá)水平。這是提取物誘導(dǎo)該細(xì)胞凋亡、細(xì)胞周期改變和細(xì)胞增殖在G1期發(fā)生阻滯的重要分子基礎(chǔ)。5同時發(fā)現(xiàn)ATT可使體外培養(yǎng)人胃癌MKN45細(xì)胞細(xì)胞的BCL2基因的表達(dá)水平降低，是該細(xì)胞凋亡、細(xì)胞周期改變和細(xì)胞增殖在G1期發(fā)生阻滯的又一重要分子機(jī)制，并與CASPASE3基因表達(dá)的改變相互協(xié)調(diào)、相互促進(jìn)來誘導(dǎo)體外培養(yǎng)人胃癌MKN45細(xì)胞的凋亡。6本實驗還首次證實，F(xiàn)A2BΒ聯(lián)合AZT明顯高于單獨用藥組，F(xiàn)A2BΒ對AZT具有增效作用。綜上所述，AZT、FA2BΒ對人胃癌MKN45細(xì)胞和人急性早幼粒細(xì)胞性白血病HL60細(xì)胞的增殖均有明顯抑制作用，可明顯誘導(dǎo)上述惡性腫瘤細(xì)胞的凋亡，使細(xì)胞增殖發(fā)生明顯阻滯；對惡性腫瘤細(xì)胞凋亡的誘導(dǎo)又與抑制其端粒酶活性、改變CASPASE3和BCL2基因表達(dá)水平有密切關(guān)系。同時發(fā)現(xiàn)FA2BΒ聯(lián)合AZT明顯高于單獨用藥組，F(xiàn)A2BΒ對AZT具有增效作用。研究表明，從國產(chǎn)姬松茸多糖中分離的RNA蛋白復(fù)合物FA2BΒ本身具有一定的抑制癌細(xì)胞效果，又能減輕化療藥物AZT的毒副作用，對化療藥物AZT有增效作用，如與化療藥物AZT結(jié)合使用，可能會在不降低療效的前提下，減少化療藥物AZT的用量，降低其毒副作用。因此FA2BΒ作為化療輔助藥物進(jìn)行開發(fā)應(yīng)具有很好的臨床應(yīng)用前景。

簡介：目前對胰腺移植手術(shù)后缺乏早期診斷急性排斥反應(yīng)敏感、特異性指標(biāo)監(jiān)測胰腺的內(nèi)外分泌功能變化不能及時反映是否發(fā)生急性排斥反應(yīng)及早期病理學(xué)改變TH1TH2型細(xì)胞因子INFΓIL4平衡的變化與胰腺移植后急性排斥反應(yīng)或免疫耐受有關(guān)在發(fā)生急性排斥反應(yīng)時INFΓ表達(dá)上調(diào)IL4表達(dá)下調(diào)結(jié)合病理學(xué)檢查可以對急性排斥反應(yīng)做出診斷穿孔素和顆粒酶B是細(xì)胞毒性T細(xì)胞分泌的毒性蛋白作為細(xì)胞毒性T細(xì)胞活化的特異性分子標(biāo)志與排斥反應(yīng)的病理過程有關(guān)檢測靜脈血穿孔素和顆粒酶B的基因表達(dá)與胰腺局部的蛋白表達(dá)可以對胰腺移植后急性排斥反應(yīng)做出早期診斷和鑒別診斷

簡介：南華大學(xué)碩士學(xué)位論文CD40、BCL2分子在膀胱癌組織中的表達(dá)及其生物學(xué)意義研究姓名陽寧申請學(xué)位級別碩士專業(yè)泌尿外科指導(dǎo)教師羅志剛20070501頁碼3CD40、BCL2分子在膀胱癌組織中的表達(dá)及其生物學(xué)意義研究CD40、BCL2分子在膀胱癌組織中的表達(dá)及其生物學(xué)意義研究中文摘要目的研究CD40、BCL2分子在膀胱移行細(xì)胞癌的表達(dá)，并分別探討其與腫瘤分期、病理分級等臨床病理參數(shù)之間的相關(guān)性及其相互關(guān)系，檢測膀胱移行細(xì)胞癌細(xì)胞凋亡情況，分析其與CD40﹑BCL2分子表達(dá)的關(guān)系。方法采用免疫組化技術(shù)檢測78例膀胱移行細(xì)胞癌組織中CD40、BCL2分子的表達(dá)狀況；利用HOECHST法檢測膀胱移行細(xì)胞癌凋亡情況，確定凋亡率。