2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、乳腺癌是女性最常見的惡性腫瘤之一,其發(fā)病率逐年上升,在歐美國家乳腺癌占女性惡性腫瘤的25%~30%。在我國,乳腺癌發(fā)病率已上升為女性惡性腫瘤第一位。了解乳腺癌發(fā)生、發(fā)展的分子機制對有效治療乳腺癌,從而提高患者生存率有重要意義。因此,找到與乳腺癌診斷、分期和治療相關(guān)的特異性生物學(xué)標(biāo)志是一項重要的工作。
  膜聯(lián)蛋白家族(Annexin,ANX)屬于Ca(2+)調(diào)節(jié)的磷脂和膜結(jié)合蛋白,在細(xì)胞中參與膜轉(zhuǎn)運及膜表面一系列依賴于鈣調(diào)蛋白的活

2、動,并調(diào)控炎癥反應(yīng)、細(xì)胞分化和細(xì)胞骨架蛋白間的相互作用。ANX表達失調(diào)與人類疾病相關(guān),其在腫瘤的發(fā)生、發(fā)展中可介導(dǎo)細(xì)胞信號通路、細(xì)胞運動,與腫瘤的侵襲轉(zhuǎn)移、血管生成、細(xì)胞凋亡及抗藥性有關(guān)。家族成員膜聯(lián)蛋白A3(Annexin A3,ANXA3)在腫瘤的形成、增殖、凋亡和信號轉(zhuǎn)導(dǎo)形成過程中都扮演著重要角色,ANXA3表達水平的改變,對腫瘤發(fā)生發(fā)展、轉(zhuǎn)移、耐藥性有重要影響。然而,ANXA3在不同腫瘤中的表達模式不同,提示ANXA3在不同腫瘤

3、發(fā)生發(fā)展中可能起不同作用。如ANXA3表達上調(diào)與卵巢癌的耐藥性、結(jié)直腸癌和胰腺癌的發(fā)生、發(fā)展以及肺腺癌、肝癌的轉(zhuǎn)移呈正相關(guān)性;而ANXA3表達水平下調(diào)則表現(xiàn)為促進前列腺癌的發(fā)生、發(fā)展。因此,ANXA3可能成為腫瘤治療的靶標(biāo),是一種潛在的與腫瘤細(xì)胞增殖、凋亡和信號轉(zhuǎn)導(dǎo)及患者預(yù)后相關(guān)的生物學(xué)標(biāo)志物。然而, ANXA3在乳腺癌中的表達、功能及作用機制仍不十分清楚。
  本研究分四部分對ANXA3在乳腺癌增殖及侵襲轉(zhuǎn)移中的作用機制進行研究

4、:
  第一部分:通過免疫組化Max Vision TM一步法檢測原發(fā)性乳腺癌組織中ANXA3的表達情況,回顧性分析ANXA3與患者臨床生物學(xué)特性的相關(guān)性。
  第二部分:通過應(yīng)用熒光定量RT-PCR法、western-blot技術(shù)檢測乳腺癌組織及正常乳腺組織中ANXA3 mRNA及蛋白表達水平,分析其與臨床生物學(xué)特性的關(guān)系;采用流式細(xì)胞術(shù)方法檢測乳腺癌組織及正常乳腺組織細(xì)胞周期,分析乳腺癌組織中ANXA3mRNA及蛋白表達

5、水平與細(xì)胞增殖指數(shù)的相關(guān)性,旨在探討ANXA3在乳腺癌發(fā)展及轉(zhuǎn)移中的作用。
  第三部分:采用 RNA干擾技術(shù)抑制乳腺癌 MDA-MB-231細(xì)胞ANXA3基因表達,通過流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞周期及細(xì)胞凋亡;細(xì)胞劃痕實驗檢測轉(zhuǎn)染后細(xì)胞遷移能力;Transwell實驗檢測轉(zhuǎn)染后細(xì)胞侵襲能力,旨在探討ANXA3對乳腺癌細(xì)胞增殖及侵襲的影響。
  第四部分:建立乳腺癌細(xì)胞裸鼠皮下移植瘤模型,通過繪制腫瘤生長曲線、應(yīng)用活體成像技術(shù)、HE

