小蔓長春花內(nèi)生真菌的誘變及其發(fā)酵條件的優(yōu)化.pdf

1、本實驗以從小蔓長春花莖中分離得到的內(nèi)生真菌XM-J2為研究對象，經(jīng)HPLC檢測證實該菌株仍具有產(chǎn)長春胺的能力后，采用多種誘變方法對其進行了誘變，以獲得高產(chǎn)突變菌株。
　　 經(jīng)紫外線、He-Ne激光和NaNO2三種單因素誘變方法分別進行多次誘變后，確定出最佳誘變時間依次分別為：100s、20min和25min；用紫外線、激光、亞硝酸鈉和LiCl兩兩組合的復(fù)合誘變法處理，挑選出各處理中的優(yōu)勢菌株進行同批培養(yǎng)后，結(jié)合紫外分光光度和HP

2、LC檢測法，篩選出最高產(chǎn)的菌株為經(jīng)紫外線-激光復(fù)合誘變后的XM-UL-7-5突變株，其產(chǎn)長春胺能力達到1.194mg/L，比出發(fā)菌株的0.563mg/L提高了121.6％，菌絲干重達到6.41g/L，較出發(fā)菌株提高了62.3％。遺傳穩(wěn)定性實驗表明，該優(yōu)良性狀能夠穩(wěn)定遺傳。
　　 此外，本實驗還通過優(yōu)化培養(yǎng)條件的方法來提高菌株產(chǎn)量。以菌落的菌絲干重和長勢為指標(biāo)的固體培養(yǎng)和以菌株的生物量和產(chǎn)物含量進行比較實驗的液體培養(yǎng)，篩選出的最佳