簡介：江蘇某豬場(chǎng)2015．2016年豬流行性腹瀉病毒分子流行病學(xué)調(diào)查及基于S蛋白的抗體間接ELISA檢測(cè)方法的建立MOLECULAREPIDEMIOLOGICALINVESTIGATIONOFPORCINEEPIDEMICDIARRHEAVIRUSOFONEPIGFARMINJIANGSUFROM2015TO2016ANDESTABLISHMENTOFANTIBODYDETECTIONINDIRECTELISABASEDONSPROTEINOFPEDV研究生江倩倩導(dǎo)師彭大新教授劉岳龍研究員揚(yáng)州大學(xué)獸醫(yī)學(xué)院2016年6月Ⅱ揚(yáng)州大學(xué)碩士學(xué)位論文2．PEDV部分S基因的原核表達(dá)PEDV的S蛋白在免疫介導(dǎo)中起著重要作用，因此本研究對(duì)豬場(chǎng)流行毒株的部分S基因編碼蛋白可產(chǎn)生中和抗體，標(biāo)記為SP進(jìn)行擴(kuò)增，長度為71LBP，進(jìn)一步克隆至PET32A，構(gòu)建了PETSP原核表達(dá)質(zhì)粒。重組表達(dá)質(zhì)粒轉(zhuǎn)化BL21感受態(tài)細(xì)胞后，在28。C、200RPM條件下，經(jīng)0．2MM濃度的IPTG誘導(dǎo)獲得可溶性重組S蛋白。WESTERNBLOT試驗(yàn)證明表達(dá)的重組蛋白可與PEDV陽性血清發(fā)生特異性反應(yīng)，說明該重組蛋白有較好的抗原性。3．PEDV抗體間接ELISA檢測(cè)方法的初步建立為監(jiān)測(cè)豬場(chǎng)豬群PEDV抗體水平，初步建立了檢測(cè)PEDV抗體的間接ELISA方法。純化的S蛋白作為包被抗原，最優(yōu)的包被濃度為0．5GG／ML，4。C包被過夜，10％的小牛血清37℃封閉2H，最優(yōu)的待檢血清稀釋度為1200，37℃作用1H，HRP標(biāo)記的兔抗豬IGG18000稀釋，37。C作用LH，加入TMB顯色液10MIN后終止反應(yīng)。當(dāng)待檢血清OD450≥0．273時(shí)判為陽性，待檢血清OD4500．273時(shí)判為陰性。用建立的間接ELISA方法對(duì)商品化試劑盒中PRRSV、CSFV、PRV、PCV、FMDV等常見豬病的抗體陽性對(duì)照進(jìn)行檢測(cè)均呈陰性，說明該方法具有良好的特異性。分別用不同批次純化的蛋白及同一批次純化蛋白包被的酶標(biāo)板對(duì)血清樣品進(jìn)行檢測(cè)，結(jié)果表明該方法具有較好的重復(fù)性。用建立的間接ELISA方法對(duì)臨床47份豬血清進(jìn)行檢測(cè)，陽性率為72．34％，與進(jìn)口某公司PEDV抗體ELISA檢測(cè)試劑盒結(jié)果進(jìn)行比較，其符合率為95．74％。說明該方法適用于臨床豬群PEDV抗體水平檢測(cè)，同時(shí)也為以后診斷試劑盒的研制奠定基礎(chǔ)。關(guān)鍵詞豬流行性腹瀉病毒；分子流行病學(xué)調(diào)查；S蛋白；原核表達(dá)；間接ELISA檢測(cè)

簡介：山東農(nóng)業(yè)大學(xué)博士學(xué)位論文網(wǎng)狀內(nèi)皮組織增生癥病毒的分子流行病學(xué)調(diào)查及其在宿主免疫選擇壓下的分子變異姓名王玉申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別博士專業(yè)預(yù)防獸醫(yī)學(xué)指導(dǎo)教師崔治中20050615關(guān)于學(xué)位論文原創(chuàng)性和使用授權(quán)的聲明本人所呈交的學(xué)位論文，是在導(dǎo)師指導(dǎo)下，獨(dú)立進(jìn)行科學(xué)研究所取得的成果。對(duì)在論文研究期間給予指導(dǎo)、幫助和做出重要貢獻(xiàn)的個(gè)人或集體，均在文中明確說明。本聲明的法律責(zé)任由本人承擔(dān)。本人完全了解山東農(nóng)業(yè)大學(xué)有關(guān)保留和使用學(xué)位論文的規(guī)定，同意學(xué)校保留和按要求向國家有關(guān)部門或機(jī)構(gòu)送交論文紙質(zhì)本和電子版，允許論文被查閱和借閱。本人授權(quán)山東農(nóng)業(yè)大學(xué)可以將本學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫進(jìn)行檢索，可以采用影印、縮印或其他復(fù)制手段保存論文和匯編本學(xué)位論文。保密論文在解密后應(yīng)遵守此規(guī)定。做作者姥勘銣躲袒節(jié)導(dǎo)師簽名矬叮日期∥、／F7

簡介：學(xué)校代碼10225學(xué)號(hào)S16240學(xué)位論文黑龍江口岸城市嚙齒類動(dòng)物感染漢坦病毒的分子流行病學(xué)研究指導(dǎo)教師姓名申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別論文提交日期授予學(xué)位單位曹蘇亞王玉龍副教授東北林業(yè)大學(xué)碩士學(xué)科專業(yè)生理學(xué)2016年4月論文答辯日期2016年6月東北林業(yè)大學(xué)授予學(xué)位日期2016年6月答辯委員會(huì)主席相文華論文評(píng)閱人未必櫛素大學(xué)摘要摘要漢坦病毒HANTAVIMS，HV是一種有包膜分節(jié)段的負(fù)鏈RNA病毒，屬布尼亞病毒科。HV的自然宿主為嚙齒類動(dòng)物。其對(duì)嚙齒類只造成一過性感染，并不影響其宿主的壽命和繁衍。