6、染色分析、流式細(xì)胞術(shù)及熒光定量RT-PCR等方法觀察抑制ANXA3對移植瘤生長的影響。
  第一部分乳腺癌組織中膜聯(lián)蛋白A3表達與其臨床生物學(xué)特性關(guān)系的研究
  目的:本研究通過免疫組化Max Vision TM一步法檢測原發(fā)性乳腺癌組織中膜聯(lián)蛋白A3(Annexin A3, ANXA3)的表達情況,分析ANXA3與患者臨床生物學(xué)特性的相關(guān)性,探討ANXA3在乳腺癌診治中的臨床價值。
  方法:收集2009年1月至20

7、09年12月河北醫(yī)科大學(xué)第四醫(yī)院乳腺中心收治的、經(jīng)病理確診且有完整隨訪資料的309例原發(fā)性乳腺癌患者石蠟包埋組織標(biāo)本。入選病例均為女性,年齡22-76歲,中位年齡為47歲。通過免疫組化Max Vision TM一步法檢測原發(fā)性乳腺癌組織中ANXA3的表達情況,分別將患者按照年齡(<50歲145例、≥50歲164例)、月經(jīng)狀況(絕經(jīng)前158例、絕經(jīng)后151例)、腫瘤大?。ā?cm117例、>2cm且≤5cm160例、>5cm32例)、淋巴

8、結(jié)轉(zhuǎn)移(無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移129例、轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)1~3枚108例、轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)>3枚72例)、臨床TNM分期(Ⅰ期54例、Ⅱ期221例、Ⅲ期34例)、組織學(xué)分級(Ⅰ級35例、Ⅱ級192例、Ⅲ級82例)、分子亞型(Luminal A型65例、Luminal B型148例、HER2過表達型37例、三陰性59例)進行分組,分析ANXA3與上述臨床生物學(xué)特性的相關(guān)性。所有病例均由乳腺中心進行電話隨訪,隨訪時間截止至2015年6月,計算患者無病生存期(DF

9、S)及總生存期(OS)。采用COX回歸模型進行多因素分析,觀察ANXA3及各臨床生物學(xué)特性與患者預(yù)后的關(guān)系。
  結(jié)果:
  1.無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移1~3枚組和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移>3枚組ANXA3陽性表達率分別是51.94%,67.59%,73.61%,三組間陽性表達率的差異有統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=11.123,P<0.05)。
  2.根據(jù)術(shù)后病理組織學(xué)分級,分為Ⅰ級組、Ⅱ級組、Ⅲ級組ANXA3陽性表達率分別是31.42

10、%,65.10%,69.51%,三組間ANXA3陽性表達率的差異有統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=16.686,P<0.05)。
  3.ANXA3表達水平與年齡、月經(jīng)狀況、腫瘤大小及臨床TNM分期無關(guān)(P>0.05)。Luminal A型、Luminal B型、HER2過表達型、三陰性型ANXA3陽性表達率分別是58.46%,58.11%,59.46%,79.66%,ANXA3在三陰性乳腺癌患者中陽性表達率(79.66%)明顯高于其他類型(χ

11、2=9.226,P<0.05)。
  4.截止至2015年6月,309例患者隨訪時間為66~78個月,中位隨訪時間71個月。71個月DFS為68.93%(213/309),死亡58例,71個月OS為81.23%(251/309),采用COX回歸模型進行多因素分析,結(jié)果顯示淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移數(shù)量和ANXA3表達水平則被分別認(rèn)定為影響DFS和OS的獨立危險因素,兩者對DFS的相關(guān)危險度分別為2.181和1.569,對OS的相關(guān)危險度分別是2.

12、052和1.698。
  結(jié)論:
  1.ANXA3表達水平與乳腺癌患者年齡、月經(jīng)狀況、腫瘤大小及臨床TNM分期無關(guān)。
  2.ANXA3表達水平與乳腺癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移數(shù)量、組織學(xué)分級及分子分型有關(guān),在淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移>3枚、組織分化Ⅲ級及三陰性乳腺癌患者中陽性表達率提高。
  3.ANXA3陽性表達者DFS低于陰性表達者,兩者間OS的差異無統(tǒng)計學(xué)意義,但ANXA3陽性表達者OS有降低趨勢。
  4.淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移數(shù)量和

13、ANXA3表達水平則被分別認(rèn)定為影響乳腺癌患者DFS和OS的獨立危險因素。
  5.ANXA3可作為潛在判斷乳腺癌生物學(xué)行為、指導(dǎo)判斷患者無病生存期及總生存期的生物學(xué)標(biāo)志物。
  第二部分:膜聯(lián)蛋白A3mRNA及蛋白在正常乳腺組織及乳腺癌組織中的表達及意義
  目的:分析膜聯(lián)蛋白A3(Annexin A3,ANXA3)mRNA及蛋白在正常乳腺組織及不同分化程度乳腺癌組織中的表達,探討ANXA3在乳腺癌發(fā)生、發(fā)展及轉(zhuǎn)移中

