簡(jiǎn)介：S腺苷蛋氨酸SAM廣泛存在于生物體細(xì)胞中，參與體內(nèi)轉(zhuǎn)甲基、轉(zhuǎn)硫基和聚胺合成等多種重要的反應(yīng)，它在肝病、抑郁癥和關(guān)節(jié)炎等疾病的治療與預(yù)防中有重要的應(yīng)用，市場(chǎng)需求量巨大。本文運(yùn)用代謝工程技術(shù)對(duì)釀酒酵母工業(yè)菌株ZJU001中SAM合成的相關(guān)代謝途徑進(jìn)行改造以提高SAM的產(chǎn)量。在菌株ZJU001中利用多拷貝整合型質(zhì)粒PYMIKPSAM2實(shí)現(xiàn)了SAM2基因的過(guò)表達(dá)，增加了胞內(nèi)SAM合成酶的表達(dá)量，提高菌株合成SAM的能力。在10L發(fā)酵罐上，改造菌株的SAM產(chǎn)量達(dá)到881GL，比原始菌株提高了271％。以模式菌株BY4741為對(duì)象開(kāi)展了釀酒酵母胞內(nèi)合成SAM相關(guān)代謝網(wǎng)絡(luò)的研究。從SAM合成的底物供給、SAM合成后的累積及降解途徑等角度出發(fā)，分別構(gòu)建了P型ATP酶基因PMR1、糖原支鏈酶基因GLC3、細(xì)胞周期蛋白依賴性激酶基因PHO85和SAM脫羧酶基因SPE2等四個(gè)基因敲除的突變菌株?？疾旄魍蛔兙闟AM的合成能力，發(fā)現(xiàn)GLC3和SPE2的單獨(dú)缺失有利于釀酒酵母對(duì)SAM的合成與積累。為提高工業(yè)菌株ZJU001中基因敲除的穩(wěn)定性，建立了一套針對(duì)雙倍體工業(yè)菌株的基因快速敲除的新方法。構(gòu)建了ZJU001中的GLC3、SPE2、ERG4和ERG6四個(gè)基因分別敲除及GAL11基因過(guò)表達(dá)的五個(gè)突變菌株。通過(guò)考察突變菌株的SAM合成能力，結(jié)果顯示GLC3和SPE2基因敲除的突變菌株其SAM產(chǎn)量分別提高了201％和124％。運(yùn)用標(biāo)記回收的基因敲除技術(shù)在ZJU001中同時(shí)敲除GLC3和SPE2，并過(guò)表達(dá)SAM2，獲得工程菌ZJU001GSSAM2。該菌在搖瓶發(fā)酵中的SAM產(chǎn)量達(dá)到114GL，是出發(fā)菌株的17倍，結(jié)果表明三個(gè)基因改造對(duì)促進(jìn)SAM的合成和積累具有協(xié)同作用。運(yùn)用反饋控制分批補(bǔ)料發(fā)酵策略在10L罐上考察了ZJU001GLC3、ZJU001SPE2、ZJU001GS以及ZJU001GSSAM2的SAM生產(chǎn)能力，結(jié)果顯示ZJU001GSSAM2的SAM產(chǎn)量最高，達(dá)到1032GL。以發(fā)酵積累數(shù)據(jù)為基礎(chǔ)，建立擬指數(shù)流加模型，設(shè)定比生長(zhǎng)速率Μ0125H1，對(duì)ZJU001GSSAM2的發(fā)酵進(jìn)行優(yōu)化，生物量最終達(dá)到1210GDCWL，SAM產(chǎn)量達(dá)到1247GL。本論文利用代謝工程技術(shù)對(duì)釀酒酵母工業(yè)菌株ZJU001合成SAM的代謝網(wǎng)絡(luò)進(jìn)行優(yōu)化和改造，大幅度提高了該工業(yè)菌株生產(chǎn)SAM的能力，為SAM的工業(yè)化生產(chǎn)打下良好的基礎(chǔ)。

簡(jiǎn)介：點(diǎn)擊查看更多船舶潔凈壓載水外來(lái)生物調(diào)查及滅活工程設(shè)計(jì).pdf精彩內(nèi)容。

簡(jiǎn)介：組織工程角膜體外構(gòu)建是將角膜種子細(xì)胞接種到具有良好生物相容性的角膜支架材料上，再進(jìn)行體外培養(yǎng)獲得結(jié)構(gòu)功能與正常角膜相似的“人工角膜”，以解決角膜供體匱乏的現(xiàn)狀。由于目前組織工程角膜培養(yǎng)方式大都采用靜態(tài)培養(yǎng)、手工塑形、人工接種，所構(gòu)建的角膜組織存在形態(tài)不規(guī)范、透明度差、批次之間的質(zhì)量難以控制等一系列問(wèn)題。其中組織工程角膜形狀與透明度的好壞是評(píng)價(jià)角膜質(zhì)量好壞的重要因素，但當(dāng)前缺少對(duì)角膜標(biāo)準(zhǔn)塑形，透明度評(píng)價(jià)的手段。因此，本文開(kāi)發(fā)了一套角膜透明度檢測(cè)裝置，實(shí)現(xiàn)對(duì)角膜透明度質(zhì)量的客觀評(píng)價(jià)；設(shè)計(jì)了一個(gè)角膜3D生物打印機(jī)，實(shí)現(xiàn)角膜的標(biāo)準(zhǔn)塑形與接種，具體內(nèi)容如下1完成組織工程角膜透明度檢測(cè)儀器的開(kāi)發(fā)根據(jù)透明度的定義完成測(cè)量公式的推導(dǎo)，提出了一種角膜透明度的檢測(cè)方法；根據(jù)檢測(cè)原理完成儀器元器件的選型和裝置結(jié)構(gòu)的搭建；以虛擬儀器為開(kāi)發(fā)平臺(tái)，利用LABVIEW編程實(shí)現(xiàn)控制軟件的開(kāi)發(fā)；2完成透明度檢測(cè)裝置性能分析通過(guò)裝置的空載實(shí)驗(yàn)，確定了裝置的系統(tǒng)誤差0028；選用標(biāo)準(zhǔn)樣品進(jìn)行大量測(cè)量實(shí)驗(yàn)，確定組織工程角膜透明度測(cè)量?jī)x性能指標(biāo)，包括精度、重復(fù)性、穩(wěn)定性等，確保了儀器性能；將儀器應(yīng)用于接觸鏡的透明度測(cè)量，得出了精確的接觸鏡透明度值；最后分別從光源的光強(qiáng)和波長(zhǎng)兩方面，對(duì)透明度檢測(cè)的影響因素進(jìn)行討論分析；3角膜3D生物打印機(jī)設(shè)計(jì)提出了一種細(xì)胞微球成絲的打印方法，并在此基礎(chǔ)上設(shè)計(jì)打印方案；對(duì)角膜3D生物打印的噴頭、細(xì)胞分時(shí)供給、裝置軟硬件控制系統(tǒng)進(jìn)行設(shè)計(jì)，在REPRAP打印機(jī)的基礎(chǔ)上改進(jìn)完成3D生物打印原型機(jī)構(gòu)建；采用動(dòng)網(wǎng)格模擬仿真細(xì)胞打印過(guò)程，驗(yàn)證了設(shè)計(jì)的3D生物印機(jī)可有效減小剪切力對(duì)細(xì)胞的損傷；最后進(jìn)行殼聚糖打印實(shí)驗(yàn)，驗(yàn)證得到打印機(jī)能夠?qū)崿F(xiàn)對(duì)角膜的塑形功能。綜上所述，本文設(shè)計(jì)開(kāi)發(fā)的兩個(gè)裝置為組織工程角膜的標(biāo)準(zhǔn)塑形，接種和質(zhì)量評(píng)估提供了新的方法與儀器，為組織工程角膜臨床應(yīng)用和標(biāo)準(zhǔn)化、批量化的構(gòu)建打下堅(jiān)實(shí)的基礎(chǔ)。

簡(jiǎn)介：肝素HEPARIN是由糖醛酸和D葡萄糖胺組成的線性硫酸化多糖，具有抗凝血、調(diào)血脂等重要的生物學(xué)功能，具有廣泛的醫(yī)學(xué)臨床應(yīng)用。為解決傳統(tǒng)的動(dòng)物源肝素在原料收集和生產(chǎn)環(huán)節(jié)中易受污染的問(wèn)題，滿足全球市場(chǎng)對(duì)多類型肝素的巨大需求，開(kāi)發(fā)非動(dòng)物源肝素系列產(chǎn)品將對(duì)肝素的基礎(chǔ)研究及其臨床應(yīng)用具有重要意義。非動(dòng)物來(lái)源肝素主要有兩種制備途徑一是以大腸桿菌K5發(fā)酵的肝素前體HEPAROSAN為底物，經(jīng)化學(xué)和酶法修飾得到生物工程肝素二是以二糖為起始底物經(jīng)糖基轉(zhuǎn)移酶以UDP葡萄糖醛酸和UDPN乙酰葡萄糖胺（或UDPN三氟乙酰葡萄糖胺）為單糖供體逐個(gè)添加單糖得到七糖骨架，并經(jīng)化學(xué)和酶法修飾得到超低分子量肝素ULTRALOWMOLECULARWEIGHTHEPARIN，ULMWH。但生產(chǎn)規(guī)模僅為毫克級(jí)別，距工業(yè)化生產(chǎn)還有很大的距離。主要的限制因素有1）肝素修飾酶硫磺基供體3磷酸腺苷5磷酰硫酸3PHOSPHOADENOSINE5PHOSPHOSULFATE，PAPS價(jià)格昂貴且易分解，雖然酶法合成PAPS已經(jīng)實(shí)現(xiàn)，但產(chǎn)量不高2）肝素修飾酶的表達(dá)量低，很難大量獲得3）目前肝素制備均采用純化后的游離酶進(jìn)行反應(yīng)，制備過(guò)程繁瑣，價(jià)格昂貴，且不能重復(fù)使用4）ULMWH生產(chǎn)所需的單糖供體UDPGLCNAC和UDPGLCNTFA價(jià)格昂貴，產(chǎn)量不高。為了解決以上問(wèn)題，本文開(kāi)展了以下方面的研究工作本文重組表達(dá)了三磷酸腺苷硫化酶和5腺苷磷酰硫酸激酶，構(gòu)建了一條體外高效合成PAPS的途徑。在最佳反應(yīng)條件下，采用三磷酸腺苷分批補(bǔ)料策略，PAPS產(chǎn)量可達(dá)1032GL，轉(zhuǎn)化率為814％。通過(guò)密碼子優(yōu)化、與麥芽糖結(jié)合蛋白MALTOSEBINDINGPROTEIN，MBP融合表達(dá)以及表達(dá)條件優(yōu)化等策略，在大腸桿菌中表達(dá)了C5異構(gòu)化酶C5EPIMERASE、肝素2O磺基轉(zhuǎn)移酶HEPARANSULFATE2OSULFOTRANSFERASE，2OST、肝素6O磺基轉(zhuǎn)移酶1HEPARANSULFATE6OSULFOTRANSFERASE1，6OST1、肝素6O磺基轉(zhuǎn)移酶3HEPARANSULFATE6OSULFOTRANSFERASE3，6OST3和肝素3O磺基轉(zhuǎn)移酶1HEPARANSULFATE3OSULFOTRANSFERASE1，3OST1等酶法合成肝素關(guān)鍵酶，表達(dá)水平分別達(dá)到305、325、215、225和300MGL。進(jìn)一步研究了醛基化標(biāo)簽固定肝素修飾酶的方法。通過(guò)蛋白理性設(shè)計(jì)，將醛基化標(biāo)簽分別引入到MBP中的四處不同位置E38H39，K170Y171，D209Y210和5352G353。通過(guò)比較重組MBP表達(dá)量和對(duì)氨基樹(shù)脂的吸附能力，發(fā)現(xiàn)D209Y210PMALMBP7FGE獲得最佳醛基化標(biāo)簽引入位點(diǎn)的融合配體MBP。利用綠色熒光蛋白和精氨酸水解酶作為報(bào)告蛋白，證實(shí)氨基樹(shù)脂LX1000HA對(duì)綠色熒光蛋白的結(jié)合率達(dá)90％，對(duì)精氨酸酶的結(jié)合率達(dá)71％。該固定化方法極大地提高了精氨酸酶操作穩(wěn)定性，在使用14次之后仍保留了53％的活性。