簡介：肝移植是目前發(fā)生肝功能衰竭病人的最好治療途徑，但是由于受到器官短缺的限制，且醫(yī)療費用高昂，需要終身抑制免疫功能，因此肝移植難以受惠于更多肝病患者。基于干細胞和生物材料在器官再生方面的迅速發(fā)展，尋找合適的生物材料編織成一種可支撐干細胞的支架是目前肝臟組織工程學需解決的科學問題。HCCS的合成基于膠原蛋白和殼聚糖的交聯(lián)作用，聯(lián)合HGF后進一步分析材料學綜合特性。AFP，ALB和HNF4A基因表達量用于分析BMSCS的分化情況PERIODICSCHIFF染色用于評估糖原合成CK18和ALB的免疫熒光檢測評估干細胞分化程度。本實驗進一步開展了搭載HGF的HCCS聯(lián)合BMSCS動物體內(nèi)移植實驗。觀察了移植組織CK18免疫組化和CK19免疫熒光。檢測術(shù)后兩周移植組織ALB，CYP2C9及UGT2的含量。第二部分實驗中利用3D生物打印機編織了一種3D肝實質(zhì)細胞水凝膠支架進行肝臟組織工程學研究。3D水凝膠在體外實驗中被檢測到具有良好的生物相容性。在SD大鼠體內(nèi)開展移植實驗，對照組，水凝膠組，水凝膠HL7702細胞和水凝膠HGF分別被植入行可致死量的34大部分肝臟切除后的大鼠肝臟內(nèi)。術(shù)后1天、5天、10天檢測不同組別大鼠血清ALT，ALB，AST及總膽紅素含量，進行移植組織中CYP1A2，CYP2C9，AGST和UGT2含量進行比較。2周后觀察移植組織形態(tài)。移植組織取材后行HE染色，免疫組化CK18和CKIT進行觀察比較。比較各組大鼠生存曲線變化情況。第三部分實驗中利用3D生物打印機編織了一種3D分化的骨髓間充質(zhì)干細胞水凝膠支架進行肝臟組織工程學研究。利用3D生物打印技術(shù)在三維環(huán)境下規(guī)則種植和培養(yǎng)分化骨髓間充質(zhì)干細胞，在水凝膠的幫助下在體外形成類似肝臟三維結(jié)構(gòu)形態(tài)，可持續(xù)發(fā)揮肝臟所特有的功能。QPCR用于檢測干細胞分化后ALB，HNF4A和AFP的表達PERIODICSCHIFF染色用于評價干細胞分化后糖原的合成CK18免疫熒光染色觀察細胞分化程度。MTT評價水凝膠3D生物打印后的生物相容性。在3天、7天和10天檢測打印組織的體外合成GST，ALB和CYP2C9水平。最后將3D打印組織進行SD大鼠皮下移植進行體內(nèi)實驗。分別在2周和4周定量檢測移植組織中ALB，CYP2C9和GST的含量。分別在2周和4周檢測不同組別中的ALB、AFP和HNF4A的MRNA表達量。各組移植組織在2周和4周分別取材后行免疫組化CK18和CKIT進行觀察比較。傅立葉紅外光譜，熱重分析，降解速率測定，力學分析和溶脹分析結(jié)果表明本實驗所用的合成材料性能良好。干細胞分化后AFP，ALB和HNF4A的MRNA表達量顯著增高，糖原合成顯著增多，CK18表達顯著增強。移植組織切片在偏振光顯微鏡下觀察到有新生組織，CK19免疫組化、CK18免疫熒光表達陽性。ALB，CYP2C9和UGT2的含量在搭載干細胞組中表達顯著增多。3D生物打印細胞水凝膠支架并不影響細胞的活力。植入3D打印肝臟組織后，血清ALT，ALB，AST及總膽紅素，移植組織中CYP1A2，CYP2C9，AGST和UGT2的水平發(fā)生顯著改善P＜005。移植組織的HE染色，免疫組化CK18和CKIT進行觀察發(fā)現(xiàn)3D打印組可形成形態(tài)規(guī)則，結(jié)構(gòu)清晰可見的肝臟微單元。各組大鼠的生存曲線比較發(fā)現(xiàn)3D打印組的中位生存期要好于其余各組且有統(tǒng)計學差異P＜005）。骨髓間充質(zhì)干細胞分化培養(yǎng)后ALB、HNF4A和AFP的MRNA表達量變化顯著改變，具有統(tǒng)計學差異P＜005）。分化后CK18表達陽性，PSA染色陽性。三維打印與二維培養(yǎng)、混合培養(yǎng)的生物相容性比較無統(tǒng)計學差異。3D打印后ALB、GST和CYP2C9的含量在植入3天，7天和10天明顯改善P＜005。經(jīng)3D打印后再生的肝臟微單元形態(tài)規(guī)則，結(jié)構(gòu)清晰可見。移植組織中ALB、AFP和HNF4A的MRNA表達量明顯改善。體內(nèi)實驗結(jié)果3D打印組的ALB、GST和CYP2C9的含量在2周及4周與對照組相比明顯改善P＜005。搭載肝細胞生長因子的膠原殼聚糖支架聯(lián)合骨髓間充質(zhì)干細胞在體內(nèi)移植后形態(tài)規(guī)則，結(jié)構(gòu)完整，可持續(xù)穩(wěn)定發(fā)揮肝臟特殊功能。3D生物打印肝實質(zhì)細胞及分化的骨髓間充質(zhì)干細胞可重建肝臟類似組織，是具有潛力的一種肝臟再生方式并且具有巨大的潛力改善肝功能以及用于肝臟體外疾病模型的研究。

