簡介：EPIDEMIOLOGYINVESTIGATIONOFH1NLSUBTYPESWINEINFLUENZAVIRUSAND“FLATIQMANDIDENTIFICATIONOFH9N2LSOLARIONANENTILLCASUBTYOSWINE。SHANDONGPROVINCEESNEINRONCETHEL“SULZLMITTEDT01LQESLSSUTTETOLQNGDAOAGRICULTURALUNIVERSITYINFULFILLMENTOFTHEREQUIREMENTFORTHEDEGREEOFMASTEROFAGRONOMYHUANGBINGZHENGDEPARTMENTOFANIMALSCIENCEANDVETERINARYMEDICINESUPERVISORPROFESSORZHOUSHUNQINGDAOCHINA青島農(nóng)業(yè)大學碩士學位論文捅要山東省豬流感病毒H1N1亞型流行病學調查及豬源H9N2病毒的分離鑒定摘要豬流感是由A型流感病毒引起的一種傳染性呼吸系統(tǒng)疾病，了解豬流感的流行現(xiàn)狀可為有效防控豬流感提供重要依據(jù)。豬流感在全球范圍內呈現(xiàn)，由于該病的臨床癥狀不盡相同，血清學檢查方法在檢測中具有重要的地位。本研究應用酶聯(lián)免疫吸附試驗對2012年2月至2013年5月來自山東省規(guī)?；i場的1573份血清樣品進行了豬流感HINL亞型抗體檢測，結果顯示陽性血清524份，陽性率3331％，表明山東地區(qū)普遍存在豬流感，且地區(qū)分布不均。這對了解山東及周邊地區(qū)規(guī)?；i場豬流感HINL亞型的分布和流行狀況提供了重要依據(jù)，對豬流感的預防與治療具有參考意義。本研究從山東各地豬鼻拭子以及其它臟器病料，進行豬流感病毒的分離，采樣豬群均表現(xiàn)不同程度的呼吸系統(tǒng)癥狀。從2012年采集自山東魯西北的豬病料中分離到一株H9N2亞型豬流感病毒。隨后對其進行序列測定遺傳進化分析以及生物學特性研究。表明A／SWINE／LXB／0901／2012H9N2毒株HA、NA基因均與韓國2004年分離自豬的毒株親緣關系最近，說明它們可能來自相同的祖先。通過動物回歸試驗，研究A／SWINE／LXB／0901／2012H9N2對豬的致病力。通過對攻毒組的體溫測定、抗體水平測定以及鼻咽拭子病毒分離情況分析研究，證明～SWINE／LXB／0901／2012H9N2屬于低致病力毒株，病毒在豬體實驗中可復制出豬流感臨床癥狀。關鍵詞流感病毒；H1N1亞型；H9N2亞型；血清流行病學；遺傳；動物回歸試驗

簡介：南京農(nóng)業(yè)大學博士學位論文犬冠狀病毒的流行病學調查及地方株的特性研究姓名王玉燕申請學位級別博士專業(yè)預防獸醫(yī)學指導教師陸承平20050601犬冠杭病毒的流行病學調查及地方棟的特性研究光試驗中，E1、N1、N2均不能與HC、HF結合而使感染細胞染色，E1’N1可與171、USCV、TN449，NJ2、NJL7、DF、KM、SH3等毒株感染的細胞結合，并使細胞著色。而N2僅能使CCVL7T、USCV，TN449感染的細胞著色。中和試驗證明N1，N2只能中和CCVL71，TN449扣USCV，不能中和其他的CCV毒株，而這三個毒株在A72細胞上的CPE相同，顯示所制備的中和性單抗具有毒株特異性。4用抗CCVL71的單抗展示了CCV毒株在A72細胞的釋放方式，結果發(fā)現(xiàn)CCV毒株在A72的一板釋放，細胞免疫熒光染色呈極端著色現(xiàn)象。其中E1、N1、能展示CCVL71、USCV、TN449、KM、NJ2、NJL7、DF等毒株的釋放，而N2不能展示病毒的釋放。研究CCVL71的單抗對不同CCV毒株的作用發(fā)現(xiàn)，單抗E1及中和性單抗N1、N2對其他CCV毒株不具有中和作用。進一步研究發(fā)現(xiàn)單抗N1、N2與KM作用后感染細胞，CPE產(chǎn)生的時間提前，子代病毒致價升高。