同時以20例供者所取的無瘤膀胱組織做參照。結(jié)果1．CD40在膀胱移行上皮中的表達(dá)率1/205，在膀胱移行細(xì)胞癌中的表達(dá)率55/78705，CD40在膀胱移行細(xì)胞癌中高表達(dá)，明顯高于無瘤膀胱組織，且差異有顯著性（P＜001）,CD40的表達(dá)與膀胱移行細(xì)胞癌的臨床分期P＜001）、病理分級P＜005）、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移P＜001）呈負(fù)相關(guān)。2．BCL2在膀胱移行上皮中的表達(dá)率1/205），在膀胱移行細(xì)胞癌中的表達(dá)率36/78467），BCL2在膀胱移行細(xì)胞癌組織中高表達(dá)，明顯高于無瘤膀胱組織，且差異有顯著性（P＜001）,BCL2的表達(dá)與膀胱移行細(xì)胞癌的臨床分期（P＜001）、病理分級（P＜005）、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移（P＜005）呈正相關(guān),臨床資料中與患者的年齡相關(guān)。3．膀胱移行上皮細(xì)胞癌中的細(xì)胞凋亡率為656士109；CD40陽性組細(xì)胞凋亡率為1260士038，陰性組細(xì)胞凋亡率為677士053，兩組相比差異有顯著性P＜001，膀胱移行細(xì)胞癌中CD40表達(dá)與凋亡率呈正相關(guān)；BCL2陽性組凋亡率701±113,BCL2陰性組凋

簡介：學(xué)校代碼學(xué)號10023200501041胰腺癌5一氟尿嘧啶5一FU耐藥相關(guān)蛋白篩查及胰腺癌候選免疫原性膜抗原SLP一2和PROHIBITIN分子生物學(xué)功能研究專業(yè)年級姓名導(dǎo)師寸YLLJ副導(dǎo)師完成日期北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院臨床醫(yī)學(xué)2005級楊宇趙玉沛教授王維斌博士北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院臨床學(xué)院北京協(xié)和醫(yī)院基本外科教研室2013年6月212RNA反轉(zhuǎn)錄和體外轉(zhuǎn)錄2821_3樣品標(biāo)記和雜交3122蛋白質(zhì)組學(xué)篩查34221蛋白樣品提取34222蛋白樣品制備34223ITRAO標(biāo)記34224離線反相液相色譜OFFLINERPLC34225LCMS／MS液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜分析35226蛋白質(zhì)鑒定和定量35227IPA網(wǎng)絡(luò)分析3523生物信息學(xué)分析軟件353實驗結(jié)果354討論395本部分研究小結(jié)426參考文獻(xiàn)43第二部分胰腺癌候選免疫原性膜抗原SLP2和PROHIBITIN分子生物學(xué)功能研究47一、SLP一2在胰腺癌細(xì)胞中生物學(xué)功能研究481實驗材料4811人胰腺癌細(xì)胞系及相應(yīng)培養(yǎng)基4812RNA抽提試劑及耗材4813RNA抽提相關(guān)試劑的配置4914逆轉(zhuǎn)錄RTPCR及QRTPCR主要試劑及儀器4915蛋白提取及檢測試劑5016WESTERNBLOTTING主要試劑及配置方法5017SIRNA相關(guān)試劑5218過表達(dá)質(zhì)粒構(gòu)建53181人SLP一2基因CDNA序列53182PLRES2EGFP質(zhì)粒信息5319質(zhì)粒擴(kuò)增LB液體培養(yǎng)基的制備542實驗方法5421TRIZOL法提取細(xì)胞總RNA5422RNA純度與濃度檢測5523逆轉(zhuǎn)錄RTPCR反應(yīng)體系及條件5524REALTIMEPCR反應(yīng)體系及條件5625細(xì)胞總蛋白提取56