簡介：上海交通大學工程碩士論文上海交通大學工程碩士專業(yè)學位論文上海交通大學工程碩士專業(yè)學位論文以生物工程實踐活動為載體培養(yǎng)中學生創(chuàng)新實踐能力以生物工程實踐活動為載體培養(yǎng)中學生創(chuàng)新實踐能力學校校上海交通大學上海交通大學院系系生命科學技術(shù)學院生命科學技術(shù)學院班級級生物工程生物工程學號號1100802011工程碩士生余穎湞工程碩士生余穎湞工程領(lǐng)域工程領(lǐng)域生物工程生物工程導師Ⅰ師Ⅰ彭華松彭華松導師Ⅱ師Ⅱ姜雅風姜雅風上海交通大學生命科學技術(shù)學院上海交通大學生命科學技術(shù)學院2012年10月8日上海交通大學工程碩士論文上海交通大學上海交通大學學位論文版權(quán)使用授權(quán)書學位論文版權(quán)使用授權(quán)書本學位論文作者完全了解學校有關(guān)保留、使用學位論文的規(guī)定，同意學校保留并向國家有關(guān)部門或機構(gòu)送交論文的復印件和電子版，允許論文被查閱和借閱。本人授權(quán)上海交通大學可以將本學位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫進行檢索，可以采用影印、縮印或掃描等復制手段保存和匯編本學位論文。保密保密□，在年解密后適用本授權(quán)書。本學位論文屬于不保密不保密□。（請在以上方框內(nèi)打“√”）學位論文作者簽名指導教師簽名日期年月日日期年月日

簡介：分類號UDCD9121342學位論文生物基因工程技術(shù)行政規(guī)制的立法研究作者姓名指導教師申請學位級別學科專業(yè)名稱論文提交日期學位授予日期評閱人張立志楊麗娟副教授東北大學文法學院碩上學科類別法學憲法學與行政法學2011年6月論文答辯日期2011年6月2011年7月答辯委員會主席楊玉凱包秋玉、顧海波東北大學2011年6月獨創(chuàng)性聲明本人聲明，所呈交的學位論文是在導師的指導下完成的。論文中取得的研究成果除加以標注和致謝的地方外，不包含其他人己經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果，也不包括本人為獲得其他學位而使用過的材料。與我一同工作的同志對本研究所做的任何貢獻均己在論文中作J，明確的說明并表示謝也J冒、O學位論文作者簽名日期學位論文版權(quán)使用授權(quán)本學位論文作者和指導教師完全了解東北大學有關(guān)保留、使用學位論文的規(guī)定即學校有權(quán)保留并向國家有關(guān)部門或機構(gòu)送交論文的復印件和磁盤，允許論文被查閱和借閱。本人同意東北大學可以將學位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫進行檢索、交流。作者和導師同意網(wǎng)上交流的時間為作者獲得學位后半年口一年口一年半口兩學位論文作者簽名簽字日期矽／／導師簽名簽字日期ⅥF『I6∥7礙1F

簡介：8RLLLLIIIIIIIILLIIILY3278239多乏京倆和醋學院中國醬琢甜芬既博士研究生學位論文北京協(xié)和醫(yī)學院研究生院中國醫(yī)學科學院北京協(xié)和醫(yī)學院博士研究生學位論文目錄摘要2ABSTRACT4第一部分生物工程化人唾液腺類器官構(gòu)建的實驗研究7前言7日U舌J7第一章生物工程化人唾液腺類器官的體外重構(gòu)101實驗組織和細胞102實驗試劑與耗材103主要儀器124實驗方法125數(shù)據(jù)統(tǒng)計196實驗結(jié)果197討論22第一部分第一章附錄26第二章生物工程化人唾液腺類器官構(gòu)建的體內(nèi)研究一481實驗組織、細胞和實驗動物482實驗試劑483實驗儀器484實驗方法485實驗結(jié)果506討侖51第一部分第二章附圖54第一部分總結(jié)63第一部分參考文獻64綜述72唾液腺調(diào)控信號通路的相關(guān)研究72綜述參考文獻77第二部分絲線結(jié)扎延遲一新型有效的皮瓣外科延遲技術(shù)81摘要81ABSTRACT82前言831患者和方法832結(jié)果863典型病例864討念885結(jié)侖89第二部分參考文獻90縮略詞92致謝94獨創(chuàng)性聲明一95第1頁

簡介：研究背景細胞是生命結(jié)構(gòu)和功能的基本單位，生物打印技術(shù)將細胞作為生物墨水打印構(gòu)建組織和器官，標志著3D打印技術(shù)與生命科學的真正融合。與通常3D打印技術(shù)強調(diào)產(chǎn)品的制造精度和機械強度不同，生物打印技術(shù)更多的考慮的是細胞生物學表現(xiàn)。生物打印平臺的構(gòu)建、打印方案的設(shè)計和打印后產(chǎn)品的評價都圍繞著細胞展開。由于生命科學極端復雜、多變，人類對細胞的理解十分粗淺，有太多的未知等待著探索，即使在科技發(fā)展日新月異的今天，生物打印技術(shù)仍然處在萌芽階段，現(xiàn)階段生物打印技術(shù)的研發(fā)與應用仍然屬于概念驗證，距離實現(xiàn)具備生理功能的組織、器官的人工打印再造的目標仍有很長的路要走。生物打印平臺的建立是實現(xiàn)生物制造的必要條件，亦是生物打印領(lǐng)域內(nèi)面臨諸多挑戰(zhàn)之一。生物打印機絕不是簡簡單單堆砌細胞和生物材料的裝置，打印平臺的建立代表了細胞生物學、生物材料學、自動控制、信息學等諸多學科高水平交叉綜合應用的實力，體現(xiàn)了對生物打印核心技術(shù)的掌握。目前生物打印平臺的搭建技術(shù)并不成熟，根據(jù)打印的細胞、生物材料以及打印的目的不同，生物打印平臺構(gòu)建形式也多種多樣。世界上僅有少數(shù)幾個發(fā)達國家有能力開發(fā)商品化細胞生物打印機，雖然這種生物打印機具有產(chǎn)品集成化程度高，操作簡便等優(yōu)點，但由于打印材料有限，打印平臺軟硬件受專利保護，無法根據(jù)打印實際需要進行參數(shù)修改和軟硬件升級、優(yōu)化，商品化細胞生物打印機并未得到廣泛應用。關(guān)節(jié)軟骨由軟骨細胞和細胞外基質(zhì)構(gòu)成，沒有血管、神經(jīng)和淋巴，幾乎沒有自我修復能力。