免疫熒光試驗顯示，KM株與中和性單抗N1、N2作用后感染A72細胞，18小時后，免疫熒光染色的強度高于感染前不與中和性單抗作用的病毒對照，證實針對CCVL71毒株的中和性單抗N1、N2對CCVKM野毒株具有抗體依賴性的病毒感染增強作用。5對CCV參考株171，TN449及來自腹瀉犬糞樣的南京株NJL7株的M基因進行了克隆、測序，并與GENBANK中所有已知CCV及同亞群的TGEV和FCOV代表株的M基因進行了同源性比較和系統(tǒng)進化分析，同時對M蛋白的結構和功能進行了預測分析。結果表明，CCVL71與近年在中國分離到的CCV毒株V1，V2及大熊貓源的毒株具有98，9995％的同源性，說明這些毒株可能是來自同一毒林的準種NJL7與其他中國分離株及國外分離株的同源性為870919％，顯示其可能是一個相對獨立進化的CCV毒株。序列比較發(fā)現(xiàn)，所有CCV毒株在可能的同源重組“熱點”區(qū)內都有一個CTTTAG序列，與雞傳染性支氣管炎病毒同源重組模板交換位點附近的特征序列相似。CCVNJL7株M蛋白在N端50氨基酸序列與FCOV791683同源性高于其他毒株，而在后212氨基酸序列與TGEV同源，洼高于其他毒株，而TN449株則在N端50氨基酸序列與FCOV791683有100％的同源性而與TGEV的同源性為816％，而后面的序列與TGEV的同源性967％高于FCOV902％，這些結果提示這兩個毒株可能在M基因上曾經(jīng)發(fā)生過不同病毒的同源重組。CCVM蛋白的結構及勸能預測表明，所有毒株都具有分泌型信號膚，有3個螺旋跨膜區(qū)，Ⅳ末端位于膜外和C末端位于膜內M蛋白的兩末端具有較強的抗原性，M蛋白上存在多種功能性氨基酸修飾位點且相對保守。Ⅳ末端的氨基酸變異很大，但是功能性修飾位點相對保守，提示Ⅳ末端的功能可能與構象有關。6對CCV17TS基因乖南京分離株NJL7的部分S基因進45“7克隆、測序，得到的序列與GENBANK中所有已知CCV及同亞群的TGEV和FCOV代表株的S基因進II

簡介：分類號密級華中農(nóng)業(yè)大學博士學位論文豬偽狂犬病病毒HNX株的生物學特性與比較基因組學研究BIOLOGICALCHARACTERISTICSANDCOMPARATIVEGENOMICSANALYSISOFPSEUDORABIESVIRUSHNXSTRAIN博士研究生余騰學號2012302010040指導教師何啟蓋教授指導小組何啟蓋教授曹罡教授吳斌教授劉正飛教授方六榮教授專業(yè)預防獸醫(yī)學研究方向動物傳染病學獲得學位名稱農(nóng)學博士獲得學位時間2016年6月華中農(nóng)業(yè)大學動物科學技術學院、動物醫(yī)學院二O一六年六月豬偽狂犬病病毒HNX株的生物學特性與比較基因組學研究目錄摘要IABSTRACTIV縮略語表ABBREVIATION一VIII第1章文獻綜述111PR的危害及流行現(xiàn)狀1111臨床特點與危害一L112國外流行情況2113我國流行情況312PRV結構與主要蛋白功能6121病毒粒子結構6122PRV基因組6123核衣殼蛋白一8124被膜蛋白9125囊膜蛋白10126毒力相關蛋白1213PR防控措施13131新型疫苗研究14132根除凈化措施1514基因組測序技術16第2章PRVHNX株生物學特性研究1821研究目的和意義1822材料L8221組織樣品18222菌株與病毒株18223試驗動物19224主要試劑19225培養(yǎng)基與相關試劑的配制19226感受態(tài)細胞制備20227引物和反應條件20228主要試驗器材2223方法22231組織樣品的收集與處理22

