簡(jiǎn)介：目的通過以慢性乙型肝炎CHRONICVIRALHEPATITISB，CHB患者為研究對(duì)象，檢測(cè)分析血清前S1PRELIMINARYS1，PRES1抗原與血清中乙肝病毒脫氧核糖核酸HEPATITISBVIVASDEOXYRIBONUDEICACID，HBVDNA及與外周單個(gè)核細(xì)胞PERIPHERALBLOODMONOUCLEARCELLS，PBMC中HBVDNA它們之間的相關(guān)性，旨在尋找有助于評(píng)判反應(yīng)乙肝病毒HEPATITISBRIVAS，HBV在機(jī)體免疫細(xì)胞中復(fù)制程度的指標(biāo)；進(jìn)一步通過對(duì)CD4、CD8T亞群的數(shù)量的檢測(cè)，觀察機(jī)體免疫損傷的程度，以評(píng)價(jià)PRES1抗原檢測(cè)反應(yīng)HBV在機(jī)體免疫細(xì)胞內(nèi)復(fù)制及造成免疫損傷的臨床應(yīng)用價(jià)值。方法隨機(jī)選取于2008年3月至8月，在寧夏醫(yī)科大學(xué)附屬醫(yī)院感染疾病科門診及住院部治療的CHB患者108例，及門診體檢健康對(duì)照者30例，分離出血清及PBMC備用。用酶聯(lián)免疫吸附法ENZYMELINKEDIMMUNSBENTASSAY，ELISA檢測(cè)108例CHB患者血清PRES1抗原，用熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)FLUESCENTQUQNTITYPOLYMERASECHAINREACTION，F(xiàn)QPCR技術(shù)檢測(cè)血清和PBMC中的HBVDNA，同時(shí)采用流式細(xì)胞儀技術(shù)F1OWCYTOMETRY，F(xiàn)CM檢測(cè)所有受檢患者及健康對(duì)照者T細(xì)胞亞群情況后，做統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。結(jié)果1PRES1抗原反應(yīng)HBV復(fù)制的診斷敏感度897％、準(zhǔn)確性917％均優(yōu)于乙肝E抗原HEPATITISBEANTIGEN，HBEAG。2PRES1抗原陽性率與血清和PBMC中HBVDNA均存在關(guān)聯(lián)X2血清7519，X2PBMC4779，P結(jié)論1PRES1抗原反應(yīng)HBV復(fù)制的的檢驗(yàn)效能優(yōu)于HBEAG。2血清PRES1抗原與血清HBVDNA及PBMC中HBVDNA的存在和復(fù)制密切相關(guān)，PRES1可反映HBV在機(jī)體免疫細(xì)胞中復(fù)制的程度，反應(yīng)機(jī)體免疫損傷的情況。3慢性乙肝患者人體內(nèi)發(fā)生T細(xì)胞免疫紊亂HBV感染PBMC后隨著PBMC內(nèi)HBVDNA復(fù)制增加，可進(jìn)一步加重T細(xì)胞功能的紊亂影響其免疫功能。所以HBV可感染PBMC，PRES1抗原檢測(cè)可以反映CHB患者細(xì)胞免疫損傷程度，可作為診斷乙型肝炎、反應(yīng)HBV復(fù)制及感染PBMC的一個(gè)敏感指標(biāo)，慢性乙肝患者PRES1抗原、血清和PBMC中HBVDNA的聯(lián)合檢測(cè)可對(duì)于乙肝患者的病情判斷、臨床治療的評(píng)價(jià)提供可靠依據(jù)。

簡(jiǎn)介：本研究采用鑲嵌圖形測(cè)驗(yàn)EFT、情感量表，測(cè)查了青島大學(xué)198名大學(xué)生的認(rèn)知方式、正性情感和負(fù)性情感，通過對(duì)大學(xué)生正性情感和負(fù)性情感的統(tǒng)計(jì)分析，探討現(xiàn)代大學(xué)生的情感特征，并對(duì)大學(xué)生場(chǎng)認(rèn)知方式與正性情感和負(fù)性情感之間的相互關(guān)系進(jìn)行分析。本研究結(jié)論如下1、大學(xué)生的認(rèn)知方式在年級(jí)、學(xué)科、是否獨(dú)生子女方面差異顯著。一年級(jí)學(xué)生、理科學(xué)生、獨(dú)生子女的認(rèn)知方式傾向于場(chǎng)獨(dú)立性，四年級(jí)學(xué)生、文科學(xué)生、非獨(dú)生子女的認(rèn)知方式傾向于場(chǎng)依存。2、大學(xué)生的情感在性別、年級(jí)、生源地、是否獨(dú)生子女方面差異顯著。男生的負(fù)性情感得分高于女生，四年級(jí)學(xué)生比一年級(jí)學(xué)生存在更多的負(fù)性情感，來自城市的大學(xué)生比來自農(nóng)村的大學(xué)生負(fù)性情感得分低，獨(dú)生子女大學(xué)生的快樂感高于非獨(dú)生子女大學(xué)生。3、大學(xué)生的EFT分與負(fù)性情感和快樂感有顯著相關(guān)，場(chǎng)獨(dú)立的學(xué)生正性情感分?jǐn)?shù)顯著高于場(chǎng)依存學(xué)生，場(chǎng)獨(dú)立的學(xué)生比場(chǎng)依存的學(xué)生體驗(yàn)到更多的快樂感，而場(chǎng)依存的學(xué)生比場(chǎng)獨(dú)立的學(xué)生體驗(yàn)更多的負(fù)性情感。