一旦發(fā)生軟骨損傷往往導致關(guān)節(jié)功能不可逆損害，最終引起骨關(guān)節(jié)炎發(fā)生，嚴重影響生活質(zhì)量。軟骨損傷修復尚無理想的治療手段，軟骨組織工程聯(lián)合應用生命科學和工程制造的方法人工合成軟骨組織，是當前最有希望解決軟骨缺損修復困境的方法。分層構(gòu)建組織工程軟骨是軟骨組織工程領(lǐng)域內(nèi)的研究熱點，強調(diào)從結(jié)構(gòu)和功能上模擬天然軟骨分層變化的規(guī)律。在哺乳動物關(guān)節(jié)軟骨組織中，都存在著軟骨細胞密度由軟骨淺層至深層成梯度下降的分布規(guī)律，這是關(guān)節(jié)軟骨發(fā)育和力學環(huán)境共同作用的結(jié)果，是關(guān)節(jié)軟骨重要的分層結(jié)構(gòu)特點之一。復習文獻，國內(nèi)外尚無研究關(guān)注構(gòu)建具備仿生軟骨細胞密度梯度分布規(guī)律的組織工程軟骨。本研究期望自主建立擠壓式水凝膠細胞生物打印機驗證平臺，初步掌握3D生物打印核心技術(shù)，嘗試通過生物打印技術(shù)構(gòu)建具備仿生軟骨細胞密度梯度分布的組織工程軟骨，驗證生物打印技術(shù)在軟骨組織工程中的應用，觀察軟骨細胞密度梯度分布生物學作用，探索一種分層構(gòu)建組織工程軟骨的新策略。方法本研究利用開源軟硬件資料嘗試自主搭建擠壓式水凝膠生物打印驗證平臺，硬件系統(tǒng)包括PRUSAI3三維打印機移動系統(tǒng)，數(shù)控微量凝膠擠壓系統(tǒng)；軟件應用包括三維電腦輔助設(shè)計軟件（CAD軟件）SOLIDWKS、切片軟件SLIC3R、打印機上位控制軟件REPETIERHOST；選用3ML螺旋接口注射器作為水凝膠容器（生物打印墨水墨盒），25＃平頭針頭作為擠壓成型噴頭，10％豬膝關(guān)節(jié)軟骨II型膠原蛋白鹽酸（015M）水溶膠作為打印墨水；安裝PRUSAI3三維打印機移動系統(tǒng)和數(shù)控微量凝膠擠壓系統(tǒng)構(gòu)成擠壓式水凝膠生物打印驗證平臺，使用SOLIDWKS軟件設(shè)計三維實體模型，在切片軟件SLIC3R中設(shè)置打印層厚、打印條帶走形方向及打印速度等參數(shù)，分割三維實體模型生成連續(xù)的二維輪廓，生物打印機在生成的GCODE代碼文件控制下完成水凝膠打印，打印成型的II型膠原溶膠塊置于37℃孵箱內(nèi)30分鐘完成交聯(lián)；本研究通過生物打印技術(shù)構(gòu)建具備仿生軟骨細胞密度梯度分布的組織工程軟骨，實驗參考正常成人膝關(guān)節(jié)股骨髁軟骨中軟骨細胞總體密度約為1107CELLML，關(guān)節(jié)軟骨淺、中、深三層細胞密度之比約321，使用復合不同軟骨細胞密度的10II型膠原蛋白水溶膠作為生物墨水，設(shè)計A組（細胞總體密度約為2107CELLML）、B組（細胞總體密度約為1107CELLML）、C組（細胞總體密度約為05107CELLML）三組組織工程軟骨，每組分別構(gòu)建具有仿生軟骨細胞密度梯度分布和細胞均勻分布的兩類細胞分布形式組織工程軟骨，體外培養(yǎng)，分別于第0、1、2、3周取材，進行細胞學、生化、組織學等相關(guān)檢測，對比分析仿生軟骨細胞密度梯度分布和細胞均勻分布的兩類組織工程軟骨，驗證生物打印技術(shù)，觀察仿生細胞密度梯度分布的生物學意義。結(jié)果擠壓式水凝膠生物3D打印驗證平臺得到初步建立，擠壓頭與三維運動系統(tǒng)匹配，系統(tǒng)運行平穩(wěn)，打印過程全程可控，通過優(yōu)化打印參數(shù)，3D細胞生物打印過程對細胞活性無明顯影響；擠壓式水凝膠生物3D打印平臺能夠?qū)崿F(xiàn)仿生軟骨細胞密度梯度分布組織工程軟骨模型的構(gòu)建，組織工程軟骨體外培養(yǎng)3周，RTQPCR結(jié)果顯示組織工程軟骨中軟骨細胞基因COL1A1持續(xù)低水平表達且出現(xiàn)下調(diào)趨勢，基因COL2A1和ACAN表達水平隨培養(yǎng)時間延長呈上調(diào)趨勢，且具有統(tǒng)計學差異；核酸定量法測定組織工程軟骨細胞總量結(jié)果顯示各時間點A、B、C三組中兩類組織工程軟骨（細胞均勻分布組織塊與細胞梯度分布組織塊）細胞總量無統(tǒng)計差異，隨培養(yǎng)時間延長各組組織工程軟骨細胞總量均出現(xiàn)無統(tǒng)計學意義的下降趨勢；組織工程軟骨樣本GAG定量結(jié)果顯示體外培養(yǎng)第1周，A、B、C三組GAG總量與支架中細胞總體密度呈正相關(guān)，A組GAG含量最高，C組最低；培養(yǎng)第2、3周，C組GAG總量仍然最低，A組和B組GAG含量無統(tǒng)計學差異，為評估單個細胞GAG合成活性，分別將各組GAG總量與細胞總數(shù)標準化處理，體外培養(yǎng)第1周，各組間單細胞GAG合成量無統(tǒng)計學差異，在第2、3周，A組單細胞GAG合成量最低，B組具有最高的單細胞GAG合成量，B組中兩類細胞分布組織塊單細胞GAG合成量無統(tǒng)計差異，但B組細胞密度梯度分布組織塊單細胞GAG合成量與A、C兩組有統(tǒng)計差異，培養(yǎng)第3周，B、C兩組中細胞均勻分布組織塊單細胞GAG合成量有統(tǒng)計差異；免疫組化染色及阿爾新蘭染色結(jié)果顯示免疫組化陽性染色細胞呈棕黃色，免疫組化陰性染色細胞呈藍色，GAG成分被阿爾新蘭染成藍色，組織工程軟骨中絕大多數(shù)軟骨細胞表現(xiàn)為II型膠原蛋白陽性染色，一部分軟骨細胞表現(xiàn)為PRG4陽性，只有少數(shù)軟骨細胞出現(xiàn)I型膠原陽性染色，細胞密度梯度組軟骨細胞新和成的II型膠原蛋白、PRG4和GAG成分呈現(xiàn)梯度分布規(guī)律，由淺層至深層逐漸減少。