CYP1A1、NQO1、EPHX1和GSTs基因多態(tài)性與膀胱癌易感性的關(guān)系.pdf

1、目的： 應(yīng)用相對(duì)的兩對(duì)引物-聚合酶鏈反應(yīng)技術(shù)(PCR-CTPP)和多重等位基因特異聚合酶鏈反應(yīng)技術(shù)(MAS-PCR)，建立可簡(jiǎn)單、準(zhǔn)確、快速、經(jīng)濟(jì)、大規(guī)模地檢測(cè)代謝酶基因多態(tài)性的方法。探討細(xì)胞色素P4501A1(CYP1A1)、依賴還原型輔酶Ⅰ/Ⅱ醌氧化還原酶1(NQO1)、環(huán)氧化物水解酶(EPHX1)和谷胱甘肽轉(zhuǎn)硫酶(GSTs)基因多態(tài)性與膀胱癌易感性的關(guān)系，以期為膀胱癌的早期診斷及防治提供理論依據(jù)。 方法：

2、采用病例對(duì)照研究方法，病例組選取2007年1月～2008年3月在溫州醫(yī)學(xué)院附屬第一醫(yī)院住院手術(shù)的膀胱腫瘤患者，均為首次發(fā)病入院，未經(jīng)化療、放療，并且無(wú)任何其他腫瘤病史，術(shù)后病理診斷均為膀胱移行細(xì)胞癌，共99例。對(duì)照組選取同期溫州醫(yī)學(xué)院附屬第一醫(yī)院健康體檢者，共100例，既往均無(wú)腫瘤史、癌前病變史，家族中無(wú)膀胱腫瘤病史。兩組均為溫州地區(qū)漢族人群，年齡、性別和吸煙狀況構(gòu)成均衡，均無(wú)職業(yè)暴露，具有可比性。使用DNA提取試劑盒提取外周血白細(xì)胞D

3、NA，針對(duì)CYP1A1 A4889G、NQO1 C609T、EPHX1 A416G和GSTP1 A313G基因多態(tài)性設(shè)計(jì)PCR-CTPP引物，針對(duì)GSTM1、GSTT1基因多態(tài)性設(shè)計(jì)MAS-PCR引物，優(yōu)化PCR反應(yīng)條件，凝膠電泳成像系統(tǒng)成像分析、判定基因型，DNA測(cè)序及重復(fù)檢測(cè)方法驗(yàn)證基因型準(zhǔn)確性。采用x2檢驗(yàn)、二分類非條件Logistic回歸分析、x2分割檢驗(yàn)等統(tǒng)計(jì)方法分析數(shù)據(jù)，明確上述基因多態(tài)性與膀胱癌易感性的關(guān)系。 結(jié)果

4、： 1.成功建立了CYP1A1 A4889G、NQO1 C609T、EPHX1 A416G、GSTM1、GSTT1和GSTP1 A313G基因型多態(tài)性的PCR-CTPP和MAS-PCR檢測(cè)方法。隨機(jī)選取的樣本，基因型DNA測(cè)序驗(yàn)證準(zhǔn)確率達(dá)100％，重復(fù)檢測(cè)驗(yàn)證準(zhǔn)確率亦達(dá)100％。CYP1A1 A4889G、NQO1 C609T、EPHX1 A416G和GSTP1 A313G的基因型在對(duì)照組中的分布均符合Hardy-Weinber

5、g平衡(P>0.05)。 2.NQO1 C609T和GSTM1基因型分布頻率在膀胱癌組和對(duì)照組之間的差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，攜帶NQO1609TT基因型的個(gè)體罹患膀胱癌的風(fēng)險(xiǎn)是攜帶609CC基因型個(gè)體的2.448倍(95％CI為1.125～5.326)，攜帶GSTM1(-)基因型的個(gè)體罹患膀胱癌的風(fēng)險(xiǎn)是攜帶GSTM1(+)基因型個(gè)體的2.041倍(95％CI為1.145～3.638)。CYP1A1 A4889G、EP

6、HX1 A416G、GSTT1和GSTP1 A313G基因型分布頻率在兩組間的差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。 3.NQO1 C609T和 EPHX1 A416G、NQO1 C609T和GSTM1、NQO1 C609T和GSTP1 A313G與EPHX1 A416G和GSTM1高、低?；蛐烷g的聯(lián)合頻率在病例組和對(duì)照組之間的差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，其兩高?；蛐偷膫€(gè)體罹患膀胱癌的風(fēng)險(xiǎn)是同時(shí)攜帶兩低?；蛐蛡€(gè)體的4

7、.181倍(95％CI為1.465～11.934)、16.684倍(95％CI為3.533～78.787)、3.767倍(95％CI為1.128～12.582)和2.783倍(95％CI為0.937～8.261)。 4.CYP1A1 A4889G、NQO1 C609T、EPHX1 A416G、GSTM1、GSTT1和GSTP1A313G基因型分布頻率在膀胱癌病理分級(jí)之間和臨床分期之間的差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

8、 結(jié)論： 1.PCR-CTPP和MAS-PCR檢測(cè)方法為可簡(jiǎn)單、準(zhǔn)確、快速、經(jīng)濟(jì)、大規(guī)模地檢測(cè)代謝酶基因多態(tài)性的較好方法。 2.NQO1 C609T和GSTM1基因多態(tài)性可能與膀胱癌的易感性相關(guān)，攜帶NQO1609TT和GSTM1(-)基因型的人群易患膀胱癌。 3.NQO1 C609T和EPHX1 A416G、NQO1 C609T和GSTM1、NQO1 C609T和GSTP1 A313G與EPHX1 A416G和