簡(jiǎn)介：目的應(yīng)用酵母雙雜交法檢測(cè)乙型肝炎病毒（HBV）X蛋白（HBX）與HDAXX的相互作用，并初步探討其相互作用后對(duì)細(xì)胞凋亡的影響，為進(jìn)一步研究HBX在HBV慢性感染致癌機(jī)制中的作用提供一定的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。方法1構(gòu)建酵母菌真核表達(dá)載體PGADT7HBX根據(jù)已知的HBVX基因序列，采用PRIMERPREMIER50軟件設(shè)計(jì)一對(duì)引物，并分別引入ECI與XHOI酶切位點(diǎn)，PCR擴(kuò)增X基因；用ECI和XHOI分別雙酶切PCR產(chǎn)物和質(zhì)粒PGADT7，分別純化回收酶切產(chǎn)物，T4連接酶連接后，轉(zhuǎn)化大腸桿菌DH5Α，篩選陽性克隆。對(duì)重組質(zhì)粒進(jìn)行酶切及測(cè)序鑒定。2構(gòu)建酵母菌真核表達(dá)載體PGBKT7HDAXX用ECI和SALI分別雙酶切質(zhì)粒PGBDUC1HDAXX和PGBKT7，分別純化回收酶切產(chǎn)物，T4連接酶連接后，轉(zhuǎn)化大腸桿菌DH5Α，篩選到陽性克隆后，對(duì)重組質(zhì)粒行酶切鑒定。3酵母雙雜交檢測(cè)HBX與HDAXX的相互作用將酵母菌真核表達(dá)載體及酵母菌陰性陽性對(duì)照質(zhì)粒分4組轉(zhuǎn)化酵母菌AH109，A組為PGADT7和PGBKT7、B組為PGADT7HBX和PGBKT7HDAXX、C組為PGADT7T和PGBKT7LAM、D組為PGADT7T和PGBKT7P53，將轉(zhuǎn)化菌落接種于SDTRPLEU（二缺）固體平板，30℃培養(yǎng)2～4D。將單個(gè)菌落接種于SDTRPLEUHIS（三缺）和SDTRPLEUHISADE（四缺）平板，30℃培養(yǎng)2～4D。裂解酵母菌，提取蛋白，經(jīng)SDSPAGE、WESTERNBLOT檢測(cè)HDAXX和HBX在酵母中的表達(dá)。4流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞凋亡將HBVX基因穩(wěn)定轉(zhuǎn)染入HEPG2細(xì)胞即HEPG2X，再瞬時(shí)轉(zhuǎn)染15ΜG、30ΜG和45ΜGPCDAN31HDAXX，以PCDNA31＋轉(zhuǎn)染HEPG2X組和HEPG2X組分別作為對(duì)照。用10MMOLL的5氟尿嘧啶5FU處理36H后分別收集各組細(xì)胞，經(jīng)75％的乙醇4℃固定過夜，PI染色后，用流式細(xì)胞儀檢測(cè)各組細(xì)胞的凋亡率。用統(tǒng)計(jì)軟件SPSS130對(duì)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行LSDT檢驗(yàn)分析。結(jié)果1PCR擴(kuò)增HBVX基因片段（465BP），將X基因克隆至PGADT7載體上，經(jīng)雙酶切及測(cè)序分析，所克隆的目的片段與已知的X基因序列及GENEBANK上公布的HBVX基因（PUBMEDNC_U95551）序列完全一致。2將PGBDUC1HDAXX上的HDAXX基因片段亞克隆至PGBKT7載體上，經(jīng)雙酶切分析，得約22KB大小的HDAXX基因片段，與預(yù)期值大小一致。3分4組轉(zhuǎn)化的酵母菌AH109在二缺陷平板上均可長(zhǎng)出白色菌落，但僅有B、D兩組菌可以在三缺和四缺平板上生長(zhǎng)，選取B組四缺陷平板上單個(gè)菌落，提取酵母蛋白，WESTERNBLOT檢測(cè)到HDAXX和HBX在同一株酵母菌株中均有表達(dá)。4將X基因穩(wěn)定轉(zhuǎn)染入HEPG2細(xì)胞，WESTERNBLOT檢測(cè)到HBX在HEPG2X細(xì)胞中的表達(dá)。經(jīng)流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)，HEPG2細(xì)胞用5FU處理后凋亡率明顯高于未經(jīng)5FU處理的細(xì)胞組，結(jié)果具有顯著性差異（P001）；HEPG2X組細(xì)胞凋亡率明顯低于空細(xì)胞組，結(jié)果具有顯著性差異（P001）；而轉(zhuǎn)染PCDAN31HDAXX后，細(xì)胞凋亡率進(jìn)一步降低，但與轉(zhuǎn)染入的PCDAN31HDAXX量沒有劑量依賴關(guān)系。結(jié)論1成功地構(gòu)建了PGBKT7HDAXX和PGADT7HBX酵母菌真核表達(dá)載體，并可在酵母菌AH109中表達(dá)。2HBX與HDAXX在酵母細(xì)胞內(nèi)存在相互作用。3構(gòu)建了穩(wěn)定表達(dá)HBX的細(xì)胞株HEPG2X。4HBX可抑制5FU誘導(dǎo)的HEPG2細(xì)胞凋亡，而HDAXX的高表達(dá)能提高HBX的抑制作用，使細(xì)胞凋亡率進(jìn)一步降低。