簡介：點擊查看更多新型抗菌增敏劑的分子設(shè)計、合成及生物學(xué)活性研究.pdf精彩內(nèi)容。

簡介：研究背景小腸結(jié)腸炎耶爾森菌（YERSINIAENTEROCOLITICA）是一種革蘭氏陰性無芽孢桿菌，屬于耶爾森菌屬，是該菌屬的三大致病菌之一。小腸結(jié)腸炎耶爾森菌廣泛存在于自然環(huán)境中，主要通過污染食物進(jìn)入人體。人感染小腸結(jié)腸炎耶爾森菌后，主要表現(xiàn)為胃腸道癥狀，如嘔吐、腹痛、腹瀉等，多具有自限性。但是，部分患者可出現(xiàn)一系列嚴(yán)重的并發(fā)癥，如心內(nèi)膜炎、反應(yīng)性關(guān)節(jié)炎、組織膿腫等，甚至引起敗血癥導(dǎo)致死亡。在歐洲，由該菌和假結(jié)核耶爾森菌引起的耶氏菌病在常見的人畜共患病中占第四位在美國，由該菌引起的疾病每年發(fā)病約117萬例在我國，文獻(xiàn)可查的小腸結(jié)腸炎耶爾森菌暴發(fā)有兩次。該菌可分為6個生物型1A，1B和2～5和60個血清型，主要通過檢測AIL、YSTA、YSTB、YADA和VIRF5個毒力基因來判斷其致病性。小腸結(jié)腸炎耶爾森菌對青霉素和一代頭孢天然耐藥，對其他種類的抗菌藥物具有不同程度的耐藥率。脈沖場凝膠電泳PULSEDFIELDGELELECTROPHESIS，PFGE分型是現(xiàn)階段小腸結(jié)腸炎耶爾森菌分子分型最常用的方法，主要用于菌株的溯源。山東省自2006年開始，設(shè)立高密市和五蓮縣兩個監(jiān)測點對小腸結(jié)腸炎耶爾森菌開展監(jiān)測，至2011年共從雞、牛、羊、豬等動物糞便和生熟肉、蒼蠅中分離到小腸結(jié)腸炎耶爾森菌237株。這些菌株的動力、生物型、血清型、毒力基因和抗菌藥物敏感性等生物學(xué)特性尚缺乏系統(tǒng)性的研究分析，分子分型也尚未開展。研究目的1、系統(tǒng)分析分離到的小腸結(jié)腸炎耶爾森菌的動力、生物型、血清型、毒力基因和抗菌藥物敏感性等生物學(xué)特性及其時間、地區(qū)和宿主分布特點。2、對分離到的小腸結(jié)腸炎耶爾森菌進(jìn)行PFGE分型，了解菌株的親緣關(guān)系，探討表型分型和PFGE分型的相互關(guān)系。3、初步建立山東省小腸結(jié)腸炎耶爾森菌的基礎(chǔ)數(shù)據(jù)庫，為該菌的長期監(jiān)測奠定基礎(chǔ)，為耶氏菌病的預(yù)測、預(yù)警提供技術(shù)支持。研究方法1、動力試驗采用半固體穿刺法，生物分型根據(jù)生化反應(yīng)進(jìn)行判斷，血清分型采用玻片凝集法，毒力基因檢測采用PCR法，抗菌藥物敏感性檢測采用VITEK2COMPACT系統(tǒng)和ASTGN16藥敏卡。2、PFGE分型參照PULSECHINA推薦的標(biāo)準(zhǔn)方法進(jìn)行，電泳圖譜處理及聚類分析采用BIONUMERICS61軟件。3、資料的錄入、整理和簡單分析采用EXCEL2007軟件，數(shù)據(jù)的統(tǒng)計學(xué)分析采用SPSS160軟件。