簡介：華中農(nóng)業(yè)大學碩士學位論文豬傳染性胃腸炎病毒S基因表達的研究及其原核表達產(chǎn)物的生物學活性分析姓名楊樂樂申請學位級別碩士專業(yè)預防獸醫(yī)學指導教師吳斌郭福生200505012002級碩士研究生學位論夕良好的反應原性。以表達的融合蛋白為抗原初步建立了間接酶聯(lián)免疫吸附試驗EUSA方法；用方陣滴定確定其最佳抗原包被濃度分別是5／ZG／ML、1嘰G／ML，最佳血清稀釋倍數(shù)均為140。為了更好地消除非特異性反應，增強表達產(chǎn)物的抗原性，利用桿狀病毒表達系統(tǒng)可進行翻譯后修飾等特點，我們試圖在SF9昆蟲細胞中進行目的基因的表達。目前已成功構建了重組桿狀病毒穿梭表達載體BACMID．S1、BACMIDS1．2，為目的基因桿狀病毒表達的進一步研究奠定了基礎。本研究在TGEV病毒增殖的基礎上，克隆了TGEVS基因的兩個不同區(qū)段，構建了原核表達載體并進行了表達，利用原核表達產(chǎn)物柙步建立了TGEV和PRCV的間接ELISA鑒別診斷方法。同時成功構建了菱組桿狀病毒穿梭表達載體。這些工作為進一步研究TGEV和PRCV的流行和變異、開發(fā)新的診斷方法奠定了基礎，同時為其它冠狀病毒的研究提供了參考。關鍵詞TGEV{PRCV；S基因；原核表達；BAC．TO．BAC鑒別診斷

簡介：南京農(nóng)業(yè)大學碩士學位論文豬繁殖與呼吸綜合征病毒的檢測與流行病學研究姓名鄧雨修申請學位級別碩士專業(yè)預防獸醫(yī)學指導教師姜平20050601豬繁硝與呼吸綜合征稍毒的檢測與流行病學研究腎臟出血及胸膜肺炎等；2002年哺乳仔豬發(fā)病率較高，而2003、2004和2005年保育豬的發(fā)病率明顯高于哺乳仔豬。此外，約24％41／166病料在送檢前豬群免疫了PRRSV活疫苗。3、PRRSVRTPCRRFLP分析用ADGP51／ADGP52引物，通過RTPCR方法對鑒定的166份病料中PRRSVORF5基因進行了擴增，運用朋7ⅡI、肼鵬II和SACII三種限制性內切酶對PCR擴增片段進行限制性片段長度多態(tài)性RFLP分析。結果表明PRRSV有3種不同的RFLP模式，即221、111和131模式，其中221模式所占的比例最大，迭91O％；而1_11模式和131模式分別只占18％和72％。表明送檢的豬群中至少存在3種不同基因亞型的PRRSV毒株，并發(fā)現(xiàn)同一家豬場存在不同基因亞型PRRSV毒株。同時利用MARC145細胞進行病毒培養(yǎng)，并通過RTPCR方法鑒定，從臨床病料中分離出54株PRRSV，RTPCRRFLP分析結果表明，有45株PRRSV分離株屬于221模式；3株屬于卜II模式；6株屬于L一3I模式，且與病毒分離前的RFLP模式完全一致。本研究建立了PRRSVRTPCR特異性檢測技術，在國內8省市開展了患病豬PRRSV的檢測，豐富了我國PRRSV流行病學資料，從而為我國防制該病提供了理論依據(jù)。關鍵詞PRRSV；檢測；流行病學；RTPCRRFLP；病毒分離

簡介：揚州大學碩士學位論文重組禽腺病毒JSEGFP的生物學特性與致病性研究姓名張科申請學位級別碩士專業(yè)預防獸醫(yī)學指導教師秦愛建20050501揚州大學碩士論文明該病毒具有很好的生物安全性。2二、表達增強型綠色熒光蛋白的重組禽腺病毒在雞體內的免疫原性測定本研究進一步對重組病毒RFAVICGFP在雞體內長期的免疫效力情況和對SPF雞、商品雞的致病性進行初步探討。試驗通過肌肉和口服兩種途徑，分別以LO7、1OS、109個TCIDSO劑量的RFAVIEGFP接種10日齡SPF雛雞和無母源抗體商品雞，F(xiàn)AVIJS接種做對照。另外有母源抗體商品雞的免疫試驗單獨分開。以IFA方法和ELISA方法檢畏接種雞體內的抗體水平及其動態(tài)。結果顯示，SPF雞和無母源抗體雞免疫反應類似，于接種后第七天即可檢測到IFA及ELISA反應陽性抗體；抗體在接種后8周仍維持較高水平，無母源抗體商品雞普遍抗體水平高于SPF雞。有母源抗體雞免疫后抗體也能很長時間維持高抗體水平，提示母源抗體的存在并不影響病毒在雞體內的復制。體外中和試驗表明，機體穴產(chǎn)生的抗體對RFAVIEGFP具有中和效應。從ELISA的檢測結果發(fā)現(xiàn)，肌肉接種組的總體抗體水平比口服組高而接種劑量并不與抗體水平成正比。所有按種的雞在試驗期【_目J均不表現(xiàn)任何臨床癥狀和肉眼可見的病理變化。這些結果初步證實，RFAVIEGFP在雞體內能有效復制，而且激發(fā)機體產(chǎn)生長時間高水平的抗體，對SPF雞和商品雞不具有致病性。關鍵詞重組I群；禽腺瘸毒非必需片段；綠色熒光蛋白；生物學特性；致病性