但其可通過野生嚙齒類宿主的排泄物如唾液、尿和糞便等感染人類，并引發(fā)兩種嚴(yán)重的臨床疾病腎綜合征出血熱HEMORRHGICFEVERWITHRENALSYNDROME，HFRS和漢坦病毒肺綜合癥HANTAVIRUSCARDIOPULMONARYSYNDROME，HPS。中國擁有世界上最高的HFRS發(fā)病率，而黑龍江是最嚴(yán)重的疫區(qū)之一。進(jìn)行疫病監(jiān)測(cè)和流行病學(xué)研究，是有效防控疫病的重要基礎(chǔ)。黑龍江省與俄聯(lián)邦、蒙古等多國接壤，是動(dòng)物疫病跨國傳播的重要防控區(qū)域，而口岸地區(qū)人員、貨物交流頻繁，又會(huì)提升動(dòng)物疫病傳播的風(fēng)險(xiǎn)。開展口岸地區(qū)疫病監(jiān)測(cè)和流行病學(xué)研究，尤其具有其重要性。因此，本研究對(duì)2014年黑龍江省主要口岸城市漢坦病毒在自然宿主中的流行情況進(jìn)行了調(diào)查，并重點(diǎn)對(duì)從嚙齒類動(dòng)物體內(nèi)分離的HV進(jìn)行了分子流行病學(xué)研究。本研究中，共在黑龍江地區(qū)選取12個(gè)口岸城市，捕獲嚙齒動(dòng)物645只，其中主要為11種嚙齒目動(dòng)物，此外包括4只購黯SOREXARANEUSLINNAEUS。在捕獲的嚙齒目動(dòng)物中，數(shù)量最多的是黑線姬鼠APODEMUSAGRARIUS，其次是褐家鼠RATTUSNORVEGICUS。對(duì)上述捕獲的動(dòng)物進(jìn)行PCR檢測(cè)以確定HV感染情況。結(jié)果表明黑線姬鼠中HV的有感染率是49％14／282，而褐家鼠的HV感染率是83％15／180。進(jìn)一步完成的基于基因序列測(cè)定和遺傳進(jìn)化分析結(jié)果表明，分離到的HV中，包含兩種HV基因型漢灘病毒HANTAANVIRUS，HTNV和漢城病毒SEOULVIRUS，SEOV。其中HTNV有10株，SEOV有19株，SEOV感染的檢出率略高于HTNV。而遺傳進(jìn)化樹分析表明，黑龍江口岸地區(qū)流行的SEOV和HTNV各存在兩個(gè)和一個(gè)進(jìn)化分支，與之前報(bào)道的檢測(cè)結(jié)果相一致，未檢測(cè)到有新進(jìn)化分支的出現(xiàn)。為了更好地了解在黑龍江口岸地區(qū)HV的流行情況，我們獲得了一株分離于褐家鼠的TJ分離株HTNV的M序列全長和一株DN2分離株SEOV的全基因組序列，來分析其基因信息。其中，HTNV的M基因氨基酸序列與國內(nèi)外參考毒株對(duì)比后，并未發(fā)現(xiàn)有重要氨基酸位點(diǎn)突變。而DN2分離株與國內(nèi)外代表毒株SEOVL99的核苷酸同源率是S基因965％，M基因983％，L基因960％。氨基酸序列的同源率為S基因933％，M基因952％，L基因991％。以上研究結(jié)果，支持目前黑龍江口岸地區(qū)鼠類動(dòng)物感染的HV為SEOV和HTNV，而SEOV的感染率可能相對(duì)較高。全部研究數(shù)據(jù)的獲得，有助于明確黑龍江地區(qū)特別是口岸地區(qū)嚙齒類作為載體的HV的流行情況，為HV引發(fā)疾病的有效防控提供重要參考。

簡介：萊陽農(nóng)學(xué)院碩士學(xué)位論文山東豬圓環(huán)病毒病流行病學(xué)調(diào)查及分離株ORF2基因序列分析姓名倪嬌申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別碩士專業(yè)預(yù)防獸醫(yī)學(xué)指導(dǎo)教師王金寶田夫林20060601藁荽|I|農(nóng)學(xué)蕊疆士學(xué)徒論文箍婺EPIDEMIOLOGYOFPORCINECIRCOVIRUSDISEASEANDSEQUENCEANALYSISONORF2GENEOFPCV2ISOLATEDFROMSHANDONGABSTRACTTHEPCV2ANTIBODIESOFSERASAMPLESFROMTHIRTEENHOGPENSINSHANDONGPROVINCEWEFEDETECTEDBYENZYMELINKEDIMMUNOSORBENTASSAYELISA．THERESULTSSHOWEDTHATTHEPIGSINTHIRTEENHOGPENSWEREALLINFECTEDBYPCV2．THEORF2GENESOFSDI、SDII、SDIII、SDIVPCV2VIRUSESISOLATEDFROMSHANDONGPROVINCEWERECLONED，IDENTIFEDANDCOMPAREDWITHTHESEQUENCESOFAUSTRIASTMINAY424402、UNITEDKINGDOMSTRAINAJ293869、GUANGXISTRAINAY556475、HAINANSTRAINAY556476、ZHEJIANGSTRAINAY686764WHICHHADBEENPUBLISHEDINGENBANK．THERESULTSSHOWEDTHATTHEHOMOLOGIESOFNUCLEICACTDSANDAMINOACIDSBETWEENTHEORF2GENESOFTHESEFOURPCV2ANDAUSTRIASTRAINWERE91．9％92．3％AND83．4％一84．7％．BETWEENTHEORF2GENESOFTHESEFOURPCV2ANDHAINANSTRAINWERE93．3％94．2％AND87．2％一89．4％．BETWEENTHEORF2GENESOFTHESEFOURPCV2ANDOTHERSTRAINSWEREMORETHAN98％AND96％．SOTHEHIGHGENETICRELATIVITYOFTHEORF2GENESOFTHESEFOURPCV2WITHOTHERSTRAINSHADBEENPROVED．