將該方法應(yīng)用于肝素修飾酶，高效制備了五種肝素修飾酶的固定化酶。利用固定化肝素修飾酶建立了合成肝素的工藝路線。肝素前體經(jīng)化學(xué)法脫乙?；⒓恿蚧腔螳@得N硫磺化肝素前體NSULFOHEPAROSAN。以自制PAPS為硫磺基供體，利用固定化酶C5EPIMERASE、2OST、6OST1和6OST3對(duì)NSULFOHEPAROSAN進(jìn)行一鍋法硫磺化修飾，然后利用固定化酶3OST1對(duì)上述反應(yīng)物進(jìn)一步硫磺化修飾得到生物工程肝素。經(jīng)3OST1修飾得到的生物工程肝素具有抗凝血活性，效價(jià)可達(dá)到14IU。采用強(qiáng)陰離子交換SAX高效液相色譜HPLC對(duì)肝素結(jié)構(gòu)進(jìn)行分析，測(cè)定肝素經(jīng)酶法裂解后所得各種二糖的含量。根據(jù)定量分析，HEPAROSAN中ⅣA占100％，NSULFOHEPAROSAN中ⅣA占826％，ⅣS占9174％。而豬源的肝素中，ⅣA、ⅣS、ⅡA、ⅢA、ⅡS、ⅢS、ⅠA和ⅠS所占的比例分別為198％、214％、365％、110％、1044％、564％、076％和7429％。這一工作為進(jìn)一步生物合成肝素結(jié)構(gòu)鑒定奠定了基礎(chǔ)。最后，通過(guò)重組表達(dá)N乙酰葡萄糖胺激酶、N乙酰葡萄糖胺1磷酸尿苷轉(zhuǎn)移酶和無(wú)機(jī)焦磷酸水解酶，構(gòu)建了一條體外高效合成UDPGLCNAC和UDPGLCNTFA的途徑。在優(yōu)化的反應(yīng)條件下，采用分批補(bǔ)料策略，UDPGLCNAC的產(chǎn)量達(dá)到5951GL，生產(chǎn)力達(dá)到4039L1H1，轉(zhuǎn)化率為92％UDPGLCNTFA的產(chǎn)量達(dá)到4654GL，生產(chǎn)力達(dá)到332GL1H1，轉(zhuǎn)化率為755％。這一個(gè)工作為超低分子肝素關(guān)鍵前體生產(chǎn)提供了高效生產(chǎn)技術(shù)。

簡(jiǎn)介：分類號(hào)X5密級(jí)編號(hào)102013172桂林理工大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文陶瓷平板膜生物工藝（陶瓷平板膜生物工藝（CMBR）中水）中水回用工程運(yùn)行工況研究回用工程運(yùn)行工況研究專業(yè)業(yè)環(huán)境環(huán)境科學(xué)與科學(xué)與工程工程研究方向研究方向水污染控制水污染控制研究生生趙海青趙海青指導(dǎo)教師指導(dǎo)教師王敦球王敦球教授張文杰張文杰副教授副教授論文起止日期2014年9月至2016年5月研究生學(xué)位論文獨(dú)創(chuàng)性聲明和版權(quán)使用授權(quán)書(shū)獨(dú)創(chuàng)性聲明本人聲明所呈交的論文是本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果。據(jù)我所知，除了文中特別加以標(biāo)注和致謝的地方外，論文中不包含他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫(xiě)過(guò)的研究成果，也不包含為獲得其它教育機(jī)構(gòu)的學(xué)位或證書(shū)而使用過(guò)的材料。對(duì)論文的完成提供過(guò)幫助的有關(guān)人員已在論文中作了明確的說(shuō)明并表示謝意。學(xué)位論文作者（簽字）簽字日期學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書(shū)學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書(shū)本學(xué)位論文作者完全了解（學(xué)校）有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定，有權(quán)保留并向國(guó)家有關(guān)部門或機(jī)構(gòu)送交論文的印刷本和電子版本，允許論文被查閱和借閱。本人授權(quán)（學(xué)校）可以將學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行檢索，可以采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存、匯編學(xué)位論文。同時(shí)授權(quán)中國(guó)科學(xué)技術(shù)信息研究所將本學(xué)位論文收錄到中國(guó)學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù)，并通過(guò)網(wǎng)絡(luò)向社會(huì)公眾提供信息服務(wù)。本論文是否保密是否如需保密，保密期限為學(xué)位論文作者簽名導(dǎo)師簽字簽字日期年月日簽字日期年月日

