TNFα拮抗劑治療類風濕關節(jié)炎的藥物遺傳學研究.pdf

1、類風濕關節(jié)炎(rheumatoid arthritis，RA)是以關節(jié)滑膜慢性炎癥為病理基礎的自身免疫病。該病發(fā)病率高，致殘性強，危害大。RA患病率國外1-2％，國內為0.32-0.36％，我國約有500萬患者，病程5-10年致殘率為60％，晚期90％患者喪失社會勞動力和生活自理能力，它是目前致殘性最強的疾病之一。
　　 近年來的研究證實，腫瘤壞死因子α是類風濕關節(jié)炎(RA)發(fā)病和維持關節(jié)慢性滑膜炎癥反應的最重要的致炎性細胞因子

2、之一。TNF-α可作用于關節(jié)組織中的滑膜細胞、巨噬細胞、軟骨細胞和破骨細胞，使這些細胞活化并產生金屬蛋白酶、膠原酶、基膜溶解酶等，導致局部炎癥反應和血管翳形成，進一步引起軟骨破壞和骨侵蝕。因此，抑制TNF-α作用的生物制劑可有效改善RA病情，這一發(fā)現(xiàn)成為近年來RA治療的新里程碑。但是并非所有患者都有效，有30-40％的患者使用后沒有明顯療效，這些患者對TNFα拮抗劑沒有反應的原因至今不明。
　　 本研究隨機選取經(jīng)TNFα拮抗劑治

3、療的RA患者，療程6個月，運用國際公認的標準(ACR標準和DAS28)評估療效；采用序列特異性引物擴增法分別檢測TNF基因和TRAF1-C5基因11個SNP位點的多態(tài)性；利用藥物遺傳學基本原理，分別和聯(lián)合評價兩種基因多態(tài)性與療效的關系。以期建立預測TNFα拮抗劑療效和不良反應的遺傳和生化標記，指導RA合理用藥，提高規(guī)范化和個體化治療水平，減少費用。
　　 第一部分 TNFα拮抗劑治療類風濕關節(jié)炎療效分析
　　 目的：分析

4、TNF-α抑制劑治療RA患者的療效和安全性，并為進一步研究TNFα抑制劑治療RA的藥物基因組學(包括相關基因與RA的易感相關性、預測RA的病情輕重、以及預測個體使用TNF-α拮抗劑治療RA的療效等)篩選樣本。
　　 方法：100例接受穩(wěn)定劑量MTX或來氟米特至少已4周的RA患者參加本研究。RA患者按接受治療方法分為：單用MTX組，單用TNFα拮抗劑組和聯(lián)合使用MTX/來氟米特及TNFα拮抗劑組。在治療第0、4、8、12、24周進

5、行臨床病情評估、實驗室檢查、影象學檢查及不良事件觀察等。
　　 結果：在治療第24周時，單用MTX組達到美國風濕病學會療效評價標準(ACR20，ACR50，ACR70，ACR90)的患者的比例分別為50.0％，18.8％，6.3％和0％；單用TNFα拮抗劑組ACR比例分別為83.3％，58.3％，25.0％和8.3％；聯(lián)合使用MTX/來氟米特及TNFα拮抗劑組ACR比例分別為86.1％，70.8％，31.9％和6.9％。達到AC

6、R20、ACR50的患者比例在三組間有顯著性差異(P＜0.05)。各組DAS28評分比基線期下降分別為：1.30±0.25，2.64±0.26，2.83±0.16，TNFα拮抗劑組和聯(lián)合用藥組均比MTX組明顯下降，P值分別＜0.05和0.001，TNFα拮抗劑組和聯(lián)合用藥組兩組間無顯著性差異，P值＞0.05。
　　 結論：單用TNFα拮抗劑或聯(lián)合使用MTX/來氟米特及TNFα拮抗劑比單用MTX治療類風濕關節(jié)炎具有較好的療效。

7、r>　　 第二部分 TNF基因、TRAF基因與類風濕關節(jié)炎相關性的研究
　　 第一節(jié) TRAF1基因多態(tài)性與中國漢族類風濕關節(jié)炎患者疾病易感相關性
　　 目的：在漢族人群中對已有報道的與白種人類風濕關節(jié)炎(RA)易感相關的TRAF1基因的單核苷酸多態(tài)性進行檢測，分析其與漢族人群RA的易感相關性。
　　 方法：采用基質輔助激光解析電離飛行時間質譜方法對漢族類風濕關節(jié)炎患者(RA組，n=100)和健康人(對照組，n

8、=100)TRAF1基因的6個SNPs位點進行了基因分型，并使用Haploview軟件進行分析。
　　 結果：在中國漢族RA患者中位于TRAF1基因的六個位點中，rs4836834位點與健康對照組有顯著性差異(P＜0.05)，其他五個位點，包括已有報道與白種人RA易感相關的rs10818488位點，RA組與健康對照組相比均無顯著性差異(P＞0.05)。而連鎖不平衡及單倍體型頻率分析結果發(fā)現(xiàn)，rs7021049與rs7021880

9、，rs7021049與rs4836834，rs7021880與rs4836834之間存在較強的連鎖不平衡，三組連鎖不平衡關系單倍體頻率RA組與對照組均無顯著性差異。
　　 結論：TRAF1可能是漢族人RA的易感基因，但其單核苷酸多態(tài)性與白種人的表現(xiàn)有所不同。
　　 第二節(jié) TNF基因、TRAF基因多態(tài)性與TNFα拮抗劑治療類風濕關節(jié)炎療效相關性
　　 目的：檢測TNF基因和TRAF1基因11個SNP位點，分別和聯(lián)

10、合評價兩種基因多態(tài)性與TNFα拮抗劑治療類風濕關節(jié)炎療效的關系。
　　 方法：將84例使用TNFα拮抗劑治療類風濕關節(jié)炎患者按治療24周后療效是否達到ACR20分為無效組(15例)和有效組(69例)，使用基質輔助激光解析電離飛行時間質譜方法對其TNF基因和TRAF1基因的11個SNP位點進行基因分型，使用Haploview軟件進行分析。
　　 結果：11個位點中，TNF基因的rs1800629位點無效組的GG基因型頻率顯