THEPCV2ANTIBODIESOFSERESAMPLESFROMPIGSFEDOILDIFFERENTSTRAGESINFIVEHOGPENSINSHANDONGPROVINCEWEREDETECTEDBYENZYMELINKEDIMMUNOSORBENTASSAYELISA．THERESULTSSHOWEDTHATANTIBODIESCOULDBETRANSFERREDBYPLACENTAORCOLOSTRUMSTOPIGLETSANDPCV2DIDNOTTRANSMITTEDVERTICALLY．FIVECLASSICALSWINEFEVERVACCINESANDTWOPSEUDORABIEVACCINESUSEDCOMMONLYINSHANDONGPROVINCEWERESURVEYEDBYPCR．THERESULTSSHOWEDTHATTWOCSFVVACCINESHADBEENINFECTEDBYPCV2ANDVACCINATIONWASONEOFWAYS協(xié)TRANTMITPCV2．FRESHDUNGOFPIGSFEDONDIFFERENTSTRAGESINTWOHOGPENSWASSURVEYEDBYPCR,THERESULTSSHOWTHATONEOFTHEMHADBEENINFECTEDBYPCV2ANDDUNGWASANOTHERWAYTOTRANTMITPCV2．KEYWORDSPORCINECIRCOVIRUSDISEASE；EPIDEMIOLOGY；PCV2；ORF2GENEN

簡介：山東農(nóng)業(yè)大學(xué)博士學(xué)位論文馬立克氏病病毒PP38基因及其上游雙向啟動(dòng)子的生物學(xué)特性姓名丁家波申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別博士專業(yè)預(yù)防獸醫(yī)學(xué)指導(dǎo)教師崔治中20050601關(guān)于學(xué)位論文原創(chuàng)性和使用授權(quán)的聲明本人所呈交的學(xué)位論文，是在導(dǎo)師指導(dǎo)下，獨(dú)立進(jìn)行科學(xué)研究所取得的成果。對(duì)在論文研究期間給予指導(dǎo)、幫助和做出重要貢獻(xiàn)的個(gè)人或集體，均在文中明確說明。本聲明的法律責(zé)任由本人承擔(dān)。本人完全了解山東農(nóng)業(yè)大學(xué)有關(guān)保留和使用學(xué)位論文的規(guī)定，同意學(xué)校保留和按要求向國家有關(guān)部門或機(jī)構(gòu)送交論文紙質(zhì)本和電子版，允許論文被查閱和借閱。本人授權(quán)山東農(nóng)業(yè)大學(xué)可以將本學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫進(jìn)行檢索，可以采用影印、縮印或其他復(fù)制手段保存論文和匯編本學(xué)位論文。保密論文在解密后應(yīng)遵守此規(guī)定。者簽∥墊＆導(dǎo)師簽名日期

簡介：華中農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文近交系五指山小型豬解剖和組織學(xué)研究及內(nèi)源性反轉(zhuǎn)錄病毒（PERV）的檢測(cè)姓名靳二輝申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別碩士專業(yè)基礎(chǔ)獸醫(yī)學(xué)指導(dǎo)教師彭克美李奎20080601華中農(nóng)業(yè)人學(xué)2008扁碭FJ學(xué)位論文的資料，本試驗(yàn)采用石蠟切片和HE染色對(duì)其免疫器官的組織特點(diǎn)進(jìn)行觀察研究。結(jié)果顯示從出生到性成熟，胸腺實(shí)質(zhì)內(nèi)處于分裂期胸腺細(xì)胞和成熟胸腺細(xì)胞的數(shù)量均增多，胸腺小體的數(shù)量也增多。成年時(shí)，胸腺細(xì)胞數(shù)量減少，排列疏松，胸腺小體和胸腺上皮細(xì)胞均減少。2月齡時(shí)胸腺小體周圍可見許多大小不同的空泡狀細(xì)胞和變形細(xì)胞碎片。脾白髓動(dòng)脈周圍淋巴鞘和脾小結(jié)在4月齡前也隨年齡增長而逐漸增多增大，但12月齡時(shí)有所減少并維持在一定水平，其變化與大鼠和雞的基本一致。2月齡時(shí)，淋巴結(jié)皮質(zhì)在內(nèi)，髓質(zhì)在外，4月齡時(shí)兩者分界不明顯。與2和4月齡相比，12月齡淋巴小結(jié)較大，淋巴細(xì)胞排列疏松，髓質(zhì)內(nèi)淋巴細(xì)胞較少，毛細(xì)血管增多。從整體上觀察，免疫器官的組織學(xué)結(jié)構(gòu)與人和其它哺乳動(dòng)物之間沒有明顯的差異。3近交系五指山小型豬心、肝、腎顯微和超微結(jié)構(gòu)研究心、肝和腎移植在同種和異種器官移植中都具有重要的地位和作用，研究這3種器官的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)對(duì)其應(yīng)用于移植具有重要的意義。本試驗(yàn)通過顯微和超微組織學(xué)技術(shù)對(duì)近交系五指山小型豬心、肝和腎的形態(tài)特征進(jìn)行研究，結(jié)果表明，2月齡小型豬這些器官結(jié)構(gòu)還沒有發(fā)育完全，4月齡小型豬各結(jié)構(gòu)非常明顯，正處于旺盛的發(fā)育期。但從整體角度觀察，12月齡時(shí)，心室壁、肝臟和腎臟的組織學(xué)結(jié)構(gòu)以及心室肌、肝臟和腎皮質(zhì)的超微結(jié)構(gòu)與人類的最為相近，適合作為異種移植的器官供體。