簡介：國內圖書分類號國際圖書分類號學位論文密級馬傳染性貧血病毒LTR嵌合克隆生物學特性的研究魏麗麗導師姓名李景鵬教授沈榮顯院上申請學位級別農(nóng)學博士論文提交日期2005年4月26日所在單位東北農(nóng)業(yè)大學學位授予單位東北農(nóng)業(yè)大學專業(yè)名稱預防獸醫(yī)學答辯日期2005年5月25日學位授予日期答辯委員會主席相文華研究員2005年5月30日東北農(nóng)業(yè)大學農(nóng)學博士論文M液學分析發(fā)現(xiàn)，第二二組和第三組試驗動物白細胞與血紅蛋白含量總體上看沒有發(fā)生明顯的規(guī)律性的變化。在動物外周血中均檢測到一定的病毒RNA拷貝數(shù)，但拷貝數(shù)較低，說明LTR嵌合克隆衍生毒與其父本弱毒疫苗感染性衍生毒一樣，在體內復制水平較低。二者在誘導EIAV特異性淋巴細胞增殖功能和特異性細胞毒性殺傷反應中，亦具有相似的變化趨勢哥II效應。本項研究為進一步確定我國馬傳貧弱毒疫苗株毒力致弱及免疫保護的分子機制奠定了重要的分子生物學基礎，將為其它人和動物慢病毒的免疫預防的研究提供依據(jù)。關鍵詞馬傳染性貧血病毒；長末端重復感染性分子克隆；衍生病毒

簡介：密級論文編號中國農(nóng)業(yè)科學院學位論文3株禽2型副黏病毒的分離鑒定與生物學特性初步分析ISOLATION，IDENTIFICATIONANDPRELIMINARYCHARACTERIZATIONOFTHREEAVIANPARAMYXOVIMSTYPE2ISOLATES碩士研究生植群松指導教師王靖飛研究員申請學位類別獸醫(yī)碩士專業(yè)領域名稱獸醫(yī)培養(yǎng)單位哈爾濱獸醫(yī)研究所中國農(nóng)業(yè)科學院研究生院2015年5月獨創(chuàng)性聲明本人聲明所呈交的論文是我個人在導師指導F進行的研究工作及取得的研究成果。盡我所知，除了文中特別加以標注和致謝的地方外，論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果，也不包含為獲得中國農(nóng)業(yè)科學院或其它教育機構的學位或證書而使用過的材料。與我一同工作的同志對本研究所傲的任何貢獻均已往論文中作IR明確的說明并表示了謝意。研究生簽名時間W1_T年15關于論文使用授權的聲明本人完全了解中國農(nóng)業(yè)科學院有關保留、使用學位論文的規(guī)定，即；中國農(nóng)業(yè)科學院有權保留送交論文的復印孛和磁盤允許論文被奩閱和借閱，可以采用影印、縮印或掃描等復制手段保存、匯編學位論文。同意T，網(wǎng)農(nóng)業(yè)科學院可以FFJL4；同方式往不同媒體上發(fā)表、傳播學位論文的全部或部分內容。時阮WLJ“旬／JJ上日時矧矽少年鄉(xiāng)粥』一日松侈粉砒

簡介：密級論文編號中國農(nóng)業(yè)科學院學位論文偽狂犬病病毒感染誘導的小膠質細胞動態(tài)學變化的研究DYNAMICSOFMICROGLIAACTIVATIONINRESPONSETOPSEUDORABIESVIRUSINFECTION碩士研究生臧素芳指導教師何希君副研究員申請學位類別農(nóng)學碩士專業(yè)預防獸醫(yī)學研究方向免疫病理學培養(yǎng)單位哈爾濱獸醫(yī)研究所中國農(nóng)業(yè)科學院研究生院2015年3月獨創(chuàng)性聲明本人聲明所呈交的論文是我個人在導師指導下進行的研究工作及取得的研究成果。