日糧n-6-n-3比和維生素E對公豬繁殖力的改善及其作用機(jī)理研究.pdf

1、公豬繁殖力不僅直接決定公豬站的經(jīng)濟(jì)效益，而且影響規(guī)?；i場母豬的繁殖性能。生產(chǎn)中精子活力低、畸形率高是公豬繁殖力降低的重要原因。日糧是影響公豬精液品質(zhì)的重要因素。研究證實(shí):日糧n-3多不飽和脂肪酸(poly unsaturated fattyacid，PUFAs)可改善公豬精液品質(zhì)，而不同n-3PUFA來源、添加量及持續(xù)作用時間下日糧n-3PUFAs對公豬繁殖力的改善并不一致;且日糧n-3PUFAs會增加精子膜脂質(zhì)過氧化敏感性，不利于公

2、豬繁殖力。日糧維生素E(vitamin E，VE)常用來緩解這種脂質(zhì)過氧化，但n-3PUFAs和VE的聯(lián)合添加使其作用效果并不明確且不穩(wěn)定。因此，本研究的目的是在研究不同日糧n-6∶n-3比和VE對公豬精液品質(zhì)、精子脂肪酸組成及抗氧化狀態(tài)影響的基礎(chǔ)上，篩選有利于公豬精液品質(zhì)改善的日糧n-6∶n-3比和VE，進(jìn)一步驗(yàn)證這些日糧n-6∶n-3比和VE對公豬精液品質(zhì)及繁殖力的改善，并通過精子膜結(jié)構(gòu)和功能的修飾及機(jī)體、精液中抗氧化狀態(tài)的調(diào)節(jié)來探

3、討其可能的作用機(jī)理，為富含n-3PUFAs的原料和VE在公豬營養(yǎng)中的應(yīng)用提供理論指導(dǎo)和技術(shù)支持。主要的研究內(nèi)容和結(jié)果如下:
　　第一部分研究日糧n-6∶n-3比和VE對公豬精液品質(zhì)、精子脂肪酸組成及抗氧化狀態(tài)的影響。試驗(yàn)選取48頭健康成熟的長白公豬，按照年齡(24.30±1.78月)和精液品質(zhì)接近的原則將48頭公豬隨機(jī)分為6組，每組8頭公豬，每頭公豬1個重復(fù)，單欄飼喂。試驗(yàn)以玉米-豆粕為主要原料配制等能等氮基礎(chǔ)日糧。采用3×2雙因

4、素設(shè)計，試驗(yàn)公豬每日飼喂2.5kg基礎(chǔ)日糧外，再分別飼喂60g豆油、45g豆油+15g魚油和60g魚油，形成3個n-6∶n-3比（14.4、6.6和2.2:高，中和低比率）日糧。每個比率的日糧分別添加200和400 mg/kg（低和高劑量）VE，形成6個試驗(yàn)組。測定第0、6、8、10、12和14周精液品質(zhì)。采集0W和8W血液和精液，用于測定精子脂肪酸組成，以及機(jī)體、精子和精清中的抗氧化狀態(tài)。試驗(yàn)結(jié)果顯示:
　　1)日糧n-6∶n-

5、3比顯著改變了精子脂肪酸組成。與高比率組相比，中比率和低比率組在試驗(yàn)第8周均顯著提高了精子二十二碳六烯酸(Docosahexaenoic acid，DHA)、總n-3PUFA含量(P＜0.05)，降低了精子二十二碳五烯酸（Docosapentaenoic acid，DPA）、總n-6PUFA含量和n-6∶n-3比(P＜0.05);總PUFA未受日糧處理的影響（P＞0.05）。
　　2)日糧n-6∶n-3比和VE顯著改變了公豬血清、

6、精子和精清抗氧化能力。試驗(yàn)第8周，中比率組較高比率和低比率組顯著提高了精清超氧化物歧化酶(Superoxidedismutase，SOD:88.2 vs66.2、72.6 U/mL)和總抗氧化能力（Total antioxidantcapacity，TAC:5.8 vs4.7、4.7 U/mL）(P＜0.05);與高比率組相比，中比率組對精子和血清丙二醛(malondialdehyde，MDA)含量無顯著影響（3.1 vs3.2 nmo

7、l/108sperm cells;2.7 vs3.2 nmol/mL，p＞0.05）;高劑量VE組較低劑量VE組顯著提高了血清、精子和精清中SOD，及血清和精清中TAC(P＜0.05)，同時顯著降低了精子MDA(3.1 vs3.7 nmol/108 sperm cells，P＜0.05)。
　　3)日糧n-6∶n-3比和VE顯著影響了公豬精子活力。在第8-14周時，中比率組顯著（第8、10和14周）（p＜0.05）或極顯著（第12

8、周）(P＜0.01)提高了直線運(yùn)動精子比例，改善了精子活力。在第8周，高劑量VE組較低劑量VE組極顯著改善了直線運(yùn)動精子活力（p=0.01）;在第10、12和14周時則有顯著改善(P＜0.05;P=0.05;P＜0.05)。
　　第二部分在第一部分試驗(yàn)的基礎(chǔ)上，研究日糧n-6∶n-3比和VE對公豬精子產(chǎn)出、精子形態(tài)特征和運(yùn)動能力、常溫保存后精子活力和性欲的影響。試驗(yàn)選取40頭杜洛克公豬，按照年齡（591.5±9.2 d）、體重（2