結(jié)論在熟悉并掌握生物3D打印相關(guān)基本原理和各系統(tǒng)軟硬件組成基礎(chǔ)之上，綜合應用機械自動控制技術(shù)和生命科學理論，能夠根據(jù)具體生物墨水和實際打印需要，利用開源軟硬件資料自主設(shè)計并建立擠壓式水凝膠生物打印驗證平臺，通過仿生細胞分布組織工程軟骨模型的建立，驗證了擠壓式水凝膠生物打印驗證平臺能夠?qū)崿F(xiàn)軟骨細胞在水凝膠支架中精確的空間定位，通過優(yōu)化支架中細胞種植密度和分布模式能夠提高細胞活性，研究結(jié)果表明生物打印仿生密度梯度分布組織工程軟骨是一種分層構(gòu)建組織工程軟骨的新策略。

簡介：背景當今，自體腘繩肌腱（半腱肌腱股薄肌腱）已成為前交叉韌帶（ACL）重建的標準移植物，而對于人體腘繩肌腱移植后的組織學轉(zhuǎn)歸仍然知之甚少。同時，隨著同種異體肌腱組織在ACL重建手術(shù)中的應用日益增多，越來越迫切地需要探索提高異體肌腱移植物重建效果的方案，以達到與自體肌腱移植物類似的效果。因此深入了解自體肌腱組織重建ACL后的組織學轉(zhuǎn)歸方式、影響因素及相關(guān)機制，有助于探索促進異體肌腱移植物良好轉(zhuǎn)歸的技術(shù)手段。本研究擬通過脫細胞方法制備特定酸堿度微環(huán)境的同種異體脫細胞肌腱，并且聯(lián)合自體肌腱干細胞（TDSCS），以取得理想的ACL重建效果。同時，通過對人體半腱肌腱重建ACL后的移植物樣本進行組織學分析，觀察其轉(zhuǎn)歸情況。目的1制備PH值改良的同種異體脫細胞肌腱并檢測其基本特性；2觀察PH值改良的同種異體脫細胞肌腱重建ACL的效果；3觀察PH值改良的同種異體脫細胞肌腱聯(lián)合自體TDSCS重建ACL的效果；4探討人自體半腱肌腱重建ACL后的中、長期組織學轉(zhuǎn)歸。方法1應用以胰蛋白酶TRITONX100過氧乙酸為基礎(chǔ)、輔以碳酸氫鈉中和處理，制備PH值改良的兔同種異體脫細胞半腱肌肌腱，并通過光鏡電鏡組織學檢測、力學測試、細胞相容性測試檢測其基本特性；2應用該PH值改良的同種異體脫細胞半腱肌腱重建兔ACL，與同種異體半腱肌腱移植物進行對照研究，通過組織學、力學、MICROCT等技術(shù)手段分析其重建效果；3聯(lián)合應用自體TDSCS與PH值改良的同種異體脫細胞半腱肌腱重建兔ACL，與同種異體半腱肌腱移植物進行對照研究，通過組織學、力學、MICROCT等技術(shù)手段分析其重建效果，并通過LVEGFP轉(zhuǎn)染標記技術(shù)進行細胞示蹤研究；4通過光鏡透射電鏡檢測手段，分析人自體半腱肌腱重建ACL后的組織學轉(zhuǎn)歸，進行中遠期移植物的對照研究。結(jié)果1應用胰蛋白酶TRITONX100過氧乙酸碳酸氫鈉脫細胞方案，制備得到了力學性能保留完好、細胞相容性良好、疏松多孔、PH值調(diào)定在72左右的同種異體脫細胞肌腱材料；2該脫細胞肌腱重建ACL后在以下方面優(yōu)與普通異體肌腱術(shù)后第2、4周關(guān)節(jié)腔部分及骨隧道部分細胞、血管長入；212周膠原重塑及腱骨愈合；術(shù)后12周失效載荷及剛度；術(shù)后12周隧道壁骨密度。3該脫細胞肌腱聯(lián)合自體TDSCS重建ACL后在以下方面優(yōu)與普通異體肌腱術(shù)后第2、4周關(guān)節(jié)腔部分及骨隧道部分細胞、血管長入；212周膠原重塑及腱骨愈合；術(shù)后12周失效載荷及剛度；術(shù)后4、8、12周隧道壁骨密度及8、12周BVTV；術(shù)后412周均追蹤到EGFP陽性細胞。4人半腱肌腱移植物的中長期組中均觀察到細胞化水平、血管化水平不成熟、存在組織化生狀態(tài)的情況；兩組均具有相當高比例的呈雙峰分布類型的膠原構(gòu)型及較低比例的呈單峰分布的膠原構(gòu)型。相關(guān)指標統(tǒng)計分析未見差異。結(jié)論1PH值改良的同種異體脫細胞肌腱的細胞相容性優(yōu)于改良前；2PH值改良的同種異體脫細胞肌腱重建ACL的效果優(yōu)于普通異體肌腱；3PH值改良的同種異體脫細胞肌腱聯(lián)合自體TDSCS，能進一步提高ACL重建效果；自體TDSCS可于體內(nèi)成功整合到該肌腱移植物中；4人體半腱肌腱重建的中遠期ACL移植物中，雙峰分布的膠原構(gòu)型廣泛存在，該膠原構(gòu)型接近正常的ACL。

簡介：近年來，大量肝病患者因肝癌、急性肝衰竭等疾病最終導致死亡，雖然肝移植是目前臨床治療肝癌和肝衰竭的最佳方法，但是供體器官的嚴重短缺及排斥反應限制了肝移植的發(fā)展。肝組織工程是在體外利用生物相容性良好且可降解的生物材料與具有肝功能的細胞復合，構(gòu)建具有類似肝臟功能的人工器官。由于高分子聚合物直接加工制備的支架材料具有不穩(wěn)定性，因此通過加入交聯(lián)劑，從而使其穩(wěn)定性和力學性能提高。京尼平作為天然的交聯(lián)劑具有保肝的作用；甘草酸是由于肝臟具有特異性的受體而具有肝靶向性，同時也具有肝保護作用，因此可作為交聯(lián)劑應用于肝組織工程。分別用京尼平、戊二醛和水溶性碳二亞胺EDC交聯(lián)殼聚糖明膠材料，制備得到預成型的支架材料。通過傅立葉變換紅外光譜、差示掃描量熱和掃描電子顯微鏡對支架材料進行表征分析，以評價其交聯(lián)效果并觀察其表面形貌。