格拉司瓊對咯利普蘭致嘔吐、抗抑郁及增強學(xué)習(xí)記憶能力的影響.pdf

1、目的:咯利普蘭作為經(jīng)典的PDE4抑制劑,其抗抑郁、增強認知的功能早已被驗證,但惡心、嘔吐的消化系統(tǒng)不良反應(yīng)嚴重阻礙了開發(fā)利用的潛能。本課題旨在應(yīng)用5-HT3受體拮抗劑緩解或者消除咯利普蘭的胃腸道不良反應(yīng),評價格拉司瓊對咯利普蘭潛在致惡心嘔吐反應(yīng)的影響,同時考察格拉司瓊對咯利普蘭抗抑郁作用及增強空間學(xué)習(xí)記憶能力的影響,初步探討咯利普蘭聯(lián)合格拉司瓊給藥的可行性。
　　 方法
　　 (1)通過觀察咯利普蘭對氯胺酮/賽拉嗪誘導(dǎo)的

2、麻醉的昆明小鼠翻正反射恢復(fù)時間來間接評價PDE4抑制劑潛在致嘔吐作用,由此建立起評價PDE4抑制劑潛在致嘔吐作用的昆明小鼠模型。
　　 (2)雄性昆明小鼠72只,隨機分成6組,即:空白對照組,咯利普蘭0.5 mg·kg-1,咯利普蘭0.5 mg·kg-1+格拉司瓊0.05、0.5和5 mg·kg-1組,格拉司瓊0.5 mg·kg-1組,觀察咯利普蘭及聯(lián)合用藥組對氯胺酮/賽拉嗪誘導(dǎo)的麻醉小鼠翻正反射恢復(fù)時間來間接評價咯利普蘭及聯(lián)合

3、用藥后的潛在惡心嘔吐反應(yīng)。
　　 (3)雄性昆明小鼠72只,隨機分成6組,即:空白對照組,咯利普蘭0.5 mg·kg-1,咯利普蘭0.5 mg·kg-1+格拉司瓊0.05、0.5和5 mg·kg-1組,陽性對照草酸-S-西酞普蘭(escitalopram,ESC)10 mg·kg-1組。先分別i.p.生理鹽水或格拉司瓊,45 min后,s.c.注射60％PEG200(V/V)或咯利普蘭或ESC,45 min后,進行強迫游泳實驗以

4、及懸尾實驗,考察格拉司瓊對咯利普蘭抗抑郁作用的影響。
　　 (4)雄性昆明小鼠72只,隨機分成6組,即:空白對照組,咯利普蘭0.5 mg·kg-1,咯利普蘭0.5 mg·kg-1+格拉司瓊0.05、0.5和5mg·kg-1組,格拉司瓊0.5 mg·kg-1。組,先i.p.注射格拉司瓊或生理鹽水45 min后,s.c.注射咯利普蘭或其溶劑再過45 min后進行Morris水迷宮實驗,考察咯利普蘭聯(lián)合格拉司瓊對小鼠抑郁樣癥狀、空間學(xué)

5、習(xí)記憶能力的影響。
　　 結(jié)果
　　 (1)在建立昆明小鼠評價PDE4抑制劑潛在致嘔吐的模型中,不同劑量的咯利普蘭表現(xiàn)出不同的麻醉時間(F=3.462,P=0.024)?？瞻讓φ战M小鼠平均需要49 min才恢復(fù)翻正反射,給予不同劑量的咯利普蘭后恢復(fù)翻正反射需要的時間均縮短:咯利普蘭0.05 mg·kg-1組需要34.4±19.4 min(P=0.018),0.5 mg·kg-1時僅需要31.2±12.5 min(P=0.

6、004),而5mg·kg-1的麻醉時間稍長,為36.6±14.0 min(P=0.041)。
　　 (2)在評價聯(lián)合用藥潛在止嘔吐作用實驗中,不同組別表現(xiàn)出不同的麻醉時間(F=3.516,P=0.007)。與空白對照組相比,單獨注射咯利普蘭0.5mg·kg-1的小鼠麻醉時間從空白對照組的48 min縮短至30 min(P=0.001),聯(lián)合三種不同劑量格拉司瓊后,與單獨咯利普蘭組比較,麻醉時間分別為:39.5±15.5min(P

7、=0.092)、43.1±17.7 min(P=0.022)、42.1±16.6 min(P=0.033),而單獨使用格拉司瓊的麻醉時間為50 min,與空白對照組接近(P=0.687),單獨注射咯利普蘭組和合用三種不同劑量格拉司瓊四組間差異無統(tǒng)計學(xué)意義(F=1.930,P=0.139)。
　　 (3)在強迫游泳實驗中,不同組別的小鼠表現(xiàn)出不同的游泳不動時間(F=2.736,P=0.027)。注射溶劑的小鼠在強迫游泳不動時間平均

8、為182 s,單獨注射咯利普蘭為133 s(P=0.051)。合用不同劑量的格拉司瓊后,不動時間分別為136±66 s、93±36 s、132±64 s。這三組與單獨使用咯利普蘭組間差異無統(tǒng)計學(xué)意義(F=1.459,P=0.240)。在懸尾實驗中,不同組別的小鼠表現(xiàn)出不同的懸尾不動時間(F=2.750,P=0.030)。懸尾實驗中空白對照組小鼠不動時間平均為167 s,單獨給予咯利普蘭后小鼠的不動時間降低至116 s(P=0.035),

9、先注射三種不同劑量的格拉司瓊后給予咯利普蘭,各組的不動時間分別為90±33 s、114±36s、120±59 s。與單獨使用咯利普蘭比較,合并用藥后小鼠懸尾不動時間差異無統(tǒng)計學(xué)意義(F=1.112,P=0.361)。
　　 (4)Morris水迷宮實驗中,逃避潛伏期組間差異無統(tǒng)計學(xué)意義(F=1.165,P=0.168),穿越平臺次數(shù)組間差異有統(tǒng)計學(xué)意義(F=2.543,P=0.036),原平臺象限探索時間的比率組間差異有統(tǒng)計學(xué)意

10、義(F=5.067,P=0.001)。與空白對照組比較,單獨使用咯利普蘭組、格拉司瓊和咯利普蘭合用組小鼠第四天自入水點至平臺的逃避潛伏分別是31±24(P=0.047)、28±24(P=0.026)、31±25(P=0.054)、31±24(P=0.050)。單獨格拉司瓊不影響小鼠的逃避潛伏期(P=0.409)。單獨使用咯利普蘭組和聯(lián)合使用格拉司瓊各組之間差異無統(tǒng)計學(xué)意義(F=0.038,P=0.990)。在探索性實驗部分,注射溶劑的小

11、鼠在撤去平臺后穿越原平臺次數(shù)平均為1.7次,單獨格拉司瓊以及聯(lián)合不同劑量的格拉司瓊處理后各組穿梭次數(shù)組分別為3.9±2.5次(P=0.012)、3.3±2.3次(P=0.062)、3.8±2.2次(P=0.015)、3.5±2.1次(P=0.040)。單獨格拉司瓊與聯(lián)合使用格拉司瓊各組之間差異無統(tǒng)計學(xué)意義(F=0.175,P=0.913)。同樣的趨勢表現(xiàn)在原平臺象限探索時間的比率上,僅注射咯利普蘭后的平均比率從空白對照組的31％上升到4