14、的作用及意義。
  方法:選取河北醫(yī)科大學(xué)第四醫(yī)院乳腺中心2015年4月至2015年10月資料完整的乳腺癌組織標(biāo)本81例,患者均為女性,年齡29~80歲,中位年齡50歲。依照第三版WHO制定的病理分類方案,術(shù)后病理:浸潤性導(dǎo)管癌66例、浸潤性小葉癌4例、浸潤性導(dǎo)管-小葉混合癌2例,篩狀癌1例、分泌性癌1例,導(dǎo)管內(nèi)癌7例;依照2010年AJCC第7版TNM分期,Ⅰ期11例、Ⅱ期50例、Ⅲ期19例、IV期1例;于常規(guī)取材時,在距癌灶>

15、7cm處隨機切取乳腺組織0.5cm×0.5cm大小,并經(jīng)病理診斷證實為正常腺體組織,作為對照組。采用熒光定量RT-PCR法檢測乳腺癌組織及正常乳腺組織中ANXA3 mRNA水平;利用western-blot技術(shù)檢測乳腺癌組織及正常乳腺組織中ANXA3蛋白表達水平;分析乳腺癌組織中ANXA3 mRNA和蛋白表達水平與年齡、月經(jīng)狀況、臨床分期、腫瘤大小、病理組織學(xué)分級、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移狀況、分子分型等臨床生物學(xué)指標(biāo)的關(guān)系。采用流式細(xì)胞術(shù)方法檢測乳

16、腺癌組織及正常乳腺組織細(xì)胞周期,比較乳腺癌組織與正常乳腺組織細(xì)胞增殖指數(shù)及ANXA3 mRNA及蛋白表達水平與細(xì)胞增殖指數(shù)的相關(guān)性。
  結(jié)果:
  1.乳腺癌組織中ANXA3 mRNA水平(0.0667±0.0314)顯著高于正常乳腺組織中ANXA3 mRNA水平(0.0273±0.0268)(P<0.01)。ANXA3蛋白在乳腺癌組織中表達水平(0.68±0.10)顯著高于在乳腺正常組織中的表達(0.25±0.07)(P

17、<0.01)。
  2.乳腺癌患者淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移數(shù)量>3個者ANXA3 mRNA水平(0.0815±0.0306)顯著高于無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者(0.0577±0.0363),亦高于淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移數(shù)量1~3個者(0.0733±0.0030)(P<0.05)。有脈管瘤栓者ANXA3 mRNA水平(0.0841±0.0321)高于無脈管瘤栓者(0.0607±0.0232)(P<0.05)。乳腺癌組織中ANXA3 mRNA及蛋白表達水平均與年齡、月經(jīng)狀

18、況、臨床TNM分期、腫瘤大小及組織學(xué)分級無關(guān)(P>0.05)。
  3.三陰性乳腺癌患者ANXA3 mRNA水平(0.0943±0.0281)高于Luminal A型者(0.0627±0.0185)、Luminal B型者(0.0631±0.0301)、HER2過表達者(0.0647±0.0434)(P<0.05)。乳腺癌患者淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移數(shù)量>3個者ANXA3蛋白表達水平(0.76±0.09)顯著高于無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者(0.65±0.0

19、8)、亦高于淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移數(shù)量1~3個者(0.68±0.12)(P<0.05),有脈管瘤栓者ANXA3蛋白表達水平(0.71±0.10)高于無脈管瘤栓者(0.65±0.09)(P<0.05),三陰性乳腺癌患者ANXA3蛋白表達水平(0.81±0.06)高于Luminal A型者(0.64±0.10)、Luminal B型者(0.67±0.10)、HER2過表達者(0.69±0.13)(P<0.05)。
  4.乳腺癌組織G0/1期細(xì)胞

20、為(58.85±9.32)%, S期細(xì)胞為(20.09±13.16)%,G2/M期細(xì)胞為(21.06±13.69)%;正常乳腺組織G0/1期細(xì)胞為(82.52±3.86)%,S期細(xì)胞為(6.57±5.37)%,G2/M期細(xì)胞為(10.91±5.70)%。與正常乳腺組織相比,乳腺癌組織G0/1期細(xì)胞顯著降低(P<0.01)。乳腺癌組織細(xì)胞增殖指數(shù)(41.15±9.32)%較正常乳腺組織細(xì)胞增殖指數(shù)(17.48±3.86)%顯著增高(P<0