結(jié)果表明京尼平交聯(lián)的殼聚糖明膠支架材料相比于戊二醛和EDC交聯(lián)的支架材料，具有更高的交聯(lián)度和更合適的孔徑大小。將HEPG2細胞三維3D培養(yǎng)于京尼平、戊二醛和EDC交聯(lián)的殼聚糖明膠支架材料中，并以傳統(tǒng)的二維2D培養(yǎng)作為對照，分別進行細胞活性、生物相容性、肝功能表達試驗并觀察細胞培養(yǎng)于材料中的形態(tài)特征。結(jié)果表明，相比于傳統(tǒng)的2D培養(yǎng)，在3D培養(yǎng)中的細胞具有較強的活性，說明京尼平交聯(lián)的支架材料具有良好的生物相容性并能維持肝功能的表達。而且HEPG2細胞培養(yǎng)于1％京尼平交聯(lián)的殼聚糖明膠支架材料相比于其他支架材料組更適合細胞生長且細胞可以大量滲透到材料內(nèi)部生長，由此表明1京尼平交聯(lián)的殼聚糖明膠支架材料的孔徑可以為細胞提供較好的氧氣及營養(yǎng)物質(zhì)的交換，更適合細胞生長。制備甘草酸海藻酸鈣水凝膠，作為可注射型原位水凝膠應用于肝組織工程。通過傅立葉變換紅外光譜、差示掃描量熱、X射線衍射、掃描電子顯微鏡和流變學試驗對甘草酸海藻酸鈣水凝膠進行表征分析，以評價其水凝膠的形成機理及凝膠性能。結(jié)果表明甘草酸海藻酸鈣水凝膠通過甘草酸的螯合作用將納米碳酸鈣中的鈣離子緩慢釋放，從而與海藻酸鈉反應形成均一的具有三維網(wǎng)孔狀結(jié)構(gòu)的水凝膠，且該水凝膠具有較好的粘彈性和力學強度。將HEPG2細胞包封于不同配方的甘草酸海藻酸鈣水凝膠中3D培養(yǎng)，以2D培養(yǎng)作為對照。分別進行細胞活性、生物相容性、肝功能表達試驗并觀察細胞培養(yǎng)于水凝膠材料中的形貌特征。結(jié)果表明，相比于2D培養(yǎng)，3D包封于甘草酸海藻酸鈣水凝膠中的細胞具有較強的生物活性及良好的生物相容性，并能維持肝功能的表達。尤其以15海藻酸鈉SA03?C0307甘草酸GA配方制備的水凝膠更適合HEPG2細胞3D包封培養(yǎng)。

簡介：中南大學博士學位論文資源加工與生物工程學術(shù)信息服務(wù)系統(tǒng)的研究與構(gòu)建姓名付玉申請學位級別博士專業(yè)礦物加工工程指導教師邱冠周馮其明20080101博士學位論文中文摘要最后，本論文并對系統(tǒng)的構(gòu)建和實施過程中的關(guān)鍵過程和問題作了詳細論述。結(jié)合資源加工與生物工程學科的特點，開發(fā)出了一個完整的學術(shù)信息服務(wù)系統(tǒng)。該系統(tǒng)可以進行學術(shù)信息的錄入、增加、編輯、修改、查詢等基本處理以及文件的上傳、下載、視頻、PDF文件瀏覽等高級功能，形成了一個完整的、有學科特色的學術(shù)信息服務(wù)系統(tǒng)。通過對本系統(tǒng)的深入及有效的研究，我們可以得出如下結(jié)論1規(guī)劃、開發(fā)資源加工與生物工程學術(shù)信息服務(wù)系統(tǒng)不僅是必要的，而且是可行的。2開發(fā)可采用傳統(tǒng)的結(jié)構(gòu)化方法與現(xiàn)代面向?qū)ο笏枷胂嘟Y(jié)合的思路來實現(xiàn)。3系統(tǒng)可分為前臺和后臺兩部分，兩者在邏輯上相互獨立。4系統(tǒng)采用三層基于B／S模式，使得表示、邏輯、數(shù)據(jù)三者獨立，并且設(shè)計成中英文兩個版本。5可以將本系統(tǒng)的架構(gòu)移植到其他專業(yè)的學術(shù)信息服務(wù)系統(tǒng)，從而形成一個通用的學術(shù)信息服務(wù)系統(tǒng)。本論文的創(chuàng)新之處，一是設(shè)計并實現(xiàn)了資源加工與生物工程學術(shù)信息服務(wù)系統(tǒng)的架構(gòu)；二是提出了學術(shù)信息服務(wù)系統(tǒng)的總體擁有成本TCOTOTALCOSTOFOWNING的概念，并用它作為開發(fā)模式的依據(jù)；三是在現(xiàn)有的架構(gòu)模型的基礎(chǔ)上，抽象出了學術(shù)信息服務(wù)系統(tǒng)中英文版的通用架構(gòu)；四是提出了學術(shù)信息服務(wù)概念的內(nèi)涵，特別是將項目融資的內(nèi)容加入到其中，突出了學術(shù)領(lǐng)域中產(chǎn)、學、研的一體化的思想。關(guān)鍵詞資源加工與生物工程，學術(shù)信息服務(wù)系統(tǒng)，信息平臺，架構(gòu)設(shè)計，B／S模式II

簡介：東南大學碩士學位論文中美生物醫(yī)學工程本科培養(yǎng)方案比較研究姓名孔旭申請學位級別碩士專業(yè)高等教育學指導教師梅漢成20100109英文摘要THECOMPARATIVERESEARCHONTRAININGPLANOFBIOMEDICALENGINEERINGFORUNDERGRADUATEBETWEENCHINAANDTHEUNITEDSTATESABSTRACTBIOMEDICALENGINEERINGISALLEMERGINGANDINTERDISCIPLINARYSUBJECT．ITINTEGRATESTHETHEORIESANDTHEMETHODSOFENGINEERING,BIOLOGYANDMEDICINE．ITNOTONLYSOLVESTHEPROBLEMSOFMEDICINETOSAFEGUARDHUMANHEALTHBUTALSOPROVIDESSERVICEFORTHEPREVENTION，DIAGNOSISANDRECOVERYOFDISEASES．