盡我所知，除了文中特別加以標注和致謝的地方外，論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果，也不包含為獲得中國農(nóng)業(yè)科學院或其它教育機構的學位或證書而使用過的材料。與我一同工作的同志對本研究所做的任何貢獻均已在論文中作丫明確的說明并表示R謝意。研究生簽名斌輔日寸間加世年鈿爭日關于論文使用授權的聲明本人完全了解中國農(nóng)業(yè)科學院有關保留、使用學位論文的規(guī)定，即中國農(nóng)業(yè)科學院有權保留送交論文的復印件和磁盤，允許論文被查閱和借閱，可以采用影印、縮印或掃描等復制手段保存、匯編學位論文。同意中國農(nóng)業(yè)科學院可以用』不同方式在不同媒體上發(fā)表、傳播學位論文的全部或部分內容。研究生簽名臧象蕩導師簽名‘』時間≯優(yōu)F年鄉(xiāng)月9日時間如，Y年∥月矽曰

簡介：密級論文編號中國農(nóng)業(yè)科學院學位論文貓杯狀病毒FBNJ．13株的分離鑒定及生物學特性研究ISOLATIONANDIDENTIFICATIONOFFELINECALICIVIRUSFB．N3．13ANDSTUDYONITSBIOLOGICALCHARACTERISTICS碩士研究生黃倩倩指導教師曲連東研究員申請學位類別農(nóng)學碩士專業(yè)預防獸醫(yī)學研究方向動物疫苗與分子免疫學培養(yǎng)單位哈爾濱獸醫(yī)研究所中國農(nóng)業(yè)科學院研究生院2015年5月獨創(chuàng)性聲明本人聲明所呈交的論文是我個人在導師指導下進行的研究工作及取得的研究成果．盡我所知，除了文中特別加以標注和致謝的地方外，論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果，也不包含為獲得中國農(nóng)業(yè)科學院或其它教育機構的學位或證書而使用過的材料。與我一同工作的同志對本研究所做的任何貢獻均已在論文中作了明確的說明并表示了謝意．研究生簽名4、．鏑鏑時間PIS年F月堪日關于論文使用授權的聲明本人完全了解中國農(nóng)業(yè)科學院有關保留、使用學位論文的規(guī)定，即中國農(nóng)業(yè)科學院有權保留送交論文的復印件和磁盤，允許論文被查閱和借閱，可以采用影印、縮印或掃描等復制手段保存、匯編學位論文。同意中國農(nóng)業(yè)科學院可以用不同方式在不同媒體上發(fā)表、傳播學位論文的全部或部分內容。研究生簽名童倚倚時間；YI，年歲月堪日導師簽名時間莎。方年石丹F臼

簡介：分類號分類號S85265學校代碼學校代碼10410密級級學號0202012210碩士學位論文江西江西豬群中豬群中1型和型和2型豬細環(huán)病豬細環(huán)病毒流行病學流行病學調查調查及全基因擴增、序列分析全基因擴增、序列分析EPIDEMIOLOGYINVESTIGATIONAMPLIFICATIONFULLLENGTHGENOMESEQUENCEANALYSISOFTQUETENOSUSVIRU12OFSWINEINJIANGXI申請人人田光玲田光玲指導教師師何后軍教授何后軍教授學科專業(yè)業(yè)預防獸醫(yī)學預防獸醫(yī)學所在所在院（所）院（所）動物科學技術學院動物科學技術學院論文提交日期論文提交日期2015年06月獨創(chuàng)性聲明本人聲明，所呈交的學位論文，是在指導教師指導下，通過我的努力取得的成果，并且是自己撰寫的。盡我所知，除了文中作了標注和致謝中已經(jīng)作了答謝的地方外，論文中不包含其他人發(fā)表或撰寫過的研究成果，也不包含在江西農(nóng)業(yè)大學或其它教育機構獲得學位或證書而使用過的材料。與我一同對本研究做出貢獻的同志，都在論文中作了明確的說明并表示了謝意。如被查有嚴重侵犯他人知識產(chǎn)權的行為，由本人承擔應有的責任。學位論文作者親筆簽名日期論文使用授權的說明論文使用授權的說明本人完全了解江西農(nóng)業(yè)大學有關保留、使用學位論文的規(guī)定，即學校有權送交論文的復印件，允許論文被查閱和借閱；學?？梢怨颊撐牡娜炕虿糠謨热?，可以采用影印、縮印或其他復制手段保存論文。保密，在年后解密可適用本授權書?！醪槐Ｃ乇緦W位論文屬于不保密?！酰ㄕ堅诜娇騼却颉啊獭保W位論文作者親筆簽名日期指導教師親筆簽名日期