簡(jiǎn)介：因創(chuàng)傷、先天發(fā)育異常等原因?qū)е碌哪虻廊睋p一直是臨床上泌尿外科難以解決的重大問(wèn)題，先天性的尿道缺損、尿道下裂更是男性泌尿生殖系統(tǒng)最為常見(jiàn)的疾病。尿道的病患不僅肉體痛苦，心靈同樣承受著很大的壓力，嚴(yán)重影響著男性患者的生理和心理的健康。通過(guò)尿道組織工程的技術(shù)，選用合適的支架材料修復(fù)受損尿道，可以避免外科手術(shù)的并發(fā)癥。優(yōu)良的生物支架材料要具有均勻的三維立體貫通性孔隙結(jié)構(gòu)，從而促進(jìn)種子細(xì)胞的生長(zhǎng)分化、相互作用和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的吸收利用，合適的生物支架材料能夠在可以調(diào)控的速率且同細(xì)胞生長(zhǎng)速率相匹配的條件下進(jìn)行降解成無(wú)毒的產(chǎn)物進(jìn)而逐步被機(jī)體吸收利用，此外還需具備優(yōu)良的物理力學(xué)性能形成正常的組織。本研究前期用于構(gòu)建組織工程尿道的絲膠蛋白殼聚糖甘油磷酸鈉支架材料，具有多孔結(jié)構(gòu)、能夠進(jìn)行逐步生物降解、無(wú)細(xì)胞毒性、可隨意塑形等特性，表明其具備應(yīng)用在組織工程尿道的可能性，但是也支架材料本身也還存在著限制其應(yīng)用于尿道修復(fù)的種種問(wèn)題。本課題針對(duì)絲膠蛋白殼聚糖甘油磷酸鈉支架材料所存在的孔徑過(guò)大、孔隙結(jié)構(gòu)不均勻、宏觀力學(xué)性能差等問(wèn)題，對(duì)支架材料進(jìn)行優(yōu)化制備，性能測(cè)試從而篩選出適合于尿道組織工程的制備工藝條件，并對(duì)制備得到的支架材料進(jìn)行了系列的生物學(xué)的評(píng)價(jià)。通過(guò)添加絲素蛋白和聚乙烯醇對(duì)支架材料的成分進(jìn)行優(yōu)化，研究了預(yù)冷凍溫度對(duì)支架材料孔徑結(jié)構(gòu)和力學(xué)性能等多方面的影響，綜合添加成分和工藝條件經(jīng)過(guò)性能表征確定支架材料的最終的制備工藝。對(duì)比優(yōu)化前后支架材料的降解性能和血液相容性，支架材料的各項(xiàng)性能都有所改善。支架材料的三維貫通性多孔孔徑分布在5080ΜM之間，初始降解率降低到3386％，更適合種子細(xì)胞的初期粘附生長(zhǎng)。通過(guò)動(dòng)物體內(nèi)系列實(shí)驗(yàn)，對(duì)支架材料進(jìn)行系列的生物學(xué)評(píng)價(jià)結(jié)果得出，功能化尿道組織工程支架材料不含熱源性物質(zhì)、無(wú)皮膚刺激性、不會(huì)引起遲發(fā)型超敏反應(yīng)、植入后局部反應(yīng)沒(méi)有引起明顯的炎癥，同對(duì)照組無(wú)明顯差別，12周內(nèi)支架材料可以全部降解完成。綜合本課題研究結(jié)果，制備得到的支架材料具有良好的生物相容性和理化性能，具備應(yīng)用于臨床尿道修復(fù)的應(yīng)用前景。

簡(jiǎn)介：目前，由于水環(huán)境日益惡化以及污水排放治理不力，致使我國(guó)大部分飲用水水源成為微污染水源。常規(guī)的水處理工藝針對(duì)微污染水源水中的溶解性有機(jī)物、亞硝酸鹽及氨氮等污染物的去除效果已逐漸不能滿足國(guó)家規(guī)定飲用水水質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)，這不但直接影響了人們的身體健康，并且也給凈水工藝處理帶來(lái)極大的困難，因此改善微污染水源水、提高飲用水質(zhì)量等問(wèn)題已成為目前亟待解決的重大任務(wù)。本文主要包括三大部分。第一部分主要是對(duì)臭氧生物活性炭工藝的工藝流程、工藝機(jī)理、工藝特點(diǎn)以及其影響因素和臭氧制備機(jī)理的研究。第二部分主要是通過(guò)對(duì)G水廠改造前后的進(jìn)出水水質(zhì)分析及運(yùn)行效果分析的對(duì)比研究，表明臭氧生物活性炭工藝對(duì)微污染水源水質(zhì)能夠?qū)λ蠧ODMN、氨氮等污染有機(jī)物以及FE、MN等金屬離子等也有很好的去除效果，并且能有效地降低出水致突變活性，保證居民飲用水安全。第三部分主要是X水廠臭氧生物活性炭工藝工程實(shí)例應(yīng)用，研究實(shí)際工程中應(yīng)用臭氧生物活性炭工藝的供水廠的設(shè)計(jì)計(jì)算及運(yùn)行參數(shù)的確定。臭氧生物活性炭工藝針對(duì)微污染水源水處理中，對(duì)水中溶解性有機(jī)物、藻類、色度以及消毒副產(chǎn)物等有很好的處理效果。G水廠臭氧生物活性炭工藝在常規(guī)處理之后的深度處理工藝部分又對(duì)濁度、色度、錳的去除率分別為22％、30和7，出廠水質(zhì)平均值分別達(dá)到008NTU、平均值小于5度和0029MGL的良好效果。對(duì)有機(jī)污染的去除效果更佳，CODMN、氨氮、亞硝酸鹽、UV254進(jìn)一步去除率分別達(dá)到40、79、82和63，出廠水質(zhì)平均值分別降低為196MGL、003MGL、002MGL和004MGL。由于X水廠目前正在建設(shè)當(dāng)中，還沒(méi)有正式生產(chǎn)運(yùn)行，故本論文只針對(duì)其水質(zhì)作為分析切入點(diǎn)，確定采用臭氧生物活性炭工藝作為X水廠深度處理工藝，主要分析臭氧生物活性工藝的確定方法理論及其主要構(gòu)筑物設(shè)計(jì)運(yùn)行參數(shù)的研究，為今后水廠建設(shè)及工藝的選取提供一定的理論根據(jù)，為水廠設(shè)計(jì)提供一定參考意義?？傮w結(jié)果表明，采用臭氧生物活性炭工藝作為處理微污染水源水對(duì)有機(jī)污染物、CODMN、氨氮、亞硝酸鹽等指標(biāo)的去除效果在很大程度上提升了原有的凈水工藝，其作為優(yōu)水質(zhì)、節(jié)能耗、低污染的綠色工業(yè)水處理技術(shù)必將獲得廣泛的應(yīng)用和發(fā)展。