4近交系五指山小型豬垂體、甲狀腺和胰腺的形態(tài)學(xué)研究近交系五指山小型豬腦垂體位于成形的垂體窩內(nèi)，腺垂體包繞神經(jīng)垂體，中間部較狹窄，其內(nèi)濾泡樣結(jié)構(gòu)不明顯，腺垂體促性腺激素細(xì)胞分泌顆粒最大，促腎上促腎上腺皮質(zhì)激素細(xì)胞分泌顆粒最小，神經(jīng)垂體軸突內(nèi)分泌顆粒較少，赫令體不明顯。甲狀腺腺泡隨年齡的增長逐漸增大，腺泡上皮細(xì)胞微絨毛不發(fā)達(dá)，腺泡旁細(xì)胞有高電子密度和低電子密度兩種。胰腺腺泡排列緊密，腺泡間結(jié)締組織不發(fā)達(dá)，胰島周圍沒有結(jié)締組織包繞，相鄰腺泡細(xì)胞側(cè)面有連接復(fù)合體，胞質(zhì)內(nèi)充滿大而圓的酶原顆粒，泡心細(xì)胞較大，部分呈立方形，腺泡間毛細(xì)血管可見立方形的胞核。以上結(jié)果表明，近交系五指山小型豬腦垂體、甲狀腺和胰腺解剖組織學(xué)和超微結(jié)構(gòu)與人類和其他哺乳動(dòng)物的有一定差異。5近交系五指山小型豬PERV的檢測(cè)采用RTPCR技術(shù)對(duì)近交系五指山小型豬15種組織內(nèi)PERV的表達(dá)情況進(jìn)行了II

簡介：揚(yáng)州大學(xué)博士學(xué)位論文J亞群禽白血病病毒ENV蛋白分子生物學(xué)特性研究姓名葉建強(qiáng)申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別博士專業(yè)預(yù)防獸醫(yī)學(xué)指導(dǎo)教師秦愛建20050501LI揚(yáng)州大學(xué)睥士學(xué)位論文二、J亞群禽白血病病毒ENV蛋白功能與P13I相關(guān)穩(wěn)定表達(dá)ALVJ4817毒株ENV蛋白的PEDNA．EHV．DFI細(xì)胞的生長形態(tài)特性研究表明，該細(xì)胞形態(tài)與正常細(xì)胞相比明顯變圓、變大，提出其可能是一種類轉(zhuǎn)化現(xiàn)象。利用3DPSSM軟件以及TLVLPRED軟件分別對(duì)4817毒株ENV蛋白進(jìn)行了分析，結(jié)果表明4817毒株ENV蛋白具有信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)功能。而且發(fā)現(xiàn)4817毒株ENV蛋白胞漿區(qū)存在P13K信號(hào)激活結(jié)構(gòu)域YXX／VL。用P13K特異性抑制劑對(duì)PCDNA．ENVDFL細(xì)胞處理后發(fā)現(xiàn)，該細(xì)胞類轉(zhuǎn)化形態(tài)能被逆轉(zhuǎn)，證明PCDNA．E／11I．DFL細(xì)胞類轉(zhuǎn)化現(xiàn)象直接與P13K信號(hào)有關(guān)，提示4817毒株ENV蛋白具有潛在的致瘤性，其機(jī)理可能通過胞漿區(qū)YXXM結(jié)構(gòu)域激活P13K，引起PCDNAENVDFL細(xì)胞的類轉(zhuǎn)化，有關(guān)研究正在深入。三，J亞群禽白血病病毒BAY蛋白分類及其特性對(duì)不同ALVJENV蛋白胞漿區(qū)氨基酸序列進(jìn)一步比較發(fā)現(xiàn)，ALVJ毒株ENV蛋白胞漿區(qū)除了YXXM結(jié)構(gòu)域外，還存在ITIM和類ITAM結(jié)構(gòu)域。根據(jù)YXXM、ITAM和ITI／VL作用和功能，作者提出將ALV．JENV蛋白分為抑制型、雙功能型以及激活型三類。根據(jù)這一分類原則，在檢索到的33個(gè)ALV．JENV蛋自中，有28個(gè)為雙功能型ENV蛋白，3個(gè)為抑制型ENV蛋白，只有4817和UD3毒株2個(gè)為激活型ENV蛋白；而檢索到的所有EAV．1IP均屬于抑制型ENV蛋白。ENV蛋白的抗原性分析發(fā)現(xiàn)，抑制型、雙功能型以及激活型ENV蛋白的胞漿區(qū)抗原性依次降低，但致病、致瘤能力越來越強(qiáng)，這種現(xiàn)象與其信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)基序直接相關(guān)。分析ITIM基序?qū)刂苹蛞种泼庖呒?xì)胞激活、增殖功能，提示抑制型、雙功能型ENV蛋白中ITIM基序與ALV_J免疫抑制相關(guān)，抑制型ENV蛋自與EAVHP可能是ITIM受體，EAVHP可能為細(xì)胞內(nèi)原癌基因，ALVJ鯽R可能為病毒癌基因。四、J亞群禽白血病病毒雙功能型凹礦基因克隆及其表達(dá)通過組織病理檢查、組織切片特異性抗原檢測(cè)、細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)以及間接免疫熒光試驗(yàn)呼A從一疑似ALV．J感染的祖代肉用型種雞群中分離、鑒定到～株ALV．J病毒，命名為JSNT毒株。隨后對(duì)該毒株的ENV基因進(jìn)行了PCR擴(kuò)增、克隆、序列分析、轉(zhuǎn)移表達(dá)質(zhì)粒構(gòu)建以及表達(dá)。結(jié)果表明，該毒株ENV蛋白胞漿區(qū)存在YXXM和ITI／VL結(jié)構(gòu)域，屬于ALVJ雙功能型ENV蛋白；用該毒株P(guān)胛V基因以及PCDNA3．1載體成功構(gòu)建了轉(zhuǎn)移表達(dá)質(zhì)粒PCDNANTENV；通過PCDNA．NT，ER／V