簡(jiǎn)介：空心蓮子草ALTERNANTHCRAPHILOXEROIDESMARTGRISEB為莧科AMARANTHACEAE蓮子草屬ALTERNANTHERA多年生宿根草本植物，具有清熱解毒、涼血利尿的功效。用于治療蕁麻疹、流行性感冒等病毒性疾患。本實(shí)驗(yàn)室前期研究確定了空心蓮子草的乙酸乙酯提取物為抗病毒活性部位。為了進(jìn)一步詮釋空心蓮子草抗病毒物質(zhì)基礎(chǔ)及為其開發(fā)應(yīng)用提供依據(jù)，本論文對(duì)該藥用植物的乙酸乙酯部位抗病毒化學(xué)成分及藥材質(zhì)量分析進(jìn)行了相關(guān)研究。采用色譜法對(duì)空心蓮子草抗病毒有效部位的化學(xué)成分進(jìn)行了分離和鑒定從中分離到10個(gè)單體成分，鑒定了8個(gè)化合物，分別為分別為Β谷甾醇ΒSITOSTEROLⅠ，Α菠甾醇ΑSPINASTEROLⅡ，熊果酸URSOLICACIDⅢ，芫花素GENKWANINⅣ，大豆素DAIDEINⅤ，槲皮素QUERCETINⅥ，布盧姆醇ABLUMONOLA，30ΒD吡喃葡萄糖醛酸基齊墩果酸280ΒD吡喃葡萄糖酯OLEANOLICACID30ΒDGLTLCURONOPYRANOSYL280ΒDGLUCOPYRANOSIDEⅨ，其中Ⅳ，Ⅴ為首次從該植物中分離得到的化合物。在抗人流感病毒H3N2藥理試驗(yàn)的跟蹤下，采用色譜法對(duì)空心蓮子草乙酸乙酯提取部位進(jìn)行了抗病毒活性成分分離和篩選研究。乙酸乙酯提取物經(jīng)硅膠柱分離，以氯仿甲醇梯度洗脫，其中氯仿甲醇73洗脫物作用較強(qiáng)。從中分離得到化合物Ⅶ抗人流感病毒效果明顯，化合物Ⅴ對(duì)人流感病毒有一定抑制作用同時(shí)，對(duì)本實(shí)驗(yàn)室前人從空心蓮子草中提取分離出的化合物N反式阿魏?；野贰⒍耐樗?、齊墩果酸進(jìn)行了抗乙肝病毒藥理實(shí)驗(yàn)，結(jié)果顯示三種化合物對(duì)乙肝病毒均有不同程度的抑制作用，其中以N反式阿魏?；焕野房挂腋尾《咀饔幂^強(qiáng)。以抗乙肝病毒有效成分N反式阿魏?；野窞橹笜?biāo)，采用HPLC分析方法建立了該藥用植物含量測(cè)定的方法。采用高效毛細(xì)管電泳色譜法對(duì)空心蓮子草藥材進(jìn)行了指紋圖譜研究，建立了該藥材的指紋圖譜，色譜峰分離度好，相似度符合規(guī)定，方法可靠性強(qiáng)；通過對(duì)不同產(chǎn)地陸生環(huán)境空心蓮子草樣品的HPCE色譜圖比較，標(biāo)定了18個(gè)共有峰對(duì)不同產(chǎn)地水生環(huán)境空心蓮子草樣品進(jìn)行了HPCE色譜圖測(cè)定，標(biāo)定了18個(gè)共有峰，結(jié)果表明，水生境空心蓮子草指紋圖譜中色譜峰的數(shù)量較陸生環(huán)境空心蓮子草多。從而為探討該藥用植物的品質(zhì)與生態(tài)的關(guān)系提供了依據(jù)，也為該藥用植物建立與國際接軌的質(zhì)量評(píng)價(jià)方法提供了參考依據(jù)。

簡(jiǎn)介：邊緣性人格障礙（BDERLINEPERSONALITYDISDER，BPD）已受到西方精神衛(wèi)生界的普遍關(guān)注，是目前人們的一個(gè)主要的心理健康問題。許多研究認(rèn)為情緒調(diào)節(jié)困難障礙是BPD的核心病理。國外有關(guān)BPD情緒失調(diào)的研究很多，但主要是用問卷探討情緒失調(diào)對(duì)BPD患者的影響，以及用實(shí)驗(yàn)方法尋找BPD患者情緒失調(diào)的證據(jù)。目前，還沒有從情緒調(diào)節(jié)方式上探討可以改善患者情緒失調(diào)障礙的有效方法，也沒有用實(shí)驗(yàn)的方法探討不同的情緒調(diào)節(jié)方式對(duì)BPD患者的影響。本研究以醫(yī)院和高校心理咨詢中心的BPD患者為研究對(duì)象，目的是探討不同的情緒調(diào)節(jié)方式對(duì)BPD患者的影響機(jī)制，找到可能改善BPD患者情緒失調(diào)障礙的有效的調(diào)節(jié)技能。研究采用心理生理測(cè)量法，測(cè)量被試觀看電影片段的主觀體驗(yàn)變化和生理反應(yīng)變化。研究結(jié)論如下1BPD組被試觀看中性情緒片段1的悲傷和痛苦情緒高于控制組。2負(fù)性情緒片段2能激起負(fù)性情緒。BPD患者的情緒反應(yīng)比控制組高。在觀看負(fù)性情緒片段2時(shí)，BPD組的主觀體驗(yàn)（恐懼和緊張）和生理喚起（SCR）變化高于控制組。3負(fù)性情緒片段3能激起負(fù)性情緒。認(rèn)知重評(píng)能緩解BPD被試的負(fù)性情緒反應(yīng)。在負(fù)性情緒片段3的觀看階段，與情緒抑制組相比，認(rèn)知重評(píng)組的主觀體驗(yàn)（恐懼和緊張）和生理喚起（HR）更低。4在觀看負(fù)性情緒片段3之后的恢復(fù)階段，認(rèn)知重評(píng)相對(duì)于情緒抑制能使BPD被試的負(fù)性情緒恢復(fù)得更快。即認(rèn)知重評(píng)組的負(fù)性情緒體驗(yàn)和生理喚起仍然比情緒抑制組低。

簡(jiǎn)介：中圖分類號(hào)UDCR75825610碩士學(xué)位論文學(xué)校代碼Q33密級(jí)坌玨147例藥物性皮炎的臨床資料分析及相關(guān)病毒的檢測(cè)CLINICALANALYSISANDDETECTIONOFRELATEDVIRUSESIN147DERMATITISMEDICAMENTOSAPATIENTS作者姓名尹用星學(xué)科專業(yè)臨床醫(yī)學(xué)研究方向皮膚病與性病學(xué)學(xué)院系、所湘雅二醫(yī)院指導(dǎo)老師肖嶸教授論文答辯日期答辯委員會(huì)主席中南大學(xué)二O一三年五月147例藥物性皮炎的I晦床資料分析及相關(guān)病毒的檢測(cè)摘要目的收集并分析147例住院的藥物性皮炎患者臨床資料，觀察藥物性皮炎患者人皰疹病毒肌6、HHV7、EBV、CMV及細(xì)小病毒PVBL9的感染狀況。