21、.01)。
  5.乳腺癌組織中ANXA3 mRNA及蛋白表達水平與細(xì)胞增殖指數(shù)呈正相關(guān)性,(Pearson相關(guān)系數(shù)=0.304,P=0.006;Pearson相關(guān)系數(shù)=0.341, P=0.002)。
  結(jié)論:
  1.乳腺癌組織中ANXA3 mRNA及蛋白表達水平顯著高于正常乳腺組織。
  2.乳腺癌組織中ANXA3mRNA及蛋白表達水平與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移狀態(tài)有關(guān),在淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移數(shù)量>3個組表達最高;有脈管瘤栓者A

22、NXA3mRNA及蛋白表達水平高于無脈管瘤栓者;三陰性乳腺癌ANXA3mRNA及蛋白表達水平高于其他分子分型。
  3.乳腺癌組織中ANXA3 mRNA及蛋白表達水平與細(xì)胞增殖指數(shù)呈正相關(guān)性。
  4.乳腺癌組織中ANXA3mRNA及蛋白表達水平與患者年齡、月經(jīng)狀況、腫瘤大小及臨床TNM分期、病理組織學(xué)分級無關(guān)。ANXA3可能參與并促進了乳腺癌的發(fā)生、發(fā)展及增殖、轉(zhuǎn)移的過程。
  第三部分:膜聯(lián)蛋白A3對乳腺癌細(xì)胞增殖

23、及侵襲影響的研究
  目的:本部分以乳腺癌細(xì)胞株為研究對象進一步觀察乳腺癌細(xì)胞株中膜聯(lián)蛋白A3(Annexin A3,ANXA3)表達及抑制ANXA3表達后乳腺癌細(xì)胞增殖、凋亡、遷移及侵襲能力的改變,探討ANXA3在乳腺癌細(xì)胞增殖、凋亡、遷移及侵襲中的作用機制。
  方法:選取高侵襲性人乳腺癌細(xì)胞株MDA-MB-231及低侵襲性人乳腺癌細(xì)胞株MCF-7,熒光定量RT-PCR檢測MDA-MB-231及MCF-7細(xì)胞中ANXA3

24、 mRNA水平;western-blot方法檢測MDA-MB-231及MCF-7細(xì)胞中ANXA3蛋白表達水平。選擇高表達ANXA3的MDA-MB-231細(xì)胞株進一步實驗。成功構(gòu)建了3個針對ANXA3基因的shRNA質(zhì)粒,經(jīng)脂質(zhì)體法轉(zhuǎn)染MDA-MB-231細(xì)胞,發(fā)現(xiàn)ANXA3-sh2對MDA-MB-231細(xì)胞中 ANXA3mRNA抑制效率最高。篩選出穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞命名為MDA-MB-231-Sh,轉(zhuǎn)染NC質(zhì)粒的細(xì)胞命名為MDA-MB-231

25、-NC。實驗分為三組觀察:轉(zhuǎn)染組為轉(zhuǎn)染ANXA3-sh2質(zhì)粒的MDA-MB-231-Sh,空轉(zhuǎn)組為轉(zhuǎn)染陰性對照質(zhì)粒的MDA-MB-231-NC,對照組為未轉(zhuǎn)染質(zhì)粒的MDA-MB-231。western-blot方法檢測三組ANXA3蛋白表達。流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞周期及細(xì)胞凋亡;細(xì)胞劃痕實驗檢測轉(zhuǎn)染后細(xì)胞遷移能力;Transwell實驗檢測轉(zhuǎn)染后細(xì)胞侵襲能力。
  結(jié)果:
  1.MDA-MB-231細(xì)胞ANXA3 mRNA相對

26、表達量(0.0696±0.0248)與MCF-7細(xì)胞ANXA3 mRNA相對表達量(0.0236±0.0149)相比顯著增高(P<0.01)。MDA-MB-231細(xì)胞ANXA3蛋白相對表達量(0.76±0.02)顯著高于MCF-7細(xì)胞中ANXA3蛋白相對表達量(0.40±0.02)(P<0.01)。
  2.轉(zhuǎn)染組(MDA-MB-231-Sh)細(xì)胞中ANXA3蛋白表達量顯著低于空轉(zhuǎn)組(MDA-MB-231-NC)及對照組(MDA-