簡介：山東農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文禽網(wǎng)狀內(nèi)皮組織增殖癥病毒流行病學(xué)研究及疫苗研制姓名王錫樂申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別碩士專業(yè)預(yù)防獸醫(yī)學(xué)指導(dǎo)教師崔治中20050524國家自然科學(xué)基金重點(diǎn)項(xiàng)目項(xiàng)目編號(hào)30330450禽網(wǎng)狀內(nèi)皮組織增殖癥病毒流行病學(xué)研究及疫苗研制RESEARCHONEPIDEMIOLOGYANDVACCINEOFRETICULOENDOTHELIOSISVIRUS研究生王錫樂導(dǎo)師崔治中教授山東農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院預(yù)防獸醫(yī)系2005年5月

簡介：華中農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文湖北省鴨肝炎病毒的分離鑒定及生物學(xué)特性研究姓名金鑫申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別碩士專業(yè)基礎(chǔ)獸醫(yī)學(xué)指導(dǎo)教師邵華斌程國富20080601華中農(nóng)業(yè)大學(xué)2008屆碩上論文ABSTRACTDUCKVIRALHEPATITISDVHISAFATALANDRAPIDLYSPREADINGDISEASEOFYOUNGDUCKLINGS．THEMAJORPATHOLOGICCHANGEININFECTEDDUCKLINGSISHEPATITIS．THREEDIFFERENTVIRUSES，DUCKHEPATITISVIRUSTYPES1，2AND3，HAVEBEENFOUNDTOBEASSOCIATEDWITHTHESESYMPTOMS．DUCKVIRUSHEPATITISTYPE1WASPOPULARWITHINCHINA．DHVWASTHEBIGGESTTROUBLEMAKEROFTHEDEVELOPMENTOFTHEPOULTRYINDUSTRY．THEPRESENTSTUDYDESCRIBESISOLATINGANDIDENTIFYINGDUCKHEPATITISOFHUBEISTRAIN，THESPECIFICGENECLONEDANDSEQUENCED，NEUTRALIZATIONTEST，ANDRECURRENCETEST，ANDPROTECTIONTEST．AVIRULENTFIELDSTRAINSOFDHV1WEREIDENTIFIEDANDTHEIRPATHOGENICITYTOBOTHDUCKEMBRYOANDDUCKLINGWERETESTED．THEPATHOGENYOFDHVWASANALYSEDTHROUGHOBSERVATIONELECTRONMICROSCOPEANDPATHOLOGICALCHANGEOFDUCKLING’SINTERNALORGAN，ITSBIONOMICS．THESTUDYPROVIDEDINFORMATIONFORTHEEPIDEMIOLOGYANDTAXOLOGYOFDVH，ANDWASUSEFULFORPROVIDINGTECHNOLOGICALMEANSANDACADEMICBASISTOEFFECTIVELYPREVENT．GAINEDSOMERESULTSASFOLLOWISOLATIONTWOVIRUSWEREOBTAINEDTHROUGHUSCOVYDUCKEMBRYOALLANTOICSACINOCULATIONFROMDUCKLINGLIVERSAMPLESCOLLECTEDFROMHUBEIPROVINCESINCHINA．THEELDSOOFTHETWOVIRUSSTRAINSDETECTEDWITHDUCKEMBRYOSWERE103．88／0．2MLAND10‘4～9／0．2MLRESPECTIVELY．TWOVIRUSWEREIDENTIFIEDDVHTYPE1ANDNAMEDJXSTRAIN，DYSTRAIN．DHV1OFCONSERVATIONREGIONFRAGMENTSOBTAINEDINRTPCRWERESEQUENCEDANDALIGNED9297％SIMILARITYATTHENUCLEOTIDELEVELWITHTHATOFOTHERDHV．．1STRAINSLISTEDINGENBANK．PHYLOGENETICTREEREVEALEDTHATJXSTRAINSANDDYSTRAINWASGROUPEDINTODIFFERENTLINEAGE．THELETHALRATEOFTHESEISOLATESWAS100PERCENTWHENINOCULATING11DAYOLDDUCKEMBRYOS，ANDTHEMORTALITYRATEWAS50AND70PERCENTRESPECTIVELYWHENINOCULATING4DAYOLDDUCKLINGSINTRAMUSCULARLYWITHTHESEISOLATES．DEADDUCKLINGSSHOWEDTHESIGNOFOPISTHOTONOS，WITHSWOLLENANDPUNCTUATEHEMORRHAGEINTHEIRLIVERS．THEHISTOPATHOLOGICALCHANGESOFINCULATEDDUCKLINGWEREOBSERVED．THERESULTSHOWEDTHATTHEHISTOPATHOLOGICALCHANGESWEREORRHAGICNECROTICHEPATITIS，PANCREASLIMITATIONCOAGULATIONNECROSIS．PARTICLERESEMBLEVIRUSINMEMBRANESTRUCTUREWASSHOWNABOUT30,40NMINDIAMETENII