簡介：山東農(nóng)業(yè)大學碩士學位論文J亞群白血病病毒NX0101株感染性克隆化病毒的構建及其生物學特性姓名張紀元申請學位級別碩士專業(yè)預防獸醫(yī)學指導教師崔治中20050520關于學位論文原創(chuàng)性和使用授權的聲明本人所呈交的學位論文，是在導師指導下，獨立進行科學研究所取得的成果。對在論文研究期間給予指導、幫助和做出重要貢獻的個人或集體，均在文中明確說明。本聲明的法律責任由本人承擔。本人完全了解山東農(nóng)業(yè)大學有關保留和使用學位論文的規(guī)定，同意學校保留和按要求向國家有關部門或機構送交論文紙質本和電子版，允許論文被查閱和借閱。本人授權山東農(nóng)業(yè)大學可以將本學位論文的全部或部分內容編入有關數(shù)據(jù)庫進行檢索，可以采用影印、縮印或其他復制手段保存論文和匯編本學位論文。保密論文在解密后應遵守此規(guī)定。論文儲虢貓云九導師簽名霍叢沖日期碰，L一1

簡介：南方醫(yī)科大學2012級碩士學位論文華南部分地區(qū)家豬流行性乙型腦炎病毒感染的流行病學調查EPIDEMIOLOGICALSURVEYOFJAPANESEENCEPHALITISVIRUSINFECTIONINDOMESTICSWLNEINSEVERALAREASOIS0UTNLNLNA一一●一●●’NF、●√1●●課題來源國家自然科學基金項目30972525學位申請人導師姓名專業(yè)名稱培養(yǎng)類型培養(yǎng)層次所在學院答辯委員會主席答辯委員會成員馬淑娟陳清流行病與衛(wèi)生統(tǒng)計學專業(yè)型碩士研究生公共衛(wèi)生與熱帶醫(yī)學學院王聲滂教授陳思東教授陸家海教授陳維清教授呂嘉春教授王志謹教授聶軍教授2015年5月12日廣州中文摘要威脅人類的健康。在乙腦疫苗未在人群中廣泛應用的年代，豬血清乙腦病毒抗體達到50％時，3～4周后將出現(xiàn)人間乙腦發(fā)病的高峰，故進行豬的乙腦病毒感染流行病學監(jiān)測可在一定程度上預測人間乙腦的發(fā)病情況。乙腦的預防，不僅有賴于降低人群易感性、消滅傳播媒介，也要做好傳染源的管理，做好源頭控制。因此，了解流行季節(jié)家豬乙腦病毒感染情況，有利于充分掌握當前乙腦的流行因素，科學地做好乙腦的預防和控制工作。因此，本研究在華南部分地區(qū)對成年家豬乙腦病毒的帶毒和血清抗體開展調查，了解家豬間乙腦的流行狀況，以便為乙腦的防制提供科學信息。鑒于目前我國市場上的商品化豬JEVIGG抗體ELISA檢測試劑盒品牌眾多，質量參差不齊，給應用者選擇帶來了一定的困難，我們在本研究中也對目前國產(chǎn)主要商品化IGG抗體ELISA試劑盒的真實性和可靠性進行了評價。研究方法1豬血樣本的采集與處理2013年1月至8月期間，赴廣東省、海南省和江西省部分地區(qū)的屠宰場或肉聯(lián)廠無菌采集6～8月齡表觀健康、未行乙腦疫苗免疫的家豬的血液樣本。所有采集到的豬血液樣本3000R／MIN離心15MIN，取離心后的血清混勻平均分裝，一式3份，冰袋或者干冰運輸回實驗室后，80。C保存待檢。2豬乙腦病毒IGG抗體診斷試劑盒評價選用三種常用的商品化豬JEVIGG抗體ELISA試劑盒KEQIAN、LVSHIYUAN及TIANCHEN，以微量中和試驗為金標準，對90份豬血清進行平行檢測，對結果進行診斷試驗評價。ELISA試劑盒的檢測嚴格按照各自說明書進行操作，微量中和試驗嚴格按照中華人民共和國衛(wèi)生行業(yè)標準WS2142008的指導進行操作。3豬乙腦病毒感染的流行病學調查31豬血清乙腦病毒檢測和分離311ELISA方法初篩豬血清樣本乙腦病毒抗原陽性標本用商用豬血清JEVAGELISA試劑盒初篩豬血清樣本，嚴格按照試劑盒說明

