硫化氫改善腎血管性高血壓大鼠子代對血管緊張素Ⅱ的反應(yīng)性.pdf

1、目的：通過圍產(chǎn)期或出生后外源性給予硫氫化鈉（NaHS）,觀察能否改善腎血管性高血壓（RVH)大鼠子代的血壓，臨界高血壓患病率以及對血管緊張素Ⅱ（AngⅡ）的反應(yīng)性。
　　方法：⑴模型制備：常規(guī)制備兩腎-夾腎血管性高血壓動(dòng)物模型。⑵實(shí)驗(yàn)分為四組：正常 SD大鼠子代組（FSD），腎血管性高血壓大鼠子代組（F1NF2N），腎血管性高血壓大鼠親代硫化氫（hydrogen sulfide, H2S）治療組（F1HF2N），腎血管性高血壓大鼠

2、子代H2S治療組（F1NF2H），其中，F(xiàn)1HF2N組親代雌鼠圍產(chǎn)期（懷孕開始至哺乳期結(jié)束）每天腹腔注射56 umol/Kg NaHS（H2S供體）；F1NF2H組孕鼠圍產(chǎn)期不做處理，生產(chǎn)后子鼠5周開始，每天腹腔注射56 umol/Kg NaHS。⑶所有子代大鼠從產(chǎn)后8周開始，采用鼠尾動(dòng)脈測壓系統(tǒng)測量清醒狀態(tài)下大鼠的尾動(dòng)脈收縮壓（systolic blood pressure, SBP）,每2周測一次血壓，至16周。⑷側(cè)腦室置管，應(yīng)用腦

3、立體定位儀，按照Paxinos&Watson大鼠腦立體定位圖譜，右側(cè)腦室植入套管，通過聚乙烯管連接微量注射泵向側(cè)腦室注射AngⅡ。⑸連接Powerlab生物信號采集系統(tǒng),實(shí)時(shí)記錄大鼠右側(cè)股動(dòng)脈平均血壓（mean blood pressure, MAP），心率（heart rate, HR）和左側(cè)腎神經(jīng)傳出放電（renal sympathetic nerve activity, RSNA)的變化。⑹通過Western blot技術(shù)檢測孤束

4、核（nucleus tractus solitarii, NTS）血管緊張素II受體1（angiotensin II type1 receptor, AT1R）、血管緊張素受體偶聯(lián)蛋白（angiotensin receptor associated protein, ATRAP)及氧化應(yīng)激相關(guān)蛋白Nox2, p67phox,Nitrotyrosine(NT)的表達(dá)。
　　結(jié)果：①F1NF2N組雄性子代大鼠8～16周收縮壓（SBP）

5、，臨界高血壓患病率均大于正常雄性子代FSD組，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。圍產(chǎn)期或出生后外源性給予NaHS后，F(xiàn)1HF2N組和F1NF2H組雄性子代大鼠的收縮壓及臨界高血壓患病率較F1NF2N組明顯下降，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。②F1NF2N組雌性子代大鼠8～16周收縮壓均高于正常雌性子代FSD組，有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。圍產(chǎn)期外源性給予NaHS后，F(xiàn)1HF2N組雌性子代大鼠8周時(shí)血壓明顯低于F1NF2N組；出生后外源性給予NaHS后，F(xiàn)1NF2H組雌性子代大鼠16

6、周時(shí)血壓較F1NF2N組明顯下降，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。各組雌性子代大鼠8～16周臨界高血壓患病率均無明顯差異。③雄性子代大鼠側(cè)腦室微量注射 AngⅡ10ng后，BP，HR和 RSNA均增加，且 F1NF2N組雄性子代大鼠 MAP，RSNA升高幅度顯著大于 FSD組(ΔMAP：10.83±0.48 vs.8.17±0.70 mmHg；ΔRSNA：25.90±2.53％vs.16.78±1.70％，P＜0.05）。與F1NF2N組相比，F(xiàn)1HF2

7、N組和F1NF2H組雄性子代大鼠對 AngⅡ的反應(yīng)性明顯下降（ F1HF2N組ΔMAP：8.33±0.61 mmHg；ΔRSNA：16.42±1.98％；F1NF2H組ΔMAP：8.17±0.60 mmHg；ΔRSNA：16.68±2.41％，P＜0.05）。側(cè)腦室微量注射 AngⅡ30ng時(shí)，各組雄性子代大鼠對 AngⅡ的反應(yīng)性趨勢同 AngⅡ10ng，而且 BP，HR和RSNA升高幅度更加明顯。各組雄性子代大鼠的心率變化無明顯差異。

8、④雌性子代大鼠側(cè)腦室微量注射 AngⅡ10ng后，BP，HR和 RSNA均增加，但各組之間無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。側(cè)腦室微量注射 AngⅡ30ng后，各組雌性子代BP，HR，RSNA升高幅度明顯增加，且F1NF2N組雌性子代大鼠對AngⅡ的反應(yīng)性顯著大于FSD組(ΔMAP：10.83±0.60 vs.8.08±0.45 mmHg；ΔRSNA：26.88±2.61％ vs.19.59±1.50％，P＜0.05）。與F1NF2N組相比，F(xiàn)1HF2N組

9、和 F1NF2H組雌性子代大鼠對 AngⅡ的反應(yīng)性明顯下降（F1HF2N組ΔMAP：7.67±0.84 mmHg；ΔRSNA：19.78±1.50％；F1NF2H組ΔMAP：7.50±0.67 mmHg；ΔRSNA：18.82±2.25％，P＜0.05）。各組雌性子代大鼠的心率變化無明顯差異。⑤Western blot結(jié)果顯示,與FSD組相比，F(xiàn)1NF2N組雄性子代大鼠NTS區(qū)AT1R，Nox2，p67phox，NT蛋白表達(dá)明顯增多，A

10、TRAP蛋白表達(dá)明顯降低，有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。F1HF2N組和F1NF2H組雄性子代大鼠NTS區(qū)AT1R， Nox2，p67phox，NT表達(dá)較F1NF2N組明顯下降，ATRAP表達(dá)較F1NF2N組明顯升高，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。⑥Western blot結(jié)果顯示,與FSD組相比，F(xiàn)1NF2N組雌性子代大鼠NTS區(qū)AT1R蛋白表達(dá)明顯增加，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，而ATRAP，Nox2，p67phox， NT蛋白表達(dá)與FSD組相比無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。F1HF2N組