簡(jiǎn)介：近年來(lái)，突發(fā)水污染事件的發(fā)生頻率越來(lái)越高，導(dǎo)致飲用水的水質(zhì)安全受到了非常大的威脅，各飲用水廠都在以保障出廠水水質(zhì)安全為第一任務(wù)目標(biāo)。在目前中國(guó)大多數(shù)的飲用水廠，臭氧生物活性炭工藝成為了他們的第一選擇。鎮(zhèn)江市的水源使用的是長(zhǎng)江水，長(zhǎng)江鎮(zhèn)江段水污染事件頻頻發(fā)生，對(duì)鎮(zhèn)江市的飲用水水質(zhì)安全造成了很大的威脅。本文分析了可能對(duì)鎮(zhèn)江征潤(rùn)州取水口造成污染的化工企業(yè)以及污染物，并且檢測(cè)分析了近五年來(lái)征潤(rùn)州取水口的水質(zhì)變化情況。本文以鎮(zhèn)江市自來(lái)水公司金山水廠為例，系統(tǒng)介紹了金山水廠中的臭氧生物活性炭工藝的設(shè)計(jì)、建造、設(shè)備安裝及投資情況。鎮(zhèn)江金山水廠的O3BAC深度處理工藝位于砂濾池過(guò)濾工序后，并且未使用臭氧做預(yù)氧化工序，而是繼續(xù)使用氯氣進(jìn)行預(yù)處理。經(jīng)過(guò)調(diào)試運(yùn)行，臭氧生物活性炭工藝達(dá)到了預(yù)期的水質(zhì)目標(biāo)，效果良好。經(jīng)過(guò)240270天，電鏡掃描炭層表面已經(jīng)有穩(wěn)定的致密菌團(tuán)，同時(shí)，生物量也達(dá)到了最高點(diǎn)，說(shuō)明生物活性炭濾池掛膜成功，出水水質(zhì)穩(wěn)定。運(yùn)行至今，活性炭指標(biāo)正常，并不需要進(jìn)行更換或再生，也未發(fā)生過(guò)生物泄露的現(xiàn)象。通過(guò)對(duì)2013年至2015年金山水廠、金西水廠水質(zhì)情況對(duì)比、金山水廠炭濾池出水水質(zhì)和砂濾池出水水質(zhì)對(duì)比，本文對(duì)O3BAC工藝的出水水質(zhì)、運(yùn)行穩(wěn)定性和運(yùn)行成本等進(jìn)行了研究。O3BAC工藝對(duì)PH的降低有效果，會(huì)使水體酸度略有上升，約能降低PH值0％38左右；約能降低渾濁度0441左右；約能降低耗氧量（CODMN）168681；約能降低氨氮含量115100左右；約能降低總有機(jī)碳含量17367左右；約能降低三氯甲烷的生成量154708左右；約能降低三鹵甲烷的生成量0544左右；約能降低二氯一溴甲烷的生成量0500左右。通過(guò)配制苯酚水作為原水，模擬實(shí)驗(yàn)水質(zhì)突發(fā)污染情況傳統(tǒng)工藝和臭氧生物活性炭工藝出水水質(zhì)對(duì)比，可以發(fā)現(xiàn)，傳統(tǒng)工藝對(duì)于高濃度苯酚水的去除率非常低，而臭氧生物活性炭工藝對(duì)于高濃度苯酚水的去除效果接近于100。并利用SEM觀察活性炭表觀狀態(tài)，以及分析HPC、放線菌、TB、生物量、顆粒計(jì)數(shù)、藻細(xì)胞等，來(lái)判斷臭氧生物活性炭濾池運(yùn)行的穩(wěn)定性。同時(shí)通過(guò)分析工程建成以來(lái)的運(yùn)行情況，初步核算了該工藝的運(yùn)行成本。研究顯示，臭氧生物活性炭工藝適用于以長(zhǎng)江（鎮(zhèn)江段）為水源的飲用水廠的深度處理，該工藝對(duì)鎮(zhèn)江飲用水廠水質(zhì)安全保障十分有效；對(duì)沿長(zhǎng)江其他類似飲用水廠的深度處理工藝的選擇具有參考價(jià)值。

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簡(jiǎn)介：目的探討應(yīng)用HFB40型旋轉(zhuǎn)式生物反應(yīng)器對(duì)構(gòu)建組織工程軟骨的影響。方法無(wú)菌條件下解剖分離35天齡胎兔四肢關(guān)節(jié)軟骨，將軟骨片剪碎至約1MM3大小，再用025％的胰蛋白酶和02％的Ⅱ型膠原酶依次消化后獲取軟骨細(xì)胞。體外擴(kuò)增至第2代后，收集細(xì)胞并調(diào)整細(xì)胞濃度至4107ML，將所得軟骨細(xì)胞接種于1MM4MM4MM大小長(zhǎng)方體聚乳酸聚羥基乙酸聚合物PLGA支架上，培養(yǎng)一周后，隨機(jī)分成A、B兩組，每組10個(gè)支架。A組為實(shí)驗(yàn)組，培養(yǎng)于生物反應(yīng)器內(nèi)；B組為對(duì)照組，培養(yǎng)于普通培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)。A組生物反應(yīng)器轉(zhuǎn)速維持在1530轉(zhuǎn)分鐘，保持軟骨細(xì)胞廣PLGA支架復(fù)合物在震蕩環(huán)境下保持懸浮狀態(tài)，每23天換液50％60％；B組軟骨細(xì)胞PLGA支架復(fù)合物在靜止的培養(yǎng)瓶培養(yǎng)。A、B兩組連續(xù)培養(yǎng)4周。4周后采用HE染色法觀察組織工程軟骨細(xì)胞增殖及分布；甲苯胺藍(lán)染色觀察軟骨細(xì)胞硫酸糖氨多糖GAG的分泌和分布；Ⅱ型膠原免疫組織化學(xué)染色觀察軟骨細(xì)胞Ⅱ型膠原分泌和分布，并用IMAGEPROPLUS圖象分析系統(tǒng)對(duì)Ⅱ型膠原免疫組織化學(xué)染色切片行Ⅱ型膠原半定量分析；并用1，9二甲基亞甲藍(lán)法和小牛胸腺DNA法定量檢測(cè)軟骨細(xì)胞PLGA支架復(fù)合物的GAG和DNA含量。結(jié)論應(yīng)用HFB40型旋轉(zhuǎn)式生物反應(yīng)器，能夠提供更加有利于軟骨細(xì)胞在PLGA中生長(zhǎng)的外部環(huán)境，促進(jìn)軟骨細(xì)胞增殖，并增加Ⅱ型膠原、GAG等細(xì)胞外基質(zhì)的合成，更有利于組織工程軟骨的形成。