27、MB-231)細(xì)胞中的表達量(P<0.01)。
  3.流式細(xì)胞術(shù)檢測轉(zhuǎn)染細(xì)胞增殖周期結(jié)果顯示,轉(zhuǎn)染組(MDA-MB-231-Sh)中G0/1期細(xì)胞為(59.27±0.87)%,S期細(xì)胞為(24.73±1.68)%, G2/M期細(xì)胞為(15.93±1.15)%;空轉(zhuǎn)組(MDA-MB-231-NC)細(xì)胞中G0/1期細(xì)胞為(53.63±1.80)%,S期細(xì)胞為(31.60±2.17)%,G2/M期細(xì)胞為(14.08±0.35)%;對照

28、組(MDA-MB-231)細(xì)胞中G0/1期細(xì)胞為(52.40±2.91)%,S期細(xì)胞為(34.60±3.56)%,G2/M期細(xì)胞為(13.00±1.48)%。轉(zhuǎn)染組(MDA-MB-231-Sh)細(xì)胞G0/1期顯著高于空轉(zhuǎn)組(MDA-MB-231-NC)及對照組(MDA-MB-231)細(xì)胞 G0/1期(P<0.05)。MDA-MB-231-Sh細(xì)胞增殖指數(shù)(Proliferation Index, PI)(40.67±0.93)%顯著低于

29、MDA-MB-231-NC(46.40±1.85)%及MDA-MB-231細(xì)胞PI值(47.60±2.91)%(P<0.05)。流式細(xì)胞術(shù)檢測轉(zhuǎn)染細(xì)胞凋亡率結(jié)果顯示,轉(zhuǎn)染組(MDA-MB-231-Sh)細(xì)胞凋亡率(6.73±0.33)%顯著高于空轉(zhuǎn)組(MDA-MB-231-NC)(3.58±0.23)%及對照組(MDA-MB-231)細(xì)胞(3.09±0.33)%(P<0.01)。
  4.細(xì)胞劃痕實驗顯示轉(zhuǎn)染組(MDA-MB-23

30、1-Sh)細(xì)胞遷移能力低于空轉(zhuǎn)組(MDA-MB-231-NC)及對照組(MDA-MB-231)細(xì)胞。Transwell侵襲實驗顯示轉(zhuǎn)染組(MDA-MB-231-Sh)細(xì)胞穿膜細(xì)胞數(shù)少于空轉(zhuǎn)組(MDA-MB-231-NC)及對照組(MDA-MB-231)細(xì)胞。
  結(jié)論:
  1.高侵襲性人乳腺癌細(xì)胞株MDA-MB-231中ANXA3 mRNA及蛋白表達水平均高于低侵襲性人乳腺癌細(xì)胞株MCF-7。
  2.成功構(gòu)建了3個

31、針對ANXA3基因的shRNA質(zhì)粒,其中H_ANXA3-sh2轉(zhuǎn)染效率最高,抑制ANXA3效果最好。
  3.通過抑制ANXA3表達MDA-MB-231細(xì)胞細(xì)胞凋亡率顯著升高而細(xì)胞增殖指數(shù)顯著降低,侵襲、遷移能力下降。ANXA3亦有可能成為一個可用于乳腺癌診斷、治療和預(yù)后評估的潛在的生物學(xué)標(biāo)志物。
  第四部分:膜聯(lián)蛋白A3對乳腺癌細(xì)胞裸鼠皮下移植瘤生長影響的研究
  目的:建立乳腺癌細(xì)胞裸鼠皮下移植瘤模型,觀察抑制膜

32、聯(lián)蛋白A3(Annexin A3,ANXA3)表達對乳腺癌細(xì)胞皮下移植瘤生長的影響,進而驗證ANXA3對乳腺癌細(xì)胞增殖的調(diào)控作用。
  方法:使用第三部分實驗中制備的乳腺癌細(xì)胞MDA-MB-231、MDA-MB-231-sh及MDA-MB-231-NC,建立荷瘤裸鼠動物模型。將18只裸鼠隨機分為3組,每組6只,接種MDA-MB-231細(xì)胞者為對照組;接種MDA-MB-231-NC細(xì)胞者為空轉(zhuǎn)組;接種MDA-MB-231-sh細(xì)胞者

