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1、山東農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文源自SPF雞群內(nèi)源性ALVSD0501全基因序列鑒定分析及感染性分子克隆pSD0501的構(gòu)建姓名:孔義波申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別:碩士專(zhuān)業(yè):預(yù)防獸醫(yī)學(xué)指導(dǎo)教師:姜世金20080610源自SPF雞群內(nèi)源性ALV/SD0501全基岡鑒定分析及感染性分了:克隆pSD0501的構(gòu)建一列同源性在985%以上,全基因組序列同源性在991%以上,而與其他亞群代表株同源性相對(duì)較低,env基因同源性?xún)H為563%“915%。以測(cè)序完成的ALV/
2、SD0501株env基因序列為模板,設(shè)計(jì)引物進(jìn)行PCR擴(kuò)增,酶切,連入pGEX6P1載體,轉(zhuǎn)化BL21菌株,初步鑒定后,經(jīng)測(cè)序驗(yàn)證無(wú)誤,IPTG誘導(dǎo)表達(dá),SDSPAGE分析表明目的基因得到了比較高效的表達(dá),切膠回收原核表達(dá)目的蛋白,免疫小鼠,制備抗血清。為今后更加深入的研究工作奠定了必要的基礎(chǔ)。以測(cè)序完成的內(nèi)源性ALV/SD0501株全基因組cDNA為模版,采用PCR方法分5段擴(kuò)增出ALV/SD0501株的前病毒基因組,PCR產(chǎn)物順次連
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