研究結(jié)果1、動力為“中”的菌株占42％10237，動力為“差”的菌株占30％7237，其余菌株動力良好。動力為“中”或“差”的菌株在各年份、各地區(qū)和多種宿主中均有分布。2、987％234237的菌株為生物1A型其余3株菌為生物4型，均從2006年高密市的豬糞樣本中分離到。3、498％118237的菌株凝出相應(yīng)血清型，以O(shè)∶5219％，52237和O∶8211％，50237型為主。2011年可分血清型最多（5種）高密分離株O∶5型最多239％，39163，五蓮分離株O∶8型最多338％，2574各宿主分離株均以O(shè)∶5和O∶8型為主。4、YSTB基因的陽性率最高，為814％193237AIL和YSTA基因僅在3株菌中檢測到，陽性率為13％3237未檢測到Y(jié)ADA和VIRF基因。YSTB基因陽性菌株在不同時間、地區(qū)和宿主中均為優(yōu)勢菌株。5、共有235株菌獲得抗菌藥物敏感性試驗的結(jié)果。菌株對頭孢曲松、頭孢吡肟、阿米卡星、慶大霉素和替加環(huán)素的敏感率最高，為100％對氨芐西林的耐藥率最高，為945％222235。菌株的多重耐藥率為123％29235。2007和2011年分離株對呋喃妥因的敏感情況有差異P＜005高密市分離株對復(fù)方新諾明的耐藥率104％，17163高于五蓮縣分離株14％，172P＜005毒力基因A型（AILYSTAYSTBYADAVIRF）菌株對氨芐西林、阿莫西林克拉維酸、頭孢唑林、頭孢西丁的耐藥率和對呋喃妥因的中介耐藥率依次為990％，190192896％172192948％182192802％154192948％182192高于毒力基因B型（AILYSTAYSTBYADAVIRF）菌株依次為725％，2940650％，2640675％2740425％1740650％2640P＜005。6、237株菌中的231株被分為144個PFGE型別，相似性系數(shù)在611％～1000％，無明顯優(yōu)勢型別。五蓮分離株的PFGE聚集性高于高密分離株，含7株及以上菌株的PFGE型別均出現(xiàn)在五蓮縣。其余6株菌未獲得PFGE條帶。144個PFGE型別中有15個型別在中國疾控中心數(shù)據(jù)庫中可找到相同或相近的型別。7、17株動力為“中”或“差”的菌株中的14株形成3個聚類簇52株O∶5血清型菌株中的31株形成4個聚類簇，50株O∶8血清型菌株中的19株形成1個聚類簇41株毒力基因B型（AILYSTAYSTBYADAVIR）菌株中的20株形成1個聚類簇藥敏型別在PFGE聚類中分布分散，無特異性。8、動力、生物分型、血清分型、毒力基因分型、藥敏分型和PFGE分型的SIMPSON指數(shù)分別為01362、00251、06564、03081、07214和09982。結(jié)論1、高密市和五蓮縣的小腸結(jié)腸炎耶爾森菌存在動力突變株菌株幾乎全為生物1A型血清型以O(shè)∶5和O∶8型為主，存在地區(qū)差異菌株攜帶的毒力基因主要為YSTB基因，無傳統(tǒng)致病性菌株耐藥譜廣泛，大部分菌株對青霉素類和一、二代頭孢耐藥，存在一定的多重耐藥現(xiàn)象，YSTB基因陽性的生物1A型菌株與YSTB基因陰性的生物1A型菌株耐藥性不同。2、高密市和五蓮縣的小腸結(jié)腸炎耶爾森菌存在多克隆系，基因多態(tài)性明顯，部分克隆株長期存在，五蓮地區(qū)可能存在相對優(yōu)勢克隆系部分山東分離株可能與其他省份菌株存在聯(lián)系。3、小腸結(jié)腸炎耶爾森菌的PFGE分型可能與其動力有一定相關(guān)，與生物型、血清型、毒力基因型和藥敏型別不具有相關(guān)性。4、PFGE具有強(qiáng)大的分型能力，但在菌株溯源時需與表型分型聯(lián)合使用。