方法1收集2010年9月到2013年3月入住我院的藥物性皮炎患者及正常對(duì)照者的血清；2采用酶聯(lián)免疫吸附法檢測(cè)血清中HHV6、HHV7、EBV、CMV及PVBL9抗體；3分析藥物超敏反應(yīng)綜合征DIHS患者、重癥藥疹患者、非重癥藥疹患者及正常人病毒感染的差異；4對(duì)藥物性皮炎患者的年齡、性別、藥疹類型、致敏藥物、臨床特點(diǎn)等與病毒感染進(jìn)行相關(guān)分析，并將病毒感染與部分臨床資料進(jìn)行綜合分析。結(jié)果1、DIHS組、重癥藥疹組、非重癥藥疹組患者性別無顯著差異；重癥藥疹組患者的發(fā)病平均年齡比非重癥藥疹組高。2、我院住院藥疹患者中，以抗生素、抗癲癇藥及抗痛風(fēng)類藥物為主要致敏藥物。3、我院住院藥疹患者中，EE、SJS、DIHS三種藥疹最常見，約一半屬于病情嚴(yán)重的重癥類藥疹。4、DIHS常見的致敏藥物依次為抗生素、抗癲癇藥及非甾體類藥物；重癥藥疹常見致敏藥物分別為抗癲癇藥、抗痛風(fēng)藥及抗生素；非重癥藥疹最常見致敏藥物為抗生素。5、DIHS組、重癥藥疹組、非重癥藥疹組在潛伏期、發(fā)熱、肝功能損害等方面具有顯著差異；重癥藥疹組在腎功能損害發(fā)生率上比DIHS組及非重

簡(jiǎn)介：心理治療通過建立特殊的人際關(guān)系運(yùn)用心理學(xué)的理論指導(dǎo)在實(shí)踐中對(duì)特定人群的心理需求進(jìn)行相關(guān)調(diào)整。心理治療的發(fā)展在某種意義上伴隨著近一個(gè)世紀(jì)人類社會(huì)重大變革。人類社會(huì)中越來越多的個(gè)體由于難以適應(yīng)這種變化，產(chǎn)生諸多不同于以往環(huán)境中的心理問題，而解決相關(guān)心理問題的需求則漸漸成為心理治療成熟發(fā)展的根本動(dòng)力。心理治療經(jīng)歷了精神分析、行為主義、人本主義三大理論流派的洗禮發(fā)展趨向于流派間的整合，整合的優(yōu)勢(shì)在于增強(qiáng)心理治療的適用范圍和療效。我國的心理治療起步較晚但發(fā)展迅猛在借鑒國外優(yōu)秀療法的同時(shí)也涌現(xiàn)出相當(dāng)數(shù)量的本土療法對(duì)于本土療法的思考與總結(jié)勢(shì)必能為提高國內(nèi)心理治療整體水平做出添磚加瓦的貢獻(xiàn)。積極認(rèn)知行為療法是中國學(xué)者在心理治療本土化進(jìn)程中的成果。從理論基礎(chǔ)上看積極認(rèn)知行為療法沿用認(rèn)知行為療法的基本假設(shè)心理疾病的發(fā)生發(fā)展與環(huán)境因素、認(rèn)知因素以及行為因素密切相關(guān)認(rèn)知因素包括個(gè)體的思維、信念等對(duì)行為、情緒有決定作用因此改變相應(yīng)認(rèn)知因素成為治療的關(guān)鍵。在此基礎(chǔ)上積極認(rèn)知行為療法融入了互補(bǔ)于傳統(tǒng)臨床心理學(xué)的積極心理學(xué)思想強(qiáng)調(diào)包括潛在積極力量、積極行動(dòng)等積極因素在心理治療中的巨大作用。從操作程序上看積極認(rèn)知行為療法以四個(gè)階段和六個(gè)核心的治療程序作為指導(dǎo)適用于中國醫(yī)療機(jī)構(gòu)對(duì)心理疾病患者的診斷與排查程序也符合心理治療進(jìn)程的一般規(guī)律。盡管相關(guān)治療記錄和技術(shù)的運(yùn)用與認(rèn)知行為療法有相似之處但始終強(qiáng)調(diào)積極因素的挖掘與利用而非認(rèn)知行為療法中的教育方式。從科學(xué)性問題上看積極認(rèn)知行為療法是科學(xué)的認(rèn)知行為療法在一個(gè)方向上的發(fā)展其理論假說、操作程序都符合科學(xué)性的標(biāo)準(zhǔn)同時(shí)也在適用范圍內(nèi)取得顯著療效。

簡(jiǎn)介：第一部分目的構(gòu)建含有鼠胰島素樣生長(zhǎng)因子1IGF1基因的重組腺病毒，并轉(zhuǎn)染鼠胰島Β細(xì)胞標(biāo)準(zhǔn)細(xì)胞株RINM5F細(xì)胞，研究RIGF1對(duì)鏈脲佐菌素STZ誘導(dǎo)大鼠胰島Β細(xì)胞損害的保護(hù)作用及其作用機(jī)制，為基因治療糖尿病提供理論依據(jù)。方法從大鼠肝臟組織提取目的基因RNA，RTPCR轉(zhuǎn)錄及擴(kuò)增產(chǎn)物DNA，并進(jìn)行純化。分別用限制性核酸內(nèi)切酶BGLⅡ和ECV雙酶切消化目的基因片段和穿梭載體PADTRACKCMV，定向亞克隆到PADTRACKCMV質(zhì)粒上，1TSS法轉(zhuǎn)化ECOLIDH10B菌，篩選重組PADTRACKCMVRIGF1質(zhì)粒。在ECOLIBJ5183菌中構(gòu)建重組子。重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染293細(xì)胞進(jìn)行擴(kuò)增。同樣方法包裝擴(kuò)增不含目的基因的空腺病毒載體，作為病毒載體對(duì)照。快速腺病毒感染性滴度檢測(cè)試劑盒測(cè)定病毒滴度。重組腺病毒轉(zhuǎn)染RINM5F細(xì)胞，ELISA和WESTEMBLOTTING檢測(cè)RIGF1表達(dá)；STZ誘導(dǎo)細(xì)胞破壞，檢測(cè)培養(yǎng)上清中NO水平，胰島素釋放實(shí)驗(yàn)進(jìn)行功能測(cè)定，流式細(xì)胞檢測(cè)細(xì)胞凋亡，四甲基偶氮唑鹽法檢測(cè)細(xì)胞存活率。采用SPSS130統(tǒng)計(jì)分析軟件對(duì)結(jié)果進(jìn)行分析。