簡(jiǎn)介：分類號(hào)密級(jí)LILLLLIIIIIIILLLILLIY3333557單位代碼_10300學(xué)號(hào)20152284789而矛窿垂二紀(jì)多學(xué)碩士學(xué)位論文生物燃料工程工藝技術(shù)翻譯中標(biāo)點(diǎn)符號(hào)的語(yǔ)義功能SEMANTICFUNCTIONSOFPUNCTUATIONMARKSINTHETRANSLATIONOFBIOFELSENGINEERINGPROCESSTECHNOLOGY專業(yè)名稱麴豎亟二O一七年六月獨(dú)創(chuàng)性聲明本人聲明所呈交的論文是我個(gè)人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果。本論文除了文中特別加以標(biāo)注和致謝的內(nèi)容外，不包含其他人或其他機(jī)構(gòu)已經(jīng)發(fā)表或撰寫(xiě)過(guò)的研究成果，也不包含為獲得南京信息工程大學(xué)或其他教育機(jī)構(gòu)的學(xué)位或證書(shū)而使用過(guò)的材料。其他同志對(duì)本研究所做的貢獻(xiàn)均已在論文中作了聲明并表示謝意。學(xué)位論文作者簽名手_啦簽字日期246絲關(guān)于論文使用授權(quán)的說(shuō)明南京信息工程大學(xué)、國(guó)家圖書(shū)館、中國(guó)學(xué)術(shù)期刊光盤版雜志社、中國(guó)科學(xué)技術(shù)信息研究所的中國(guó)學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù)有權(quán)保留本人所送交學(xué)位論文的復(fù)印件和電子文檔，可以采用影印、縮印或其他復(fù)制手段保存論文，并通過(guò)網(wǎng)絡(luò)向社會(huì)提供信息服務(wù)。本人電子文檔的內(nèi)容和紙質(zhì)論文的內(nèi)容相一致。除在保密期內(nèi)的保密論文外，允許論文被查閱和借閱，可以公布包括刊登論文的全部或部分內(nèi)容。論文的公布包括刊登授權(quán)南京信息工程大學(xué)研究生院辦理。口公開(kāi)口保密年月保密的學(xué)位論文在解密后應(yīng)遵守此協(xié)議學(xué)位論文作者簽名指導(dǎo)教師簽名簽字日期五叢≯址簽字日期釜2。F。丕

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簡(jiǎn)介：浙江工業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文THESISSUBMITTEDTOZHEJIANGUNIVERSITYOFTECHNOLOGYFORTHEDEGREEOFMASTEROFENGINEERINGSTUDYONSUBM哐RGEDⅣEMBRANEREACTOROFA／OPROCESSFORTHETREAR】ⅥENTOFDOMESTICWASTEⅥ餡皿RANDPROJECTAPPLICATIONWRITTENBYZHANGCHUANZHENGMAJORINGINENVIRONMENTALENGINEERINGSUPERVISEDBYPROFESSORSONGSHUANGASSISTANTPROFESSORHEZHIQIAOCOLLEGEOFBIOLOGICALENVIRONMENTALENGINEERING，ZHEJIANGUNIVERSITYOFTECHNOLOGY310032，PRCHINAAPRIL，2011浙江工業(yè)大學(xué)學(xué)位論文原創(chuàng)性聲明IILLLLILLLLLLLLILLLIIIY1958368本人鄭重聲明所提交的學(xué)位論文是本人在導(dǎo)師的指導(dǎo)下，獨(dú)立進(jìn)行研究工作所取得的研究成果。除文中已經(jīng)加以標(biāo)注引用的內(nèi)容外，本論文不包含其他個(gè)人或集體己經(jīng)發(fā)表或撰寫(xiě)過(guò)的研究成果，也不含為獲得浙江工業(yè)大學(xué)或其它教育機(jī)構(gòu)的學(xué)位證書(shū)而使用過(guò)的材料。對(duì)本文的研究作出重要貢獻(xiàn)的個(gè)人和集體，均己在文中以明確方式標(biāo)明。本人承擔(dān)本聲明的法律責(zé)任。作者簽名努侈診日期硼／年石月多ET學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書(shū)本學(xué)位論文作者完全了解學(xué)校有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定，同意學(xué)校保留并向國(guó)家有關(guān)部門或機(jī)構(gòu)送交論文的復(fù)印件和電子版，允許論文被查閱和借閱。本人授權(quán)浙江工業(yè)大學(xué)可以將本學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行檢索，可以采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存和匯編本學(xué)位論文。本學(xué)位論文屬于1、保密口，在年解密后適用本授權(quán)書(shū)。2、不保密口。請(qǐng)?jiān)谝陨舷鄳?yīng)方框內(nèi)打“寸’作者簽名旁仁移篦L日期糾／年翩簽強(qiáng)日玨JC年6只毛其弓日日