簡介：Y773530分類號密級’J|目差童天等博士學位論文單位代碼10019學號B02209豬圓環(huán)病毒2型的分子流行病學研究STUDYOHMOLECULAREPIDEMIO|OGYOFPORCINECIRCOVIRUSTYPE2研究生；墨童遮指導教師T塹墊盔J選燕合作指導教師申請學位門類級別盤莖譴專業(yè)名稱亟鯪蔓匡莖研究方向麴塹金痘圭鱟墨盒瘟塋所在學院盤塹墮鱟睦2005年5月ABSTRACTPORCINECIRCOVIRUSTYPE2PCV2ISTHEPRIMARYCAUSATIVEAGENTOFPOSTWEANINGMULTISYSTEMICWASTINGSYNDROMEPMWSANDOTHERRELATEDDISEASESINPIGSTHISSTUDYFOCUSEDONMOLECULAREPIDEMIOLOGYOFCHINESEPCV2INCLUDINGANALYSISOFGENOTYPEFORPREVAILINGSTRAINS，TRANSCRIPTIONALDIFFERENCESOFTHEDOMINANTANDNONDOMINANTGENOTYPICSTRAINSANDMOLECULARMECHANISMOFPREVAILINGFORTHEDOMINANTGENOTYPICSTRAINASWELLASTHEEVOLUTIONOFORFIANDORF2GENEOFPCV2WHOLEORF2GENESOF173POSITIVECLINICALPCV2SAMPLESFROMBEUINGANDOTHERAREASWEREAMPLIFIEDBYPCRANDFOLLOWEDBYRESTRICTIONFRAGMENTLENGTHPOLYMORPHISMRFLPANALYSISTHEYCOULDBEDIVIDEDINTO9DIFFERENTGENOTYPESA1，OFWHICHO6％WERECHN2A，06％WERECHN一2B，06％WERECHN2C，58％WERECHN一2D，86％WERECHN2E23％WERECHN2F23％WERECHN24607％WERECHN2HAND185％WERECHN2ITHECHN一2HWASTHEDOMINANTGENOTYPEOFPCV2AMONGGENOTYPESINCHINASEQUENCESANALYSISOFORF2GENESINDICATEDTHATCHINESEPCV2STRAINSWERECLOSELYRELATEDTOEACHOTHER892994％NUELEOTIDEIDENTITYBUTALSOTOOTHERPCV2STRALNSORIGINATINGFROMCANADA，US，EUROPEANDASIATHEREWASNOCLOSERELATIONSHIPBETWEENTHEGENOTYPEOFCHINESEPCV2ANDGEOGRAPHICORIGINTHEAMINOACIDSEQUENCEALIGNMENTOFTHECAPSIDPROTEINENCODEDBYORF2GENESHOWEDCHINESEPCV2STRAINSEXHIBITEDTHREEMAJORREGIONSOFGREATERHETEROGENEITYATRESIDUES5790，121～136AND180～191THERNASSYNTHESIZEDINPKL5CELLSOFGDANDBFSTRAINREPRESENTATIVESTRAINOFPCV2DOMINANTGENOTYPECHN2HANDNONDOMINANTGENOTYPEFCHN2ARESPECTIVELYWERECHARACTERIZEDBYNORTHERNBLOTANDRTPCRTHETRANSEDPTIONALANALYSISSHOWEDTHATNOTONLYQUANTITATIVEBUTALSOQUALITATIVEDIFFERENCESAMONGTHETRANSCRIPTSEXISTEDBETWEENCHN2HANDCHN一2ATHEYCOMMONLYSHAREDTHEREPLICATIONINITIATORPROTEINREPRNAANDTHEVIRALEAPSIDPROTEINCRRNACHN2AHADMOREABUNDANTREPBUTSHORTERCREXPRESSIONTHANCHN2HMOREOVERCHN2AHADTHEOTHERRNADESIGNATEDADANDREPS，BUTCHN2HHADNONEACCORDINGTOTHEDIFFERENTTRANSCRIPTSBETWEENTHEDOMINANTGENOTYPE忙FIN2HANDNONDOMINANTGENOTYPECHN一2A，F(xiàn)OURINFECTIOUSMOLECULARCLONESOFTHENONDOMINANTGENOTYPECHN2AWARECONSTRUCTEDBYSITEDIRECTEDMUTAGENESISTECHNIQUETHERESCUEVIRUSESOBTAINEDBYTRANSFEETIONANDPASSAGEINPKI5CELLSWEREANALYZEDWITHIMMUNOCHEMICALSTAININGANDPCRALLMUTANTPLASMIDSWEREABLETOSYNTHESIZEDNAOFPCV2THREEAMINOACIDSMUTATIONINCRDIDNOTAFFECTVIRALPROTEINSYNTHESISWHEREAS，THREEAMINOACIDSMUTATIONINREP，ALTERINGTHECONSENSUSDINUCLEOTIDESATTHESPLICEJUNCTIONSOFTHEREPSANDCLEARINGAWAYOFADDIDHAVEEFFECTONVIRALPROTEINSYNTHESIS，CAUSEDGREATREDUCTIONOFVIRALPROTEINSYNTHESISTHESERESULTSINDICATEDTHATTHEDOMINANTPCV2RCHN2HCOULDNOTPROCESSEFFICIENTLYVIRALPROTEINSYNTHESISINVITROWHICHWASASSOCIATEDWITLLSPECIFICAMINOACIDSMUTATIONINREPANDLACKOFREPSANDADTRANSCRIPTTHEGENOMICSEQUENCESOFPCV2BFSTRAINATVARIOUSPASSAGESINPKL5CELLSANDCLINICALSERASAMPLESWEREDETECTEDBYPCRITWASSHOWNTHATORFLGENEOFPCV2WASUNSTABLEANDEASYTOLOSELL

簡介：廣西大學碩士學位論文豬繁殖與呼吸綜合征病毒分子流行病學調查研究姓名盧桂娟申請學位級別碩士專業(yè)預防獸醫(yī)學指導教師黃偉堅羅廷榮20050601豬繁殖5J||手啦綜Q仃倆毒分了流行艄學謝盤研究于亞群I；GXWZ、GXWM、GXHP、GXCZ、GXFS、GXBB、GXBH、GXGL、GXNN和海南的HN一1、HN一2以及國內已發(fā)表的毒株序列CHIA、HZX、HB1和HB一2屬于亞群II；GXLZ一1和GXLZ一2和臺灣的MD001屬于亞群Ⅳ。推導編碼氨基酸的比較結果表明，分屬于不同亞群的廣西不同地區(qū)流行的PRRSV毒株在E基因編碼蛋白的潛在糖基化位點數(shù)目2～4個，表位區(qū)域27～30AA，37～45AA和180197AA和與毒力相關的氨基酸13位AA和151位AA等方面均存在著變異。本研究通過對PRRSVE基因序列變化的比較，了鰓PRRS在南方的流行狀況，為控制本病流行打下基礎。關鍵詞豬繁殖與呼吸綜合征病毒流行病學E基因克隆變異IL