RBM4α對(duì)雌激素受體α的調(diào)控機(jī)理.pdf

1、乳腺癌是一種發(fā)生在乳腺腺上皮組織的惡性腫瘤。近年來，乳腺癌已成為危害我們廣大女性朋友的重大疾病之一，它給女性帶來了極大的困擾和痛苦。一半以上的乳腺癌是雌激素受體(estrogen receptor，ER)陽性的。ERα是調(diào)控ER陽性的乳腺癌發(fā)生發(fā)展的關(guān)鍵性因子。ERα作為轉(zhuǎn)錄因子發(fā)揮作用，與其他相關(guān)的輔調(diào)節(jié)因子密不可分。這些輔調(diào)節(jié)因子一般可與ERα直接或間接的相互作用，調(diào)控ERα在細(xì)胞中的定位、ERα的表達(dá)等等。RNA結(jié)合蛋白4α(RN

2、A binding motif protein4α，RBM4α)是一種新近發(fā)現(xiàn)的抑癌蛋白，可以通過調(diào)節(jié)靶基因前體mRNA(pre-mRNA)的可變剪接發(fā)揮抑制作用。RBM4α是RBPs家族蛋白，其家族成員RBM39可以與ERα發(fā)生相互作用，調(diào)節(jié)ERα的轉(zhuǎn)錄活性。RBPs家族結(jié)構(gòu)具有很高的保守性，所以我的研究著手于RBM4α與ERα相互作用的檢測，探究其中的生物學(xué)意義。
　　本研究主要內(nèi)容包括：⑴在HEK-293T細(xì)胞和MCF7細(xì)胞

3、中，我們通過免疫熒光、哺乳動(dòng)物細(xì)胞雙雜交以及免疫共沉淀等實(shí)驗(yàn)，研究了RBM4α和ERα之間的相互作用。結(jié)果表明，在細(xì)胞核內(nèi)RBM4α和ERα發(fā)生相互作用。⑵在Hela細(xì)胞和MCF-7細(xì)胞中，我們通過蛋白質(zhì)印記實(shí)驗(yàn)檢測了RBM4α對(duì)ERα蛋白水平的影響，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，RBM4α以劑量依賴的方式下調(diào)ERα的蛋白水平，還發(fā)現(xiàn)RBM4α能夠縮短ERα的半衰期。最終我們檢測到RBM4α是通過促進(jìn)ERα的泛素化降解降低了其蛋白水平。⑶在Hela細(xì)胞