簡(jiǎn)介：目的設(shè)計(jì)制作組織工程軟骨培育系統(tǒng)，體外周期性壓應(yīng)力條件下，以原代軟骨細(xì)胞和脫鈣骨基質(zhì)DBM材料構(gòu)建組織工程軟骨，初步觀察間歇性周期壓應(yīng)力對(duì)軟骨的增殖和分化影響，為智能化仿生組織工程培育系統(tǒng)的改進(jìn)積累實(shí)驗(yàn)依據(jù)。方法1設(shè)計(jì)制作組織工程軟骨培育系統(tǒng)，包括整機(jī)，軟骨培養(yǎng)室，施力裝置和伸縮泵。2酶消化法分離獲得軟骨細(xì)胞，倒置顯微鏡和甲苯胺藍(lán)以及番紅O染色觀察細(xì)胞形態(tài)；參照URIST文獻(xiàn)中報(bào)道的改良方法自制脫鈣骨基質(zhì)DBM材料，掃描電鏡觀察自制的脫鈣骨基質(zhì)結(jié)構(gòu)表面及接種細(xì)胞后細(xì)胞生長(zhǎng)情況。3軟骨細(xì)胞和脫鈣骨基質(zhì)材料DBM復(fù)合構(gòu)建組織工程化軟骨組織，分別在動(dòng)態(tài)周期性應(yīng)力和靜態(tài)條件下培養(yǎng)，取實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組樣品進(jìn)行如下檢測(cè)。常規(guī)石蠟切片，HE和甲苯胺藍(lán)染色、番紅O染色，Ⅱ型膠原免疫組化染色光鏡下比較觀察靜態(tài)和動(dòng)態(tài)周期性應(yīng)力條件下培養(yǎng)的組織工程軟骨組織學(xué)差異；收集培養(yǎng)1、3、710和13天的標(biāo)本，按MTT試劑盒說(shuō)明加樣，酶聯(lián)免疫儀490NM檢測(cè)OD值，估計(jì)各組標(biāo)本中細(xì)胞的相對(duì)數(shù)，以評(píng)價(jià)周期性動(dòng)態(tài)應(yīng)力對(duì)軟骨細(xì)胞的增殖的影響；取培養(yǎng)5天的標(biāo)本，流式細(xì)胞儀檢測(cè)實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組結(jié)構(gòu)細(xì)胞周期各時(shí)期細(xì)胞的百分比，G2和S期細(xì)胞的百分比之和代表細(xì)胞的增殖率，以評(píng)價(jià)應(yīng)力對(duì)細(xì)胞周期的影響；4取兔原代關(guān)節(jié)透明軟骨的軟骨細(xì)胞與DBM材料復(fù)合后培養(yǎng)，分為靜止培養(yǎng)組和予以壓應(yīng)力刺激組，五天后植入兔膝關(guān)節(jié)軟骨缺損模型中。選用健康日本大耳白兔15只制造單側(cè)膝關(guān)節(jié)軟骨缺損將實(shí)驗(yàn)兔分為三組壓應(yīng)力培養(yǎng)的軟骨細(xì)胞支架材料復(fù)合物修復(fù)組實(shí)驗(yàn)組；靜止培養(yǎng)的軟骨細(xì)胞支架材料復(fù)合物修復(fù)組實(shí)驗(yàn)對(duì)照組及空白缺損對(duì)照組。于術(shù)后8周處死動(dòng)物取材對(duì)修復(fù)組織進(jìn)行大體、組織學(xué)觀察。結(jié)果1制作的組織工程培養(yǎng)系統(tǒng)及配套設(shè)備能夠?qū)崿F(xiàn)自動(dòng)化、無(wú)菌、精確壓力刺激等試驗(yàn)要求。2脫鈣骨基質(zhì)DBM呈白色，HE染色未見(jiàn)細(xì)胞核等細(xì)胞碎片殘留，結(jié)構(gòu)疏松而多孔；掃描電鏡觀察，DBM呈多孔性結(jié)構(gòu)，孔隙直徑為400～600ΜM，孔隙率為75％±10％；軟骨細(xì)胞在脫鈣骨基質(zhì)材料上黏附、伸展、生長(zhǎng)良好，可見(jiàn)細(xì)胞分泌的胞外基質(zhì)。3采用凝膠雙相接種法2構(gòu)建種子細(xì)胞支架材料復(fù)合物，細(xì)胞支架結(jié)構(gòu)培養(yǎng)2周后，表面可見(jiàn)透明軟骨組織，較光滑；石蠟切片HE染色、甲苯胺藍(lán)染色、番紅O染色以及二型膠原免疫組化染色，光鏡下，動(dòng)態(tài)周期性應(yīng)力條件下培養(yǎng)的細(xì)胞支架結(jié)構(gòu)與對(duì)照組比較細(xì)胞密度較大，細(xì)胞與支架結(jié)合緊密，有部分細(xì)胞已長(zhǎng)入支架深層，且分布較均勻。MTT檢測(cè)發(fā)現(xiàn)各時(shí)相點(diǎn)，除培養(yǎng)第1天各組細(xì)胞增殖無(wú)明顯差異，其余各時(shí)相點(diǎn)，各實(shí)驗(yàn)組的細(xì)胞增殖明顯快于對(duì)照組P＜005，各實(shí)驗(yàn)組壓縮幅度均可刺激細(xì)胞增殖，尤以壓縮幅度為10％組最顯著，細(xì)胞生長(zhǎng)曲線前移，增殖高峰期延長(zhǎng)，峰值增高；各實(shí)驗(yàn)組壓縮幅度也可刺激細(xì)胞增殖，以10％幅度組最明顯。