THISSUBJECTISONEOFTHEHIGHTECHNOLOGYTODEVELOPATPRESENTALLOVERTHEWORLDFORITHASBETHGOODSOCIALBENEFITANDGOODECONOMICBENEFITASWELLASAVERYBROADPROSPECT．THEWORDS‘BIOMEDICALENGINEEFING’FIRSTAPPEAREDINAMERICAANDAROSEINL950S．MEANWHILE．BIOMEDICALHIGHEREDUCATIONWASDEVELOPED，WHICHONBEHALFOFTHEHIGHESTLEVELOFBIOMEDICALENGINEERINGHIGHEREDUCATIONINTHEWORLDNOWADAYS．BIOMEDICALENGINEERINGEDUCATIONOBTAINEDAGREATDEVELOPMENTANDCULTIVATEDALARGEGROUPTALENTWITHABILITIESOFAPPLICATIONORCREATIVITYWHOWERENEEDEDBYSOCIETYINOURCOUNTRYTHROUGHALONGPERIODOFEXPLORATIONSINCE1970SWHENWEBEGANTOSETTHEMAJOROFBIOMEDICALENGINEERING．THISPAPERUSETHEMETHODSOFLITERATURERESEARCH，CASESTUDYANDINTERVIEWTODISCUSSHOWTOCULTIVATEPROFESSIONALCREATIVETALENTSOFHIGHLEVELUNDERNEWCIRCUMSTANCESFROMTHEVIEWOFBIOMEDICALENGINEERINGTRAININGPLANFORUNDERGRADUATE．ICONSIDERTHATASANEWSUBIECT．BIOMEDICALENGINEERINGACHIEVEDMUCHCONSIDERABLERESULTSINTHEASPECTSOFRESEARCH．INDUSTRYANDHIGHEREDUCATIONDURINGTHEPAST30YEARSINCHINA．HOWEVER,WESTILLHAVEACERTAINDISTANCECOMPAREDWITHAMERICA．IFCHINA弱ALATECOMERWHOWANTEDTOSURPASSTHEOLD．TIMERSHAVETOINCREASETHESTRENGTHOFCULTIVATINGTALENTSANDPAYMUCHARENTIONTOTHECOMBINATIONOFMEDICINEANDENGINEERING,MOREOVER,WESHOULDWORKHARDTOFOSTERINTERDISCIPLINARYTALENTSWHOHAVEEDUCATIONBACKGROUNDSOFBOMENGINEERINGSCIENCEANDLIRESCIENCE．ANTHESECALLFORCOLLEGESTOENHANCEANDADJUSTMAJORSETTING,OPTIMIZETRAININGPLAN，EXPLORETHEROADOFCULTIVATINGADVANCEDTALENTSWHOAREPROFESSIONALANDCREATIVE．IDEFINETHESPECIFICCONNOTATIONSOF‘BIOMEDICALENGINEERING”AND“TRAININGPLANFORTALENTS’’ONTHEBASISOFCONCLUDINGMANYEXPORTS’IDEAINTHEVERYBEGINNING．THENISORTOUTTHEDATAOFDEVELOPINGHISTORYANDACTUALITYABOUTBIOMEDICALENGINEERINGINBCITHAMERICAANDCHINADESCRIBETHEGENERALSITUATIONOFBIOMEDICALENGINEERINGTRAININGPLANFORUNDERGRADUATEANDTHECHARACTERSOFUNDERGRADUATEMAJORINGBIOMEDICALENGINEERINGINSOMEREPRESENTATIVECOLLEGESINBETHAMERICAANDCHINA．LATERICONCLUDETHEADVANCEDEXPERIENCESOFWHYAMERICANBIOMEDICALENGINEERINGMAJORISWELL．KNOWNTOTHEWORLDASWELLASTHEENLIGHTENMENTOFOURCOUNTRYTODEVELOPBIOMEDICALENGINEERINGFORUNDERGRADUATEEDUCATION．PROCEEDINGWITHINDIVIDUALCASESINVESTIGATIONTOBIOMEDICALENGINEERINGSCHOOLOFSOUTHEASTUNIVERSITYLSTARTWITHTHEEXPLORATIONANDPRACTICEOFBIOMEDICALENGINEERINGRAININGPLANFORTALENTSSOASTOFINDOUTMEADVANCEDEXPERIENCESANDIDEASTOSHORTENTHEDISTANCEOFBIOMEDICALENGINEERINGHIGHEREDUCATIONBETWEENSOUTHEASTUNIVERSITYANDDEVELOPEDCOUNTRIESGRADUALLYANDINORDERTOREFORMBIOMEDICALENGINEERINGUNDERGRADUATEEDUCATION．IHOPEICOULDUSETHEEXPERIERLCEOFTHESELECTEDCASETOPROMOTETHEWORKINTHEENTIREAREASOTLLATOTHERCOLLEGESWHOWANTTODEVELOPTHISMAJORFORUNDERGRADUATEEDUCATIONCOULDDRAWSOMEIDEASANDHELPSFROMTHISPAPER．KEYWORDSBIOMEDICALENGINEERING；UNDERGRADUATEEDUCATION；TRAININGPLANII