9、72.9±47.6 kg）和精液品質(zhì)接近的原則隨機(jī)分為4組，每組10頭公豬，每頭公豬1個重復(fù)，單欄飼喂。試驗(yàn)以玉米-豆粕為主要原料配制等能等氮基礎(chǔ)日糧。采用2×2雙因素設(shè)計，試驗(yàn)公豬每日飼喂2.5kg基礎(chǔ)日糧外，再分別飼喂60g豆油和45g豆油+15g魚油，形成2個n-6∶n-3比（14.4和6.6:高和低比率）日糧。每個比率的日糧分別添加200和400mg/kg（低和高劑量）VE，形成4個試驗(yàn)組。采精時記錄0、8、12和16周公豬性欲

10、;采精后分析0、8、12、16和20周公豬精子產(chǎn)出、精子形態(tài)特征和精子運(yùn)動能力及17℃常溫保存12h、36h、72h和120h后精子活力。試驗(yàn)結(jié)果表明:
　　1)0-8周時，日糧n-6∶n-3比和VE對精液量、精子密度和精子數(shù)、精子形態(tài)特征和運(yùn)動能力、常溫保存后精子活力和性欲無顯著影響(P＞0.05)。
　　2)12-20周時，與高比率組相比，低比率組顯著提高了第12、16和20周直線精子活力(P＜0.05)，精子直線運(yùn)動速

11、度(straight-line velocity，VSL)、平均路徑速度（average path velocity，VAP）和曲線速度（curvilinear velocity，VCL）（p＜0.05）;高劑量VE組較低劑量VE組顯著提高了第12和20周直線精子活力、VSL和VCL(P＜0.05)。
　　3)低比率組較高比率組顯著提高了第12、16和20周精子正常形態(tài)，降低了精子中部畸形(P＜0.05);高劑量VE組較低劑量VE

12、組顯著提高了第16和20周精子正常形態(tài)(P＜0.05)，顯著降低了第12、16和20周近端原生質(zhì)滴(P＜0.05)。
　　4)日糧n-6∶n-3比對第12、16和20周的常溫保存后精子活力無顯著影響。高劑量VE組較低劑量VE組顯著提高了12周（12h和36h）和20周(12h、36h、72h和120h)常溫保存后直線運(yùn)動活力（p＜0.05）。
　　第三部分研究日糧n-6∶n-3比和VE對公豬精子膜結(jié)構(gòu)、膜功能和抗氧化狀態(tài)的影

13、響及其改善公豬繁殖力的機(jī)理。試驗(yàn)動物、日糧及試驗(yàn)設(shè)計同第二部分試驗(yàn)。采集試驗(yàn)0、8、12、16和20周血液和精液，測定精子膜結(jié)構(gòu)和功能完整性、膜流動性、線粒體膜電位(mitochondrial membrane potential，MMP)、活性氧水平、精子脂肪酸組成、VE含量、SOD酶活、谷胱甘肽過氧化物酶活(Glutathione peroxidase，GSH-Px)、MDA含量和8-羥基脫氧鳥苷(8-hydroxy-2-deoxy

14、guanosine，8-OH dG)含量、精清TAC及血清和精清中SOD酶活、GSH-Px酶活和MDA含量。試驗(yàn)結(jié)果顯示:
　　1)日糧n-6∶n-3比顯著影響了公豬精子脂肪酸組成。與高比率組相比，低比率組顯著提高了12周和16周精子DHA、總n-3PUFA含量(P＜0.05)，降低了精子DPA、總n-6PUFA含量、DPA∶DHA比和n-6∶n-3比(P＜0.05)。
　　2)日糧n-6∶n-3比和VE顯著改變了公豬精子膜

15、結(jié)構(gòu)和功能。低比率組較高比率組顯著提高了12和16周精子膜結(jié)構(gòu)完整性、膜流動性(P＜0.05)、12周MMP、16周膜功能完整性(P＜0.05);高劑量VE組較低劑量VE組顯著提高了12和16周MMP(P＜0.05)及16周精子膜結(jié)構(gòu)完整性和流動性(P＜0.05)。
　　3)日糧n-6∶n-3比和VE顯著影響了公豬血清、精子和精清中抗氧化狀態(tài)。在第12、16和20周，低比率組和高劑量VE組分別顯著提高了血清SOD酶活和GSH-Px

16、酶活及精子SOD酶活(P＜0.05)，顯著降低了血清MDA含量和精子8-OHdG含量(P＜0.05)。高劑量VE組顯著提高了精子、精清GSH-Px酶活和精清SOD酶活和TAC，降低了精子活性氧水平和精子、精清MDA含量(P＜0.05)。日糧n-6∶n-3比對精子VE含量無顯著影響，而高劑量VE組較低劑量VE組顯著提高了精子維生素E含量(P＜0.05)。
　　綜上所述，本研究的結(jié)論是:
　　1)日糧n-6∶n-3比會影響公豬精