海洋多糖藥物PSS新型口服制劑的制備及其藥代藥效學研究.pdf

1、隨著海洋資源的不斷開發(fā)，海洋多糖的生物活性及功能也正在不斷的被揭示，海洋藥物的研究越來越受到重視。藻酸雙酯鈉(PSS)是我國第一個海洋多糖類藥物，是我國海洋多糖類藥物研究的里程碑。臨床上PSS的常用劑型為片劑和注射液，注射液雖然藥效顯著，但患者注射給藥疼痛不便，且因個體差異存在一些不良反應。而片劑雖然服用方便，但因其分子量較大，存在口服生物利用度低的問題。此外，由于早期技術(shù)手段的制約，對PSS藥代動力學研究較少，結(jié)果存在一定的片面性。因

2、此，建立靈敏可靠的生物樣品中微量定量PSS的方法，考察其體內(nèi)的藥代動力學特性;并且開發(fā)制備新型口服制劑以改善PSS口服吸收，增強口服藥效具有重要的意義。
　　本論文建立了兩種血漿中微量定量PSS的方法，即熒光標記法和HPLC-柱后衍生法，并對PSS的大鼠體內(nèi)的藥代動力學特性進行研究比較。結(jié)果表明，兩種方法均具有靈敏度高、準確度高，結(jié)果準確可靠，適用于PSS體內(nèi)藥代動力學研究的特點。熒光標記法中熒光標記物的制備繁瑣耗時，且熒光標記不

3、太適用于人體藥代動力學研究;而HPLC-柱后衍生法具有操作簡便，不需要對樣品進行前期處理，靈敏度較高，且適用于人體藥代動力學研究的特點。綜合比較兩種體內(nèi)定量PSS方法，選用HPLC-柱后衍生法作為PSS的體內(nèi)藥代動力學研究方法。大鼠體內(nèi)藥代結(jié)果表明，PSS口服生物利用度較低，且吸收入血較慢，推測與其分子量較大，難以透過組織間隙和生物膜屏障有關(guān)。
　　納米技術(shù)是21世紀發(fā)展起來的用于改善蛋白質(zhì)、多肽、多糖類藥物口服吸收的新型制劑，因

4、其粒徑可達納米級，極易通過人體的毛細血管及膜屏障，可以有效改善大分子及難溶性藥物的口服吸收，提高其口服生物利用度。本論文以聚乳酸-羥基乙酸共聚物(PLGA)作為載體材料，采用雙乳化溶劑蒸發(fā)法（W1/O/W2）制備了PSS的納米制劑(PSS-NP)，并對其制備工藝進行優(yōu)化，制備得到的PSS-NP的平均粒徑為181.8 nm，zeta電位為-17.8 mV，載藥量為10.83％，包封率為75.80％。通過對PSS-NP在人工胃腸液中體外釋藥

5、特性進行研究，結(jié)果表明PSS-NP均歷經(jīng)先突釋后緩釋兩個階段，表明其載藥方式為表面吸附和內(nèi)部鑲嵌兩種，且PSS-NP具有較好的緩釋作用。
　　鑒于PSS口服藥效低，結(jié)合PSS自身結(jié)構(gòu)特點，推測在胃內(nèi)酸性環(huán)境下PSS可能會發(fā)生降解而失去有效活性基團，從而影響其口服藥效。因此，本論文比較了來源相同的PSS原料藥和片劑在人工胃腸液中分子量和體外APTT時間的變化。結(jié)果表明，PSS原料藥和片劑在人工胃液中隨時間延長分子量均顯著降低，而在人

6、工腸液中變化不大。此外，在人工胃液中隨著時間的延長，PSS體外APTT時間顯著減少。因此，推論PSS在胃內(nèi)酸性環(huán)境下會失去某些活性基團，分子量降低，從而影響PSS的口服藥效。為了避免PSS在胃酸性環(huán)境下降解失活，本論文在前期制備納米制劑的基礎上，制備其腸溶納米制劑。通過對三種不同腸溶包衣材料的比較，選用尤特奇Eudragit L30D-55作為制備PSS腸溶納米制劑的包衣材料，并設計單因素實驗優(yōu)化制備工藝，制備得到的腸溶PSS-NP的平

7、均粒徑為372.1 nm，zeta電位為-13.4 mV，包封率為68.78％，載藥量為8.79％。其在人工胃液內(nèi)2h累積釋藥百分率為8.38％，與PSS-NP(39.06％)相比，顯著降低了PSS在人工胃液內(nèi)的釋放，從而避免了胃內(nèi)酸性環(huán)境對PSS的降解失活。
　　采用HPLC-柱后衍生法對PSS、PSS-NP與腸溶PSS-NP進行體內(nèi)的藥代動力學特性研究比較。結(jié)果表明，PSS納米制劑和腸溶納米制劑均可有效提高PSS在血漿內(nèi)的有效

8、濃度，提高其口服生物利用度，且腸溶納米制劑效果更優(yōu)。此外，實驗發(fā)現(xiàn)，PSS納米制劑可以延長PSS在體內(nèi)的起效時間，具有一定的緩釋作用，而PSS腸溶納米制劑具有較好的腸部吸收特性，有效提高PSS腸部吸收累積百分率，吸收入血較快。同時，對PSS及其新型口服制劑—PSS-NP與腸溶PSS-NP的體內(nèi)藥效學進行評價，實驗結(jié)果表明，PSS納米制劑和PSS腸溶納米制劑與PSS原料藥相比可延長正常大鼠APTT作用時間，同時降低正常大鼠的血糖值;且能夠