33、為轉(zhuǎn)染組。自皮下移植瘤開始生長起持續(xù)觀察4周,記錄三組裸鼠的精神、飲食及排便情況,每周測量一次裸鼠的體重及皮下種植瘤的長、短徑,繪制腫瘤生長曲線。應(yīng)用活體成像技術(shù)檢測皮下移植瘤活性程度。HE染色分析三組移植瘤組織結(jié)構(gòu)。采用流式細(xì)胞術(shù)及熒光定量RT-PCR檢測裸鼠皮下移植瘤的細(xì)胞增殖周期及ANXA3 mRNA水平,記錄并比較上述指標(biāo)在三組裸鼠間的差異。
  結(jié)果:
  1.三組裸鼠分別接種MDA-MB-231、MDA-MB-2

34、31-NC及MDA-MB-231-Sh細(xì)胞后,10d左右開始成瘤,成瘤率達100%。
  2.生長曲線顯示:轉(zhuǎn)染組裸鼠皮下移植瘤較對照組及空轉(zhuǎn)組生長緩慢?;铙w成像技術(shù)檢測顯示:轉(zhuǎn)染組移植瘤生長活性低于對照組及空轉(zhuǎn)組。轉(zhuǎn)染組皮下移植瘤質(zhì)量及體積[(58.55±31.92)mg及(90.62±74.44) mm3]與對照組[(222.40±133.40)mg及(239.30±110.90) mm3]及空轉(zhuǎn)組[(239.30±110.9

35、0)mg及(406.72±95.23) mm3]相比,皮下移植瘤質(zhì)量及體積顯著降低, P<0.01。
  3.HE染色顯示:對照組及空轉(zhuǎn)組皮下移植瘤組織細(xì)胞豐富,核分裂象多見,瘤組織中有豐富的血管;轉(zhuǎn)染組皮下移植瘤細(xì)胞稀疏,有大量纖維結(jié)締組織增生,瘤組織間血管較少。
  4.轉(zhuǎn)染組裸鼠皮下移植瘤細(xì)胞中ANXA3 mRNA水平(0.0071±0.0021)顯著低于對照組(0.0671±0.0087)及空轉(zhuǎn)組(0.0698±0.

36、0104),P<0.01。轉(zhuǎn)染組裸鼠皮下移植瘤細(xì)胞中ANXA3蛋白表達水平(0.26±0.02)顯著低于對照組(0.72±0.04)及空轉(zhuǎn)組(0.71±0.06),P<0.01。
  5.流式細(xì)胞術(shù)檢測結(jié)果顯示,轉(zhuǎn)染組G0/1期細(xì)胞為(73.84±3.92)%, S期細(xì)胞為(5.57±1.60)%,G2/M期細(xì)胞為(20.41±4.85)%;對照組G0/1期細(xì)胞為(57.43±2.60)%,S期細(xì)胞為(23.15±2.29)%,G

37、2/M期細(xì)胞為(19.41±1.39)%;空轉(zhuǎn)組G0/1期細(xì)胞為(57.57±2.97)%,S期細(xì)胞為(23.63±3.79)%,G2/M期細(xì)胞為(18.81±1.94)%。轉(zhuǎn)染組裸鼠皮下移植瘤細(xì)胞增殖指數(shù)(26.17±3.92)%顯著低于對照組(42.57±2.60)%及空轉(zhuǎn)組(42.43±2.97)%,P<0.01,而轉(zhuǎn)染組G0/1期細(xì)胞顯著高于對照組及空轉(zhuǎn)組,P<0.01。
  結(jié)論:
  1.抑制MDA-MB-231

38、細(xì)胞ANXA3表達后,可使轉(zhuǎn)染組裸鼠皮下移植瘤較對照組及空轉(zhuǎn)組生長緩慢,且皮下移植瘤質(zhì)量及體積顯著降低,活性程度降低;HE染色下觀察轉(zhuǎn)染組皮下移植瘤細(xì)胞稀疏,有大量的纖維結(jié)締組織增生,瘤組織間血管較少。
  2.轉(zhuǎn)染組裸鼠皮下移植瘤細(xì)胞中ANXA3 mRNA及蛋白表達水平顯著低于對照組及空轉(zhuǎn)組。
  3.轉(zhuǎn)染組裸鼠皮下移植瘤細(xì)胞增殖指數(shù)較對照組及空轉(zhuǎn)組顯著降低,而G0/1期細(xì)胞顯著升高。
  4.沉默乳腺癌MDA-MB

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