簡介：南京農(nóng)業(yè)大學碩士學位論文新農(nóng)村建設(shè)視角下農(nóng)業(yè)高職院校發(fā)展研究以鹽城生物工程高等職業(yè)技術(shù)學校為例姓名宋玉寶申請學位級別碩士專業(yè)農(nóng)業(yè)科技組織與服務(wù)指導教師夏如兵201105STUDIESONTHEDEVELOPMENTOFAGRICULTURALHIGHERVOCATIONALCOLLEGESFROMTHEPERSPECTIVEOFNEWVILLAGECONSTRUCTIONTAKEYANCHENGBIOLOGYENGINEERINGHIGHERVOCATIONALTECHNOLOGYSCHOOLFOREXAMPLEABSTRACTTHISDISSERTATIONFOCUSESONTHESPECIFICSTRATEGIESOFTHEACQUISITIONOFSELFDEVELOPMENTOFTHEINVOLVEMENTTHEAGRICULTURALHIGHERVOCATIONALCOLLEGESINTHENEWVILLAGECONSTRUCTIONBASEDONTHESTATUSQUOOFYANCHENGBIOLOGYENGINEERINGHIGHER、，0CATIONALTECHNOLOGYSCHOOLINWHICHTHEAUTHORWORKS，ITINTENDSTOCARRYOUTRELEVANTPOSITIVESTUDIESTOUNDERSTANDTHESTATUSQUOANDTHEFUTUREDEVELOPMENTDIRECTIONOFTHEAGRICULTURALHIGHERVOCATIONALCOLLEGESANDEXPLORETHESPECIFICSTRATEGIESOFTHEINV01VEMENTOFTHEAGRICULTURALHIGHERVOCATIONALCOLLEGESINTHENEWVILLAGECONSTRUCTIONPROVIDINGVALUABLESTRATEGIESANDPROPOSALSFORTHESELFREFORMOFTHEAGRICULTURALHIGHERVOCATIONALCOLLEGESANDBETTERSERVICETONEWVILLAGECONSTRUCTIONOFYANCHENGCITYTILCCONCRETEFEATURESOFTHEDEVELOPMENTOFTHEAGRICULTURALHIGHERVOCATIONALCOLLEGESOFYANCHENGCITYCALLBEDESCRIBEDASFOLLOWSTHEENROLLMENTSCALEOFTHEAGRICULTUMLHIGHERVOCATIONALCOLLEGESHASEXPERIENCEDTHELEAPFROGDEVELOPMENT；THEGLOBALLEVELOFTHETEACHINGSTAFFOFTHECOLLEGESHASBEENAPPARENTLYIMPROVED；THECONSTRUCTIONOFTHEIRSPECIALTYDISCIPLINESHASBEENFURTHERSTRENGTHENED；BESIDES，THEYAREMAKINGINCREASINGLYOUTSTANDINGCONTRIBUTIONSTOTHEECONOMICCONSTRUCTIONANDSOCL砒HOWEVERINVIEWOFTHEMOREREQUESTBROUGHTFORWARDBYTHECONSTRUCTIONOFTHENEWVILLAGECONSTRUCTIONFORTALENTS，TECHNOLOGY，CULTURE，ETCINTHEAGFICULTURALHIGHERVOCATIONALCOLIEGES，SUCHCOLLEGESINYANCHENGCITYAREFACEDWITHTHELACKOF”CHARACTERISTICS””RESPONSIBILITY”AND”QUALITY”INTHEPROCESSOFTHEIRDEVELOPMENTTHEREFORETHEAGRICULTURALHIGHERVOCATIONALCOLLEGESOFYANCHENGCITYSHOULDACTIVELYIII

簡介：上海交通大學碩士學位論文上海交通大學碩士學位論文以創(chuàng)新能力培養(yǎng)為核心研究初中生物工程實驗設(shè)計碩士研究生王海娟學號1100802002導師馬偉姜雅風申請學位工程碩士學科生物工程所在單位生命科學技術(shù)學院答辯日期2012年11月授予學位單位上海交通大學上海交通大學碩士學位論文III上海交通大學上海交通大學學位論文版權(quán)使用授權(quán)書學位論文版權(quán)使用授權(quán)書本學位論文作者完全了解學校有關(guān)保留、使用學位論文的規(guī)定，同意學校保留并向國家有關(guān)部門或機構(gòu)送交論文的復印件和電子版，允許論文被查閱和借閱。本人授權(quán)上海交通大學可以將本學位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫進行檢索，可以采用影印、縮印或掃描等復制手段保存和匯編本學位論文。保密保密□，在年解密后適用本授權(quán)書。本學位論文屬于不保密不保密□。（請在以上方框內(nèi)打“√”）學位論文作者簽名指導教師簽名日期年月日日期2012年9月23日