在培養(yǎng)期內(nèi)，各組細(xì)胞生長(zhǎng)曲線變化趨勢(shì)相同，在培養(yǎng)3天～10天細(xì)胞增殖明顯。壓應(yīng)力刺激使G1期細(xì)胞明顯減少P＜005，同時(shí)G2期和S期細(xì)胞顯著增加P＜005，壓應(yīng)力刺激可顯著增強(qiáng)軟骨細(xì)胞GAG表達(dá)，在相同頻率下，10％壓縮幅度對(duì)GAG含量的刺激作用最強(qiáng)；，對(duì)照組與各實(shí)驗(yàn)組GAG含量著差別P＜005。4動(dòng)物實(shí)驗(yàn)結(jié)果大體觀察術(shù)后8周實(shí)驗(yàn)組應(yīng)力刺激組缺損修復(fù)區(qū)組織與周圍關(guān)節(jié)軟骨相整合軟骨缺損區(qū)被光滑白色半透明的組織覆蓋同周圍其他軟骨組織外形差異較小。靜止培養(yǎng)細(xì)胞DBM復(fù)合物修復(fù)組的缺損區(qū)修復(fù)組織與周圍軟骨部分整合在一起有一部分似軟骨樣修復(fù)，光澤不如實(shí)驗(yàn)組及周圍正常組織；空白對(duì)照組缺損處修復(fù)較差凹凸不平，無(wú)光澤與周圍正常軟骨組織有較為明顯的不同。結(jié)論1設(shè)計(jì)制作的智能化組織工程培育裝置能夠滿足自動(dòng)化培養(yǎng)，同時(shí)精確施加壓應(yīng)力刺激；2脫鈣骨基質(zhì)DBM適于作為組織工程軟骨在應(yīng)力條件下培育的支架材料自制的DBM具有良好的親水性、對(duì)軟骨細(xì)胞無(wú)毒性、在壓縮應(yīng)力條件下與軟骨細(xì)胞復(fù)合培養(yǎng)最長(zhǎng)達(dá)2周，無(wú)支架斷裂，破碎的情況發(fā)生；3體外壓應(yīng)力能有效促進(jìn)軟骨細(xì)胞增殖應(yīng)力對(duì)細(xì)胞增殖作用可能與應(yīng)力增加G2和S期細(xì)胞比例，促進(jìn)營(yíng)養(yǎng)成分進(jìn)入支架材料內(nèi)部有關(guān)；4體外壓應(yīng)力可以增加軟骨細(xì)胞GAG分泌，其機(jī)制可能與促進(jìn)細(xì)胞增殖有關(guān)；505HZ10％的應(yīng)力可能更有效地促進(jìn)細(xì)胞增殖，有希望獲得接近于正常軟骨組織的替代物。根據(jù)組織工程原理原代軟骨細(xì)胞復(fù)合支架材料修復(fù)全層關(guān)節(jié)軟骨缺損是具有可行性的。

簡(jiǎn)介：經(jīng)過(guò)幾十年的探索和研究，生物材料已成為具有眾多優(yōu)良特性的新型材料，但合成生物材料仍無(wú)法完全替代天然組織的所有功能，因此組織工程成為修復(fù)組織和器官損失或缺損的理想方式。本研究選用生物活性玻璃（45S5和58S）和絲素蛋白這兩種生物材料，制備成生物活性玻璃絲素蛋白膜復(fù)合材料，通過(guò)一系列體外實(shí)驗(yàn)研究了這一復(fù)合膜材料的生物學(xué)特性。首先，通過(guò)接觸角實(shí)驗(yàn)和傅里葉紅外光譜儀檢測(cè)膜材料發(fā)現(xiàn)，純絲素蛋白膜是一種介于親水和疏水之間的材料，加入生物活性玻璃之后的復(fù)合膜親水性增加；復(fù)合膜材料在完全細(xì)胞培養(yǎng)液中浸泡24小時(shí)后，有磷灰石晶體成分在表面形成。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表示，生物活性玻璃絲素蛋白復(fù)合膜材料具有適度的親水性，既能作為載體又能釋放出礦物離子作為活性物質(zhì)起到體外礦化作用。其次，我們將人牙髓干細(xì)胞接種于膜材料表面，用掃描電鏡和熒光染色觀察人牙髓干細(xì)胞在膜材料表面的粘附和生長(zhǎng)狀態(tài)；用CCK8法分別在體外連續(xù)培養(yǎng)第4、7、11、14天檢測(cè)人牙髓干細(xì)胞在膜表面的增殖能力；7、14、21天通過(guò)堿性磷酸酶活性試驗(yàn)評(píng)估人牙髓干細(xì)胞分化潛能，用REALTIMEPCR檢測(cè)人牙髓干細(xì)胞向成牙本質(zhì)細(xì)胞方向分化特異性基因表達(dá)水平。結(jié)果表明人牙髓干細(xì)胞在膜材料上均黏附生長(zhǎng)良好；在第4天時(shí)，生物活性玻璃絲素蛋白復(fù)合膜材料上細(xì)胞增殖受到抑制，第7天后細(xì)胞開(kāi)始增殖；從第7天起生物活性玻璃絲素蛋白復(fù)合膜上的人牙髓干細(xì)胞檢測(cè)到堿性磷酸酶活性，并且人牙髓干細(xì)胞組細(xì)胞的堿性磷酸酶活性和成牙本質(zhì)細(xì)胞方向分化特異性基因表達(dá)水平均較純絲素蛋白膜組和對(duì)照組的顯著上調(diào)，這種顯著差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。本研究選用的45S5和58S兩種生物活性玻璃都具有良好的生物相容性和生物活性（即促進(jìn)細(xì)胞的分化），最后本實(shí)驗(yàn)比較了45S5SF復(fù)合膜和58SSF復(fù)合膜對(duì)牙髓干細(xì)胞的增殖和分化的作用。結(jié)果顯示58SSF復(fù)合膜具有更顯著的生物學(xué)活性，這種顯著差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。