結(jié)果目的基因RTPCR產(chǎn)物經(jīng)瓊脂糖凝膠電泳得到406BP特異性RIGF1電泳條帶，并成功構(gòu)建了含有RIGF1基因的重組腺病毒，病毒滴度為10109PFUML，腺病毒空載體滴度為80108PFUML。RIGF1在轉(zhuǎn)染RINM5F細(xì)胞16H后可觀察到細(xì)胞內(nèi)的綠色熒光，表明轉(zhuǎn)染成功，RIGF1有效表達(dá)。STZ誘導(dǎo)后，正常組和ADEGFP組胰島素釋放量較對(duì)照組明顯降低P結(jié)論胰島Β細(xì)胞局部表達(dá)IGF1能夠保護(hù)細(xì)胞功能，抑制NO產(chǎn)生，使胰島Β細(xì)胞免受誘導(dǎo)凋亡因子的損害，提高細(xì)胞存活率，具有防治1型糖尿病的作用。STZ誘導(dǎo)胰島Β細(xì)胞凋亡可能與NO介導(dǎo)有關(guān)。第二部分目的通過將ADRIGF1基因以三種不同途徑肌肉注射、腹腔注射、胰島被膜下注射導(dǎo)入SD大鼠體內(nèi)，觀察不同組別大鼠糖尿病的發(fā)病情況，觀察ADRIGF1基因?qū)TZ誘發(fā)SD大鼠糖尿病的保護(hù)作用，以及比較3種不同注射途徑體內(nèi)表達(dá)的效果，為RIGF1進(jìn)行基因防治糖尿病創(chuàng)造條件。方法46周齡SD雄性大鼠90只，隨機(jī)分為A糖尿病對(duì)照組，B空白對(duì)照組，C腺病毒空載體對(duì)照組，D肌肉注射ADRIGF1組，E腹腔注射ADRIGF1組，F(xiàn)胰腺被膜下注射ADRIGF1組，每組各15只。A組、B組不做任何處理，C組注射含ADEGFP的重組腺病毒液01ML8O107PFU，D、E、F組注射含ADRIGF1的重組腺病毒液01ML10108PFU。1周后A組及D、E、F組大鼠分別禁食12H后給予腹腔注射STZ50MGKG促發(fā)糖尿病，每周測(cè)定體質(zhì)量、血糖，血糖≥167MMOLL并維持1周者確定為發(fā)生糖尿病。成模5周后處死大鼠，取胰腺做病理切片HE染色觀察胰腺炎癥浸潤(rùn)程度，SABC免疫組化試劑盒檢測(cè)大鼠胰腺組織中IGF1局部表達(dá)程度；取下腔靜脈血1ML，EIISA試劑盒檢測(cè)血清IGFL及胰島素含量。采用SPSSL30統(tǒng)計(jì)分析軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析。結(jié)果A、D、E、F組大鼠腹腔注射STZ2天后出現(xiàn)明顯的多飲多尿現(xiàn)象，糖尿病成模率分別為A組100％，D組615％，E組60％，F(xiàn)組667％。D、E、F組糖尿病發(fā)病率明顯低于A組，但D、E、F各組之間無明顯差異；胰腺切片HE染色顯示D、E、F組胰腺炎程度較A組輕，但明顯高于B、C組，且D、E、F各組之間胰島炎情況無明顯差別免疫組化顯示D、E、F組IGF1胰島局部高表達(dá)，且D、E、F三組之間無明顯差異，但明顯高于A、B、C組；ELISA法測(cè)得D、E、F組血清胰島素水平較A組高，且D、E、F三組之間無明顯差異，與B、C組相比亦差異亦不明顯；血清IGF1水平各組之間無明顯差異。結(jié)論腺病毒介導(dǎo)的IGF1基因?qū)TZ誘導(dǎo)的SD大鼠1型糖尿病有一定的預(yù)防作用，可以使胰腺局部高表達(dá)IGF1，減輕胰腺炎程度，但與IGF1注射途徑無明顯相關(guān)性。

簡(jiǎn)介：目的以11例強(qiáng)迫癥來訪者為研究對(duì)象，探討“情緒認(rèn)知行為”心理干預(yù)方法對(duì)強(qiáng)迫癥干預(yù)的有效性及干預(yù)效果。方法使用“情緒認(rèn)知行為”心理干預(yù)方法對(duì)強(qiáng)迫癥進(jìn)行干預(yù)。同時(shí)用耶魯布朗強(qiáng)迫量表YBOCS、自編主觀評(píng)定問卷為評(píng)定工具，將單被試ABABA輪回實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)與臨床心理干預(yù)相結(jié)合，記錄來訪者強(qiáng)迫癥狀的改變量。結(jié)果通過觀測(cè)單被試強(qiáng)迫行為，以及焦慮情緒、受強(qiáng)迫行為困擾程度和對(duì)強(qiáng)迫行為控制程度的主觀感受自我評(píng)分在各單元變化的趨勢(shì)，發(fā)現(xiàn)單被試的YBOCS總分由實(shí)驗(yàn)前的30分變?yōu)閷?shí)驗(yàn)后的7分，減分率為77％。對(duì)另外10例強(qiáng)迫癥來訪者的心理干預(yù)有效率也達(dá)100％YBOCS總分的減分率≥20％，其中5例痊愈治療后YBOCS總分＜16，4例強(qiáng)迫癥狀顯著改善YBOCS總分的減分率≥35％，1例有改善YBOCS總分的減分率≥20％。結(jié)論經(jīng)過研究證明了“情緒認(rèn)知行為”心理干預(yù)方法是有效的。這種心理干預(yù)方法對(duì)強(qiáng)迫癥的干預(yù)效果是理想的。