簡介：山西大學博士學位論文工程菌生物轉(zhuǎn)化D氨基酸及其相關(guān)酶的研究姓名鈕利喜申請學位級別博士專業(yè)生物化學與分子生物學指導教師袁靜明20070601工程菌轉(zhuǎn)化D氨基酸及其據(jù)關(guān)酶的研究的突變均為將生物合成過程中使用頻率高的密碼子變?yōu)槭褂妙l率低的密碼子。而突變株B中產(chǎn)生一個殘基突變，即ALA449GLY。SDS．PAGE分析表明PE．HYDOL／E．COLIBL21DE3酶的表達量比初始重組菌株略有提高。將D．海因酶活性中心的239位的組氨酸殘基分別突變?yōu)镠239Y和H239L，316位的天冬氨酸殘基突變?yōu)镈316E，但突變株酶活性喪失殆盡；若將409位的組氨酸殘基變?yōu)镠409T，活力剩余40％。經(jīng)NH42S04分級沉淀、PHENYLSCPHAROSE疏水層析純化，PAGE天然膠分析，突變酶仍然為二聚體，未發(fā)生解離現(xiàn)象；將410位的組氨酸殘基變?yōu)镠410A，活力基本喪失，僅剩余1．3％，表明相鄰二個組氨酸在酶分子構(gòu)象形成過程中所起的作用不同。分別將D海因酶N．末端和C．末端的一個氨基酸殘基剔除后得到突變酶HYDNLN末端SET缺失和HYDCIC末端ARG缺失。經(jīng)表達、純化后，突變酶和完整酶HYD的SDSPAGE、NATIVEPAGE和SEC分析表明，在完全相同的條件下，完整酶和突變酶的亞基分子量相同，但天然狀態(tài)下完整酶為二聚體，而HYDCL為單體且剩余活力為完整酶的43％，HYDNL為二聚體和單體的混合物且活力完全喪失。CD分析結(jié)果顯示，HYDCL同HYD相比沒有發(fā)生明顯改變，而HYDNL變化較大。HYD的PH穩(wěn)定性顯著增加，抗SDS能力亦有所提高，但熱穩(wěn)定性明顯降低。結(jié)果預示D一海因酶的C末端殘基ARG顯著影響酶的分子形式及熟穩(wěn)定性，但非酶活性所必需；而其N．末端殘基SER既是酶的結(jié)構(gòu)必需殘基，也是其活性必需殘基。2．CAB基因的克隆及表達從菌株SINORHIZOBIUMSP．SSORI中純化的CAB的N末端氨基酸序列設(shè)計了正向引物，并在已報道的不同來源菌株CAB的氨基酸序列同源性分析的基礎(chǔ)上設(shè)計了簡并反向引物。用該菌株總DNA為模板，經(jīng)PCR擴增得到一長度約為O．9KB的片段，DNA測序表明其ORF為915BP。將CAB基因分別克窿到PUCL8、PET3A、PET32M、PRSET、PGEX4T2、PEXSECI、PMAL．C2X等一系列表達載體中，然后在E．COLIDH5D、ECOLI2426、ECOLIBL21DE3中進行表達。但大多數(shù)表達產(chǎn)物為包涵體而不具酶活性。最終工程菌PMD／E．COLIBL21DE3中獲得CAB的可溶表達產(chǎn)物融合蛋白MBP．CAB77KDA，SDS．PAGE光密度掃描表明，其表達量約占菌體超聲后離心上清總蛋白的20％。經(jīng)AMYLOSE親和純化和SUPEROSE12凝膠排阻層析后達到了電泳純。根據(jù)PMAL．C2X質(zhì)粒背景，用FACTORXA剪切后，可得約42KDA的MBP和35KDA的CAB。酶活性檢測表明，當

簡介：中國科學院合肥物質(zhì)科學研究院博士學位論文IBBEDEVICE離子束生物工程裝置及應用研究姓名袁航申請學位級別博士專業(yè)核能科學與工程指導教師余增亮20060501摘要經(jīng)過多次實驗的運行、考驗，裝置達到了設(shè)計要求，運行狀態(tài)良好，穩(wěn)定可靠。在論文最后，總結(jié)課題研究，并提出離子束生物工程裝置進一步發(fā)展的改進方法。推法關(guān)鍵詞離子束生物工程，離子束生物工程裝置，寬離子束，束流測量，回N

簡介：人學RR程碩I論文上海交通大學工程碩士專業(yè)學位論文STRENGTHENSTHEBIOENGINEERINGABILITYOPTIMIZATIONTHESCHOOLBASEDCURRICULUMOFLIFESCIENCE加強生物工程能力培養(yǎng)優(yōu)化生命科學校本課程學校上海交通大學院系生命科學技術(shù)學院班級Z1008021學Q1100802005工程碩士生蘇蕾工程領(lǐng)域生物工程導師I林志新張雪洪導師II包霞上海交通大學生命科學技術(shù)學院2013年3月30日1本學位論文作者完全了解學校有關(guān)保留、使用學位論文的規(guī)定，同意學校保留并向國家有關(guān)部門或機構(gòu)送交論文的復印件和電子版，允許論文被查閱和借閱。本人授權(quán)上海交通大學可以將本學位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫進行檢索，可以采用影印、縮印或S描等復制手段保存和匯編本學位論文。保密□，在__年解密后適用本授權(quán)書。本學位論文屬于不保密口。請在以上方框內(nèi)打‘V，上海交通大學學位論文版權(quán)使用授權(quán)書學位論文作者簽名1

簡介：點擊查看更多校企聯(lián)盟模式研究——以新天地生物工程中心為例.pdf精彩內(nèi)容。