簡介：密級(jí)論文編號(hào)中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院學(xué)位論文犬細(xì)小病毒犬細(xì)小病毒流行病學(xué)調(diào)查及其感染流行病學(xué)調(diào)查及其感染F81細(xì)胞的細(xì)胞的比較蛋白質(zhì)組學(xué)分析比較蛋白質(zhì)組學(xué)分析CANINEPARVOVIRUSEPIDEMIOLOGICALINVESTIGATIONANDCOMPARATIVEPROTEOMICSANALYSISOFCPVINFECTEDF81CELLS博士研究博士研究生生趙航指導(dǎo)教師程世鵬程世鵬研究員研究員申請(qǐng)學(xué)位申請(qǐng)學(xué)位類別別農(nóng)學(xué)博士農(nóng)學(xué)博士專業(yè)預(yù)防獸醫(yī)學(xué)業(yè)預(yù)防獸醫(yī)學(xué)研究方向動(dòng)物疫苗與分子免疫學(xué)向動(dòng)物疫苗與分子免疫學(xué)培養(yǎng)單位特產(chǎn)研究所特產(chǎn)研究所研究生院研究生院2016年05月獨(dú)創(chuàng)性聲明本人聲明所呈交的論文是我個(gè)人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果。盡我所知，除了文中特別加以標(biāo)注和致謝的地方外，論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果，也不包含為獲得中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院或其它教育機(jī)構(gòu)的學(xué)位或證書而使用過的材料。與我一同工作的同志對(duì)本研究所做的任何貢獻(xiàn)均已在論文中作了明確的說明并表示了謝意。研究生簽名時(shí)間年月日關(guān)于論文使用授權(quán)的聲明本人完全了解中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定，即中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院有權(quán)保留送交論文的復(fù)印件和磁盤，允許論文被查閱和借閱，可以采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存、匯編學(xué)位論文。同意中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院可以用不同方式在不同媒體上發(fā)表、傳播學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容。研究生簽名時(shí)間年月日導(dǎo)師簽名時(shí)間年月日

簡介：帶KT3標(biāo)簽嵌合型豬圓環(huán)病毒PCVL2一KT3的構(gòu)建及其生物學(xué)特性的研究CONSTRUCTIONANDBIOLOGICALSTUDYOFCHIMERICPORCINECIRCOVIRUS12WITHAKT3SIGNATURE研究生張飛鵬專業(yè)預(yù)防獸醫(yī)學(xué)導(dǎo)師高崧教授揚(yáng)州大學(xué)獸醫(yī)學(xué)院2016年6月?lián)P州大學(xué)碩士學(xué)位論文證明其作為標(biāo)簽疫苗應(yīng)用的可行性。關(guān)鍵詞感染性克??；共轉(zhuǎn)染；嵌合型PCVL．2KT3病毒；標(biāo)簽疫苗

簡介：血清4型禽腺病毒GX2013毒株的生物學(xué)特性鑒定和檢測(cè)方法的建立IDENTIFICATIONOFBIOLOGICALCHARACTERISTICSOFFOWLADENOVIRUSSEROTYPE4FADV4GX2013STRAINANDESTABLISHMENTOFDETECTIONMETHODSFORFADVC研究生陳天驁專業(yè)獸醫(yī)碩士導(dǎo)師吳艷濤教授揚(yáng)州大學(xué)獸醫(yī)學(xué)院2016年6月?lián)P州大學(xué)碩士學(xué)位論文HEMORRHAGE，MARGINALNECROSISSPLEENWASALSOHYPEREMIAKIDNEYWASEDEMAANDHEMORRHAGE，WITHRENALTUBULARDEGENERATIONANDPROTRUSIONPROVENTRICULUSWASEDEMAANDHEMORRHAGEULCERATIONSOCCURREDINTHEGIZZARDSNEARTHEJUNCTIONBETWEENTHEPROVENTRICULUSANDGIZZARDTOOBSERVEFADV4GX2013STRAIN’SPATHOGENICITYTOCHICKENS，THEVIRUSESWEREINOCULATEDTODAYOLDSPFCHICKENSTHROUGHINTRANASALINOCULATIONANDSUBCUTANEOUSINJECTIONATNECKRESPECTIVELY，WITHIN7DAYS，THEMORTALITYININJECTIONGROUPANDINTRANASALINOCULATIONWAS100％AND80％RESPECTIVELYTHECHANGESOFAUTOPSYWEREMAINLYHYDROPERICARDIUM，HEPATOSPLENOMEGALYWITHMULTIPLENECROSIS，ULCERATIONSYNDROMEOFTHEKOILINLAYEROFTHEGIZZARD，SWELLINGINTHEKIDNEYTOINVESTIGATEFADV4GX2013STRAIN’SMULTIPLICATIONONCELLS，THEVIRUSESWEREINFECTEDWITHDF1，VERO