簡(jiǎn)介：乙型肝炎病毒HEPATITISBVIRUS，HBV，可引起由無癥狀病毒攜帶、急慢性肝炎、肝硬化至肝癌的一系列病變。Α干擾素INTERFERONCT，IFNA是目前最常用的治療乙型肝炎的藥物之一，它通過建立細(xì)胞內(nèi)抗病毒狀態(tài)和免疫調(diào)節(jié)作用抑制并清除病毒。但臨床發(fā)現(xiàn)約2／3的患者表現(xiàn)為對(duì)IFNOT治療無反應(yīng)，即沒有出現(xiàn)HBEAG消失和血清HBVDNA水平降低，這與HBVDNA聚合酶有關(guān)。FOSTER等發(fā)現(xiàn)，表達(dá)HBVDNA聚合酶的末端蛋白該“末端蛋白”事實(shí)上還包括部分SPACER區(qū)，見本文第2部分可顯著抑制細(xì)胞對(duì)IFNA反應(yīng)，并認(rèn)為是由TP表達(dá)阻斷IFNA通路引起，但其抗IFNA作用的功能區(qū)域迄今尚不清楚。為此，本研究擬通過構(gòu)建基因缺失突變體方式，研究并確定HBVDNA聚合酶末端蛋白抗IFNOT反應(yīng)的功能區(qū)域。這一研究不僅有助于深入闡明HBV抗IFNOT機(jī)制，還可為研制新的抗HBV藥物提供新思路。本研究的第一部分旨在建立肝細(xì)胞對(duì)IFNOT反應(yīng)強(qiáng)弱的定量判定標(biāo)準(zhǔn)。為此，將人類616基因一種IFNCT特異性反應(yīng)基因啟動(dòng)子區(qū)克隆到氯霉素乙?；D(zhuǎn)移酶CHLAMPHENICOLACETYLTRANSFERASE，CAT基因上游，構(gòu)建IFNA反應(yīng)報(bào)告載體P616CAT。結(jié)果表明，轉(zhuǎn)染該載體的HUH7肝細(xì)胞在IFNOT誘導(dǎo)后CAT表達(dá)量顯著增高，并與IFNOT刺激濃度呈劑量依賴關(guān)系。本研究的第二部構(gòu)建HBVDNA聚合酶末端蛋白包括SPACER區(qū)基因缺失突變體重組真核表達(dá)載體，并分別與報(bào)告載體P616CAT共轉(zhuǎn)染HUH7細(xì)胞，通過檢測(cè)轉(zhuǎn)染細(xì)胞中CAT表達(dá)量高低評(píng)價(jià)各缺失體抗IFNA作用。結(jié)果表明，HBVDNA聚合酶末端蛋白本身并無抗IFNCT作用，但末端蛋白SPACER區(qū)部分或全部具有明顯的抗IFNA作用。說明HBVDNA聚合酶SPACER區(qū)與HBV的抗IFNET作用密切相關(guān)。

簡(jiǎn)介：目的1研究新型陽離子磷酸膽堿聚合物MPC30DEA70能否作為攜帶小干擾RNASIRNA的載體并進(jìn)一步研究其發(fā)揮的生物學(xué)效應(yīng)。2觀察該載體攜帶針對(duì)乙型肝炎病毒HBVX基因的SIRNA在細(xì)胞水平能否抑制HBV的復(fù)制。方法①DAPI染核及四甲基偶氮唑鹽MTT比色法分析MPC30DEA70對(duì)HEPG2215的細(xì)胞毒性。②設(shè)計(jì)熒光素酶表達(dá)質(zhì)粒的小干擾SILUC以無熒光標(biāo)記的MPC30DEA70負(fù)載紅色熒光標(biāo)記的SILUC轉(zhuǎn)染HEPG2215細(xì)胞24、48H后熒光顯微鏡下拍照并計(jì)算在該細(xì)胞中的轉(zhuǎn)染效率。③在此基礎(chǔ)之上檢測(cè)48H時(shí)轉(zhuǎn)染細(xì)胞中的SILUC對(duì)熒光素酶基因表達(dá)的抑制效應(yīng)。④用同法轉(zhuǎn)染針對(duì)HBVX基因的小干擾SIHBVXRTPCR法檢測(cè)48H后HBVMRNA水平的變化并分別于24、48、72H后用ELASA法檢測(cè)細(xì)胞培養(yǎng)上清中的HBSAG實(shí)時(shí)熒光定量RCR技術(shù)對(duì)HBVDNA進(jìn)行定量檢測(cè)。結(jié)果①在本實(shí)驗(yàn)設(shè)定的05、1、3、5UG四個(gè)濃度下MPC30DEA70對(duì)HEPG2215細(xì)胞的毒性較小細(xì)胞存活率均在80％以上。②MPC30DEA70負(fù)載SILUC在48H的轉(zhuǎn)染效率可達(dá)到5233±20％而脂質(zhì)體負(fù)載的SILUC可達(dá)到5633±24％。③48H時(shí)轉(zhuǎn)染HEPG2215細(xì)胞中的SILUC能夠有效抑制熒光素酶質(zhì)粒的表達(dá)。③RTPCR法證實(shí)48H時(shí)以MPC30DEA70載體組SIHBVX與內(nèi)參ΒACTIN條帶灰度比值114±01與空白對(duì)照組251±02比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義與脂質(zhì)體組085±01比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義MPC30DEA70負(fù)載SIHBVX能夠降低細(xì)胞上清液中HBSAG水平和HBVDNA的水平。72H時(shí)檢測(cè)值分別為634±01NGML和400±03107COPICSML與空白細(xì)胞組的2286±15NGML和1290±02107COPIESML比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)論1MPC30DEA70攜帶的SIRNA能夠進(jìn)入HEPG2215細(xì)胞中且有著較高的轉(zhuǎn)染效率并發(fā)揮了一定的生物學(xué)效應(yīng)但抑制效果不及脂質(zhì)體組。2MPC30DEA70攜帶的SIRNA能夠進(jìn)入HEPG2215細(xì)胞中后能夠使HBVMRNA水平下降且與脂質(zhì)體組相當(dāng)。3該載體攜帶的針對(duì)HBVX基因的SIRNA對(duì)HBSAG、HBVDNA有一定的抑制作用但抑制效果不及脂質(zhì)體組明顯。