簡介：目的研究人腦垂體瘤中血管內(nèi)皮生長因子VEGF和核轉(zhuǎn)錄因子KBP65NFKBP65的表達(dá)及其在腫瘤生物學(xué)行為中的作用。材料與方法應(yīng)用SABC方法進(jìn)行免疫組織化學(xué)染色，觀察6例正常人腦垂體組織、12例人腦垂體瘤組織和6例復(fù)發(fā)垂體瘤中VEGF和NFKBP65的表達(dá)情況，以及這些腫瘤因子表達(dá)與腫瘤生物學(xué)行為之間的關(guān)系。結(jié)果免疫組化染色可見在正常腦垂體細(xì)胞未見VEGF和NFKBP65表達(dá)；而在垂體瘤細(xì)胞中這兩種因子均有不同程度的表達(dá)。在復(fù)發(fā)垂體瘤中，這兩種蛋白的表達(dá)水平較在初發(fā)垂體瘤和正常腦垂體組織中的表達(dá)水平高，且差別顯著P＜001。這兩種蛋白主要在腫瘤細(xì)胞中有表達(dá)，這兩種蛋白的表達(dá)水平與垂體瘤的復(fù)發(fā)相關(guān)。結(jié)論VEGF、NFKBP65的表達(dá)增強(qiáng)與垂體瘤的形成、腫瘤浸潤和腫瘤的血管生成關(guān)系密切，在垂體瘤的復(fù)發(fā)中起重要作用。

簡介：凝血障礙是導(dǎo)致出血性疾病的重要原因凝血過程的激活在血栓形成中也具有極為重要的作用該研究通過對部分凝血因子的基因突變和多態(tài)性研究一方面探討了遺傳出血性疾病血友病A和FⅩⅢ缺乏癥的分子機(jī)制另一方面研究了凝血因子Ⅱ、Ⅴ和ⅩⅢ的多態(tài)FⅡ20210A、FVLEIDEN和FⅩⅢAV34L在加拿大紐芬蘭人群和中國臺灣人群中的分布頻率以及與心肌梗死發(fā)病的相關(guān)性結(jié)論1在加拿大紐芬蘭TWILLIGATE地區(qū)中確認(rèn)了一個導(dǎo)致輕型血友病A的FⅧ因子VAL2016ALA方德突變研究中建立的位點特異PCR方法適合快速、準(zhǔn)確、簡便診斷當(dāng)?shù)厝巳旱妮p型血友病A已用于臨床服務(wù)同時發(fā)現(xiàn)拉博道FTEAU地區(qū)的輕型血友病A患者中有一FⅧ因子ALA200THR突變2在紐芬蘭島的FⅩⅢ缺乏癥患者中發(fā)現(xiàn)第6外顯子的剪接受位有一G→A突變3FⅡ20210A可能是MⅠ的一個風(fēng)險因子在MⅠ早發(fā)中更為重要FVL可能是MⅠ早發(fā)的易患因子FⅩⅢALEU34可能僅在男性中獨立導(dǎo)致MⅠ的易患性4FⅡ20210A和FⅩⅢALEU34相互作用產(chǎn)生的協(xié)同效應(yīng)導(dǎo)致MⅠ的強(qiáng)易患性5FⅩⅢALEU34和FVL在紐芬蘭人群中的分布與其他高加索人群一致紐芬蘭人群中FⅡ20210A的分布頻率低于已報告的其他大多數(shù)高加索人群6中國臺灣人群中FVL、FⅡ20210A和FⅩⅢALEU34都有02﹪的極低的分布頻率和01﹪的基因位點頻率

簡介：分子生物學(xué)研究表明流感病毒的血凝素HA基因與流行規(guī)模最密切只有HA蛋白分子上抗原決定簇區(qū)的氨基酸替換才能引起抗原性變異該研究對在河北省分離到的甲亞型HN流感病毒HA基因進(jìn)行了核苷酸序列測定并結(jié)合抗原性分析資料以探索地方毒株的型別變遷和基因變異規(guī)律及時抓住有意義變異株指導(dǎo)今后流感的監(jiān)測、診斷及試劑和疫苗研制甲亞型流感病毒株的新變種多首發(fā)于北方故河北省流行毒株在目前流感病毒HN亞型的變異和流行中可能具有重要作用結(jié)論1、199798流感流行期分離到6株甲亞型流感病毒抗原性接近于A京防186與A北京26295有大變異2、基因分析表明1997年中國出現(xiàn)了甲亞型新變異株在制備診斷試劑和疫苗時需要用此類毒株3、核苷酸序列測定結(jié)合抗原性分析可更準(zhǔn)確地闡明病毒變異情況