，293T，CEF，CEL，ANDLMHCELLSTHERESULTSSHOWEDTHATTHEVIRUSCOULDNOTREPRODUCEONTHECEF，DFI，293TANDVEROCELLS，BUTCOULDMULTIPLYANDCAUSECYTOPATHICEFFECTSONTHECEL，ANDLMHCELLSPRIMERSWERESYNTHETISEDTOAMPLIFYTHEGENOMEOFSTRAINGX2013，THENSEQUENCEDANDANALYZEDTHERESULTSSHOWEDTHATFADV4GX2013STRAIN’SGENOMESIZEWAS43752BP，THECHARACTERISTICOFTHEGENOMEWASALMOSTCONSISTENTWITHTHEREPORTEDFADV4STRAINHB1510INCHINARECENTLY2ESTABLISHMENTOFINDIRECTELISAMETHODFORDETECTINGFADVCINTHISSTUDY，THEGENEENCODINGFIBERLLWASAMPLIFIEDBYPCRANDCLONEDINTOPET32AEXPRESSIONVECTOR，THENTHERECOMBINANTPLASMIDWASTRANSFORMEDINTOECOLIBL21DE3，ANDINDUCEDBYIPTGTOOBTAINTHERECOMBINANTFIBERLIPROTEIN，WHICHISABOUT40KDANDEXPRESSEDINSUPERNATANTFORMTHENWEDEVELOPEDANINDIRECTELISAMETHODBASEDONTHERECOMBINANTOFFIBERLITODETECTANTIBODIESAGAINSTFADVCTHEINDIRECTELISAMETHODHASGOODSPECIFICITY，REPEATABILITYUSINGTHISMETHODTODETECT16CLINICALSAMPLES，THEPOSITIVERATEWAS1875％THEESTABLISHMENTOFTHISMETHODPROVIDEDASIMPLEANDQUICKSEROLOGICALDIAGNOSISMETHODFORTHEDETECTIONANDEPIDEMIOLOGICALINVESTIGATIONOFFADVCKEYWORDSFOWLADENOVIRUSSEROTYPE4BIOLOGICALCHARACTERISTICS；PROKARYOTICEXPRESSION；INDKECTELISA

簡介：密級(jí)論文編號(hào)中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院學(xué)位論文豬圓環(huán)病毒豬圓環(huán)病毒2型和豬繁殖與呼吸綜合征病毒型和豬繁殖與呼吸綜合征病毒分子流行病學(xué)調(diào)查分子流行病學(xué)調(diào)查及遺傳進(jìn)化分析及遺傳進(jìn)化分析MOLECULAREPIDEMIOLOGYANDPHYLOGENETICANALYSISOFPORCINECIRCOVIRUSTYPE2ANDPORCINEREPRODUCTIVEANDRESPIRATORYSYNDROMEVIRUS碩士研究碩士研究生生劉杏劉杏指導(dǎo)教師武華武華申請(qǐng)學(xué)位類別申請(qǐng)學(xué)位類別農(nóng)學(xué)碩士農(nóng)學(xué)碩士專業(yè)預(yù)防獸醫(yī)學(xué)預(yù)防獸醫(yī)學(xué)研究方向動(dòng)物疫苗與分子免疫學(xué)動(dòng)物疫苗與分子免疫學(xué)培養(yǎng)單位特產(chǎn)研究所特產(chǎn)研究所研究生院研究生院2016年4月獨(dú)創(chuàng)性聲明本人聲明所呈交的論文是我個(gè)人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果。盡我所知，除了文中特別加以標(biāo)注和致謝的地方外，論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果，也不包含為獲得中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院或其它教育機(jī)構(gòu)的學(xué)位或證書而使用過的材料。與我一同工作的同志對(duì)本研究所做的任何貢獻(xiàn)均已在論文中作了明確的說明并表示了謝意。研究生簽名時(shí)間年月日關(guān)于論文使用授權(quán)的聲明本人完全了解中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定，即中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院有權(quán)保留送交論文的復(fù)印件和磁盤，允許論文被查閱和借閱，可以采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存、匯編學(xué)位論文。同意中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院可以用不同方式在不同媒體上發(fā)表、傳播學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容。研究生簽名時(shí)間年月日導(dǎo)師簽名時(shí)間年月日