簡(jiǎn)介：背景人巨細(xì)胞病毒在全世界普遍存在，臨床癥狀主要發(fā)生于免疫系統(tǒng)發(fā)育不全或嚴(yán)重的免疫力缺乏患者。其包膜糖蛋白BGB在病毒感染及誘導(dǎo)機(jī)體免疫反應(yīng)中起重要作用，其中GBN1型是主要的致病型之一，在我國的HCMV感染者中占有明顯優(yōu)勢(shì)。目的制備能敏感且特異地識(shí)別HCMVGBN1型病毒株的抗體，為今后臨床檢測(cè)HCMVGBN1提供物質(zhì)基礎(chǔ)，并為HCMV疫苗的制備及HCMV的基礎(chǔ)研究提供了有力保障。實(shí)驗(yàn)方法根據(jù)GENBANK公布的序列M60929，利用計(jì)算機(jī)輔助設(shè)計(jì)，確定并人工合成GBN1抗原多肽，并用KEYHOLELIMPETHEMOCYANINKLH交聯(lián)以增強(qiáng)GBN1抗原多肽的免疫原性。將交聯(lián)KLH的GBN1抗原肽免疫新西蘭兔經(jīng)初次免疫和四次加強(qiáng)免疫后獲取免疫兔血清，親和純化法純化兔血清中抗GBN1抗體。采用直接ELISA法、免疫細(xì)胞化學(xué)染色法、WESTERNBLOT免疫沉淀法鑒定抗GBN1抗體的效價(jià)、反應(yīng)的特異性和敏感性。實(shí)驗(yàn)結(jié)果ELISA法，抗原交叉反應(yīng)等實(shí)驗(yàn)顯示，抗GBN1抗體能夠特異地識(shí)別HCMVTOWNE株GBN1型，制備的抗體效價(jià)164000，且與其它型別的HCMVAD169株及GBN3株不發(fā)生反應(yīng)。免疫細(xì)胞化學(xué)染色法鑒定結(jié)果顯示抗GBN1型抗體的特異性與PCR測(cè)定GBN1基因型的結(jié)果符合，而且與其他兩型GBN2型和GBN3型無交叉反應(yīng)。以HCMVTOWNE臨床分離株、HCMVAD169病毒株、HCMVGBN3型床分離株和正常細(xì)胞株為抗原，純化的抗GBN1抗體作為一抗進(jìn)行WESTERNBLOT分析顯示，抗GBN1抗體TOWNE株的制備蛋白反應(yīng)后在相對(duì)分子質(zhì)量約110KD處出現(xiàn)1條清晰條帶，符合HCMVGB的分子量。說明所制備的抗體可識(shí)別含有合成多肽相同片斷的HCMV，即GBN1型HCMV，而不識(shí)別其它型別的病毒株，證明抗GBN1抗體具有良好的特異性。結(jié)論本研究制備的抗HCMVGAN1抗體能敏感且特異地識(shí)別HCMVGBN1型病毒株。該抗體在今后HCMV感染的診斷、治療、病毒的結(jié)構(gòu)功能研究以及抗體分析等方面具有良好的應(yīng)用前景。

簡(jiǎn)介：目的針對(duì)2010版慢性乙型肝炎防治指南中，不建議抗病毒治療的非活動(dòng)性HBSAG攜帶者、輕度CHB患者、慢性HBV攜帶者，進(jìn)行中醫(yī)干預(yù)思路及方法的研究。方法①總結(jié)慢性乙型肝炎非抗病毒適應(yīng)癥患者的中西醫(yī)研究現(xiàn)狀，中醫(yī)“治未病”理論的相關(guān)內(nèi)容。提出在“治未病”理論的指導(dǎo)下對(duì)其進(jìn)行中醫(yī)藥干預(yù)治療的必要性。②通過411例慢性乙型肝炎非抗病毒適應(yīng)癥患者的臨床流行病學(xué)調(diào)查，初步分析其致病特點(diǎn)、病機(jī)規(guī)律，明確該類患者所屬的“未病”范疇，分析其臨床生存現(xiàn)狀。③在“欲病救萌”的思想指導(dǎo)下，收集國醫(yī)大師周仲瑛教授辨治慢性乙型肝炎非抗病毒適應(yīng)癥病案176例，運(yùn)用相關(guān)統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，總結(jié)周教授的臨床經(jīng)驗(yàn)和學(xué)術(shù)思想，初步探索該類患者的中醫(yī)干預(yù)思路及方法。結(jié)果①流行病學(xué)調(diào)查中，有71％的患者無明顯不適癥狀，其余患者的主要臨床癥狀（頻率＞10）依次為倦怠乏力、食欲不振、小便發(fā)黃、腹脹、惡心嘔吐、面色晦暗、失眠、口苦、脅不適。②臨床流行病學(xué)調(diào)查患者的病機(jī)證素分虛實(shí)兩端。實(shí)性病機(jī)證素主要為濕、熱、郁；虛性病機(jī)證素主要為氣虛。③周教授病案中568的患者無明顯不適癥狀，主要陽性癥狀（頻率＞10依次為尿黃、倦怠乏力、口干、大便溏、脅隱痛、脅痛、口苦、胃脘脹痛、脅脹痛。④周教授病案中，病位證素主要在肝、脾、腎；病性證素分虛實(shí)兩端，實(shí)性病機(jī)證素以濕熱瘀毒郁為主，虛性病機(jī)證素以氣虛、陰虛為主。⑤周教授治療該類患者的重要藥物組合主要為炙僵蠶、蟬衣、片姜黃、升麻、生甘草、虎杖。⑥周教授使用頻率超過25的藥物依次為醋柴胡、赤芍、垂盆草、蒲公英、廣郁金、虎杖、茵陳、白術(shù)、制香附、炒黃芩、丹參、葉下珠、苦參、太子參、厚樸、茯苓、炙甘草、片姜黃。結(jié)論①慢性乙型肝炎非抗病毒治療適應(yīng)癥患者應(yīng)當(dāng)歸屬為“未病”理論中的“欲病”范疇，需要干預(yù)治療。②慢性乙型肝炎非抗病毒適應(yīng)癥患者的基本病機(jī)特點(diǎn)為正虛邪實(shí)，正虛以脾氣虛、肝腎陰虛為主；邪實(shí)以濕、熱、瘀、毒、郁為主，各病機(jī)證素往往復(fù)合為患。③周教授辨治慢性乙型肝炎非抗病毒適應(yīng)癥患者的組方特色是升降疏化，補(bǔ)瀉同用。④辨證結(jié)合辨病是臨床發(fā)揮中西醫(yī)結(jié)合特色的契合點(diǎn)之一。周教授在藥物的選擇方面，在針對(duì)相應(yīng)病機(jī)的辨證論治基礎(chǔ)上，往往采用藥理研究具有抗病毒作用的藥物。