簡介：目的研究臨床分離的碳青霉烯類耐藥腸桿菌科細(xì)菌CRE的耐藥譜及耐藥機(jī)制，分析其流行傳播特點，為及時遏制臨床感染的暴發(fā)流行和抗菌藥物的合理使用提供指導(dǎo)。方法1收集溫州醫(yī)科大學(xué)附屬第二醫(yī)院2012年1月2013年11月間臨床連續(xù)分離的對碳青霉烯類藥物耐藥（耐藥中介）的腸桿菌科細(xì)菌，分析其臨床分布特點及耐藥譜，了解該院耐藥菌株的耐藥形勢。2采用改良HODGE試驗對碳青霉烯類耐藥菌株進(jìn)行碳青霉烯酶表型確證試驗，初步篩查產(chǎn)碳青霉烯酶菌株采用PCR技術(shù)擴(kuò)增主要Β內(nèi)酰胺酶基因，包括碳青霉烯酶、超廣譜Β內(nèi)酰胺酶ESBLS和頭孢菌素酶（AMPC酶），并對陽性擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行測序和BLAST比對，檢測菌株耐藥基因的攜帶情況，研究菌株的耐藥機(jī)制。3利用碳青霉烯酶基因陽性菌株與受體菌J53和EC600的接合轉(zhuǎn)移試驗研究碳青霉烯酶基因及其質(zhì)粒的水平轉(zhuǎn)移能力，對陽性接合子進(jìn)行PCR驗證碳青霉烯酶基因及其它耐藥基因，并檢測陽性接合子的體外藥敏情況。4通過脈沖場凝膠電泳PFGE與腸桿菌基因組間重復(fù)一致性序列ERICPCR分析我院產(chǎn)碳青霉烯酶菌株間的同源性，研究耐藥菌株的流行特征通過多位點序列分型MLST，分析本研究中產(chǎn)碳青霉烯酶肺炎克雷伯菌與全球流行株的相關(guān)性。5提取產(chǎn)碳青霉烯酶菌株的質(zhì)粒，利用普通PCR技術(shù)檢測碳青霉烯酶基因是否定位于質(zhì)粒上并分析其基因所在質(zhì)粒的大小。結(jié)果1本研究共收集到溫州醫(yī)科大學(xué)附屬第二醫(yī)院2012年1月2013年11月臨床連續(xù)分離的非重復(fù)碳青霉烯類耐藥腸桿菌科細(xì)菌57株，其中肺炎克雷伯菌25株，陰溝腸桿菌16株，產(chǎn)氣腸桿菌10株，產(chǎn)酸克雷伯菌2株，粘質(zhì)沙雷菌2株，摩根摩根菌1株，弗氏檸檬酸桿菌1株。菌株標(biāo)本來源以痰液為主，占632％，其次是血液105％、創(chuàng)口膿液105％、尿液88％和其它7O％。菌株的科室來源較廣泛，但仍存在一定的聚集性，18株316％來源于ICU病房，14株246％來源于神經(jīng)外科病區(qū)。臨床抗菌藥物體外敏感性試驗顯示，57株腸桿菌科細(xì)菌對碳青霉烯類有不同程度的耐藥，對亞胺培南和厄他培南的敏感率分別為211％和35％，同時對頭孢菌素類、單環(huán)內(nèi)酰胺類、Β內(nèi)酰胺酶抑制劑復(fù)合物和呋喃妥因等抗菌藥物均表現(xiàn)出較高的耐藥性，敏感率基本都在20％以下，甚至全耐藥，但對氨基糖苷類（丁胺卡那、慶大霉素和妥布霉素）和氟喹諾酮類（左氧氟沙星）藥物的敏感性較好，尤其是丁胺卡那，敏感率高達(dá)965％。257株碳青霉烯類耐藥菌株中，改良HODGE試驗陽性的有37株陽性率649％，陰性20株P(guān)CR檢測碳青霉烯酶基因陽性的37株（陽性率649％），陰性20株。以PCR擴(kuò)增結(jié)果為參照標(biāo)準(zhǔn)，改良HODGE試驗的靈敏度為973％，特異度為95％。