簡介：密級(jí)論文編號(hào)中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院學(xué)位論文貓泛白細(xì)胞減少癥泛白細(xì)胞減少癥病毒病毒反向遺傳學(xué)反向遺傳學(xué)操作系統(tǒng)操作系統(tǒng)的建立的建立ESTABLISHMENTOFFELINEPANLEUKOPENIAVIRUSREVERSGENETICSYSTEM碩士研究碩士研究生生程楠程楠指導(dǎo)教師夏咸柱夏咸柱研究員研究員申請(qǐng)學(xué)位類別申請(qǐng)學(xué)位類別農(nóng)學(xué)碩士農(nóng)學(xué)碩士專業(yè)預(yù)防獸醫(yī)學(xué)預(yù)防獸醫(yī)學(xué)研究方向獸醫(yī)微生物及其分子生物學(xué)獸醫(yī)微生物及其分子生物學(xué)培養(yǎng)單位中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院哈爾濱獸醫(yī)哈爾濱獸醫(yī)研究所研究所20162016年5月獨(dú)創(chuàng)性聲明本人聲明所呈交的論文是我個(gè)人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果。盡我所知，除了文中特別加以標(biāo)注和致謝的地方外，論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果，也不包含為獲得中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院或其它教育機(jī)構(gòu)的學(xué)位或證書而使用過的材料。與我一同工作的同志對(duì)本研究所做的任何貢獻(xiàn)均已在論文中作了明確的說明并表示了謝意。研究生簽名時(shí)間年月日關(guān)于論文使用授權(quán)的聲明本人完全了解中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定，即中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院有權(quán)保留送交論文的復(fù)印件和磁盤，允許論文被查閱和借閱，可以采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存、匯編學(xué)位論文。同意中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院可以用不同方式在不同媒體上發(fā)表、傳播學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容。研究生簽名時(shí)間年月日導(dǎo)師簽名時(shí)間年月

簡介：南京農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文豬繁殖與呼吸綜合征病毒GP5、M和N蛋白單克隆抗體的研制及生物學(xué)特性分析姓名馬蘇申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別碩士專業(yè)預(yù)防獸醫(yī)學(xué)指導(dǎo)教師姜平20060601豬繁箍與蟹暇塔臺(tái)挺病毒GP5、M辮N蛋毒革竟強(qiáng)抗體躺醋稍殷生物掣特健分析的其他蛋白冪反應(yīng)。WESTTENBLOT結(jié)熬顯示其中單杭2F3釬對(duì)PRRSVN蛋白線性袁位而摹轆5DII和4D5礙E鑄磚PRRSVK鼴鴦轉(zhuǎn)穩(wěn)象戮表拉2抗PRRSVGP5餐囪的克隧亢體利用重熏嶷翼核質(zhì)粒PCDNA3GP5兜液BALB／C鼠，盛熙揀魏鯫媳雜突臻載拳，辮膊細(xì)胞和骨髓癌細(xì)胞SP2／0融合，經(jīng)臥縷ELISA簿選，3次蠢隈簿釋法克燎，褥期3椿熊穩(wěn)定分泌抗PRRSVGP5薅竊單抗的雜交瘤細(xì)戇襪。分髑命名為4C9、5110、5F12。其中5D10的IG亞類為IGM。ELISA檢測(cè)雜交瘤細(xì)胞培養(yǎng)上清抗體艘價(jià)為164～11024，膜拳藏諗為L3200一I10240，用L默彝IPMA檢測(cè)，綣暴璉磚黯性媛WESTER擴(kuò)BLOT褪磷，逛羔棘率抗均毒對(duì)PRRSV酶GP5螯由。中和試驗(yàn)表吼5D10和5F12莞有病毒中和活譙，嶷取中和致價(jià)分潮為L40書I80。但5D10和5F12的栩?qū)τH和力不簡，證明菸識(shí)裁冪網(wǎng)戇抗原經(jīng)點(diǎn)。三婊細(xì)斃連續(xù)培秦20代居秘能穩(wěn)定分泌捷體。3?？筆RRSV赫蝥囪豹革殼隆摭體；將PRRSVM蛋由的基因克隆八真核農(nóng)選栽體PCDNA3I，利用構(gòu)建成的蟹組真核質(zhì)叛免疫BALB／O小鼠，采用襲交攘技術(shù)裁備摭PRRSV鞋螢由的單抗，建立瓣接ELISA方法篩選鞠撩克隆，獲得3秫可分潞特舜橙梳PRRSVM蛋白抗誰的雜交瘤細(xì)胞襪，分剜今露為IA7、4G3、5F3。1A7和4G3的IG亞獒為I酮。ELISA檢測(cè)雜交瘸細(xì)胞培豢上滲投馀為L64一L1024，黢水投徐為13200一LI0240，茂盼用BLOT、IFA輸測(cè)，綣暴均是躲蛀。4G3和IA7搬對(duì)索和力不懲，證明葵識(shí)別冪簿抗源撼點(diǎn)。IA7和4G3葵甯窺毒中爭活瓣，疆拳審和數(shù)饞逸割L96，臻上所迷，本研究菇獲得5株分泌抗PRRSVN鼴白零克隆抗體的細(xì)胞株，3椿分泌揀PRRSVGP5蛋蠹單競(jìng)隆撼黎鰱紐胞椿，3揀分泌托PRRSV赫蛋鴦單克隆輟體翡如藏秣。其中青4株細(xì)胞分泌的單筑具有病毒中和作用，從而為進(jìn)一步研究PRRSV主簧蘩藕蛋白抗艨表位菠中和表位酶確定，勢(shì)PRRSV診斷和免痰預(yù)防研究奠定了燕要基礎(chǔ)。美鍵讕豬繁殖每呼蠛淙合襁病毒PRRSV；N蛋白；GP5贊白；M愛國萍克瀣抗捧；中和筑維