簡(jiǎn)介：上海交通大學(xué)碩士學(xué)位論文EB病毒對(duì)臍帶血樹突狀細(xì)胞分化和功能的影響姓名王璽申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別碩士專業(yè)兒科學(xué)指導(dǎo)教師陳同辛20070514上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院碩士研究生學(xué)位論文VI胞和DC。感染EBV后，臍帶血DC吞噬葡聚糖的能力降低；細(xì)胞表面分化和成熟標(biāo)記與正常對(duì)照相比表現(xiàn)為CD14分子的下調(diào)不明顯，而MHCⅡ類分子和協(xié)同刺激分子上調(diào)不明顯，MHCⅠ類分子的表達(dá)降低；細(xì)胞因子分泌的改變表現(xiàn)為L(zhǎng)PS刺激后細(xì)胞分泌的IL6、IL10和TNFΑ不增高，而TGFΒ1在EBV感染后分泌增高，同時(shí)EBV還抑制了IL12P35和IFNΓ的MRNA表達(dá)。結(jié)論結(jié)論單核細(xì)胞和未成熟DC均可被EBV感染，并且由于成人外周血單核細(xì)胞和DC內(nèi)LMP1蛋白MRNA的拷貝數(shù)明顯高于臍帶血單核細(xì)胞和DC，推測(cè)EBV在成人外周血單核細(xì)胞和未成熟DC內(nèi)更易復(fù)制。EBV抑制了DC的吞噬功能，阻礙了DC的分化和成熟，使DC攝取處理抗原和提呈抗原的能力受損。MHCI類分子的降低導(dǎo)致在控制EBV感染中發(fā)揮關(guān)鍵性作用的MHCI類分子限制性的CD8＋細(xì)胞毒性T細(xì)胞功能受損。此外，EBV還使DC分泌抑制性細(xì)胞因子增加，抑制了宿主免疫，并且使免疫應(yīng)答反應(yīng)向T輔助細(xì)胞2方向偏移，削弱了細(xì)胞免疫功能，以上因素均可導(dǎo)致EBV逃逸宿主免疫。關(guān)鍵詞新生兒，臍帶血，EB病毒，樹突狀細(xì)胞，分化，功能

簡(jiǎn)介：目的認(rèn)知能力是指接收、加工、儲(chǔ)存和提取信息的能力，是人們成功的完成活動(dòng)最重要的心理?xiàng)l件。優(yōu)秀的認(rèn)知功能也是殲擊機(jī)飛行員所必備的心理品質(zhì)。殲擊機(jī)飛行員在人員組成、學(xué)歷、生活經(jīng)歷、智力、工作性質(zhì)等方面與普通人群有著顯著差別，所以，針對(duì)普通大眾而研制的基本認(rèn)知能力測(cè)驗(yàn)應(yīng)用于殲擊機(jī)飛行員這一特群體時(shí)其信效度如何以及如何原評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)區(qū)分度的如何等本研究旨在通過殲擊機(jī)飛行員基本認(rèn)知能力測(cè)驗(yàn)進(jìn)行信效度分析，為測(cè)驗(yàn)提供重要的理論依據(jù)指導(dǎo)，并為之制定常模及較為合理的評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)。方法采用中科院心理所制定的基本認(rèn)知能力測(cè)驗(yàn)系統(tǒng)（20版），在全軍南北共十五個(gè)建制飛行單位來院體檢人員中，采用分層（計(jì)算機(jī)化）隨機(jī)的方法抽取殲擊機(jī)飛行員378名進(jìn)行測(cè)試。結(jié)果①各分量表重測(cè)信度高，相關(guān)系數(shù)分別是數(shù)字拷貝R098（P﹤001）漢字比較R080（P﹤001）心算R081（P﹤005）漢字旋轉(zhuǎn)R063（P﹤005）數(shù)字工作R089（P﹤001）雙字詞再認(rèn)R059（P﹤001）無意義圖形再認(rèn)R052（P﹤005）。②因素分析發(fā)現(xiàn)基本認(rèn)知能力測(cè)驗(yàn)存在六個(gè)緯度，分別是數(shù)字拷貝、雙字詞再認(rèn)、數(shù)字加工、數(shù)字工作、漢字比較、心算。③第1年齡組在知覺速度高于第2年齡組（P﹤005）；心理旋轉(zhuǎn)和字詞、圖形記憶能力低于第2年齡組（P﹤005）。心算效率和工作記憶在兩個(gè)年齡組沒有明顯差異。④樣本在標(biāo)準(zhǔn)九分轉(zhuǎn)化表中分布情況接近理論分布。結(jié)論1、殲擊機(jī)飛行員“基本認(rèn)知能力測(cè)驗(yàn)”信效度較好，可以用于殲擊機(jī)飛行員的認(rèn)知功能的研究測(cè)試。2、年輕殲擊機(jī)飛行員的基本認(rèn)知綜合能力隨著年齡的增長(zhǎng)而增長(zhǎng)，在29歲左右達(dá)到峰值，然后緩慢下降，在36歲左右開始出現(xiàn)明顯下降趨勢(shì)。3、殲擊機(jī)飛行員基本認(rèn)知五個(gè)方面的能力，變化并不一致。知覺速度能力出現(xiàn)衰退較早，心理旋轉(zhuǎn)和字詞、圖形記憶能力則會(huì)隨年齡的增長(zhǎng)有一定的增長(zhǎng)，而心算效率和工作記憶兩個(gè)方面的能力則保持相對(duì)穩(wěn)定。4、樣本測(cè)試結(jié)果參照本研究制定的常模得分，殲擊機(jī)飛行員在標(biāo)準(zhǔn)九分轉(zhuǎn)化表中得分分布情況較為合理，等級(jí)定位較為明確，有利于評(píng)價(jià)，甄別優(yōu)劣。