57株腸桿菌科細(xì)菌耐藥基因測序結(jié)果顯示，27株攜帶KPC2，6株攜帶NDM1，3株攜帶IMP4，1株攜帶IMP842株攜帶ESBLS基因，陽性率737％16株攜帶AMPC酶基因，陽性率281％大多菌株都同時攜帶多種耐藥基因，同時攜帶碳青霉烯酶基因及其它耐藥基因的占509％。3接合轉(zhuǎn)移試驗27株產(chǎn)KPC2菌株中，有24株獲得陽性接合子，3株未接合成功4株產(chǎn)IMP菌株中有2株IMP4和1株IMP8接合成功，1株IMP4未接合成功6株產(chǎn)NDM1的菌株全部接合成功。陽性接合子對Β內(nèi)酰胺類藥物的耐藥性很高，但對氨基糖苷類、氟喹諾酮類、復(fù)方新諾明和呋喃妥因幾乎全部敏感。4脈沖場凝膠電泳發(fā)現(xiàn)，10株產(chǎn)碳青霉烯酶的陰溝腸桿菌具有較高的同源性，存在五個不同的克隆型，其中主要克隆型A型有5株，均攜帶KPC2，B型2株，均攜帶NDM1，C、D、E型各1株，分別攜帶KPC2、IMP8和NDM1。ERICPCR結(jié)果顯示，7株產(chǎn)氣腸桿菌具有很高的同源性，存在兩個不同克隆型，其中A型4株，B型3株，這7株菌均攜帶KPC2碳青霉烯酶基因。同一克隆型菌株攜帶的耐藥基因相同（EA10除外），耐藥譜也基本相同，且來自同一病區(qū)。多位點序列分型顯示，17株碳青霉烯酶陽性的肺炎克雷伯菌中主要存在9個ST型，其中以ST11型為主，有6株，其次為ST13型4株，ST15、ST231、ST147、ST1、ST185和ST45各一株，另外，還發(fā)現(xiàn)一株新的ST型，提交肺炎克雷伯菌MLST數(shù)據(jù)庫，命名為ST1726。5經(jīng)質(zhì)粒PCR擴(kuò)增結(jié)果顯示，所有碳青霉烯酶基因均存在于質(zhì)粒上，其中KPC2均位于54KB左右的質(zhì)粒，IMP4、IMP8和NDM1位于更大的約100KB左右的質(zhì)粒上。結(jié)論1碳青霉烯類耐藥腸桿菌科細(xì)菌CRE耐藥形勢非常嚴(yán)峻，多表現(xiàn)為多重耐藥，甚至對替加環(huán)素的敏感性也很差，但對氨基糖苷類和氟喹諾酮類藥物的敏感性較好，可替代Β內(nèi)酰胺類作為臨床感染的首選治療藥物。另外CRE菌株的科室來源具有一定的聚集性，提示臨床需加強(qiáng)這些病區(qū)的院感監(jiān)測和防控。2我院CRE菌株的耐藥機(jī)制主要是產(chǎn)碳青霉烯酶，除了國內(nèi)外廣泛流行的KPC2、IMP外，還檢測到了國內(nèi)少有報道的NDM1金屬酶，且此種酶在多種腸桿菌科細(xì)菌中均有檢出耐藥菌株大多同時攜帶多種耐藥基因，是導(dǎo)致菌株多重耐藥一個重要原因。本研究還證實了改良HODGE試驗對于快速篩查產(chǎn)碳青霉烯酶腸桿菌科細(xì)菌具有很高的靈敏度和特異度。3大部分菌株可通過接合轉(zhuǎn)移試驗將碳青霉烯酶基因傳遞給受體菌大腸埃希菌，說明耐藥基因存在于可移動質(zhì)粒上，可通過水平傳播的方式引起耐藥菌株的流行播散。4本研究中的CRE菌株具有很高的同源性，并且同一克隆型的菌株幾乎都來自同一病區(qū)，提示耐藥菌株存在克隆傳播，應(yīng)加強(qiáng)病區(qū)醫(yī)護(hù)人員衛(wèi)生、消毒管理。我院產(chǎn)碳青霉烯酶的肺炎克雷伯菌以ST11型為主，這也是國內(nèi)的主要流行株，與國外的主要流行株ST258僅存在一個等位基因的差異。

簡介：碩士學(xué)位論文論文題目兒童B系急性淋巴細(xì)胞性白血病CD1332的生物學(xué)特性及其分子機(jī)制初步研究研究生姓名龐麗指導(dǎo)教師姓名趙文理專業(yè)名稱兒科學(xué)研究方向小兒血液與腫瘤論文提交日期2014年3月