干預(yù)OX40-OX40L軸對小鼠淋巴細胞增殖及分泌細胞因子的影響.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的:
　　 本研究觀察(1)OX40-OX40L相互作用對C57BL/6小鼠脾淋巴細胞增殖、細胞培養(yǎng)上清中IL-2、IL-4、INF-γ細胞因子含量及淋巴細胞中活化T細胞核因子C1(NFATcl)表達的影響,(2)用環(huán)孢素A(CSA)阻斷NFATcl后觀察OX40-OX40L對脾淋巴細胞增殖及細胞培養(yǎng)上清中IL-2、IL-4、INF-γ細胞因子表達的影響。探討OX40-OX40L相互作用是否通過NFATcl促進小鼠脾淋巴細胞活

2、化。
　　 方法:
　　 取C57BL/6小鼠脾淋巴細胞,以不同濃度刺激型OX40抗體上調(diào)OX40-OX40L相互作用,另以不同濃度抑制型OX40L抗體下調(diào)OX40-OX40L相互作用,不同時間點收獲細胞,應(yīng)用MTT法檢測小鼠脾淋巴細胞增殖;ELISA法檢測細胞培養(yǎng)上清中IL-2、IL-4、INF-γ細胞因子含量;以實時熒光定量PCR檢測細胞培養(yǎng)上清中INF-γ在mRNA水平的表達;流式細胞技術(shù)檢測淋巴細胞中NFATcl

3、蛋白表達水平。
　　 結(jié)果:
　　 (1)anti-OX40特異性刺激OX40-OX40L軸后,小鼠脾淋巴細胞增殖增強,分泌IL-2和INF-γ含量明顯增加,IL-4含量無明顯變化,淋巴細胞中NFATcl蛋白表達明顯上調(diào),anti-OX40(20μg/ml)時刺激作用最強,刺激時間48h最佳。
　　 (2)anti-OX40L特異性阻斷OX40-OX40L軸后,淋巴細胞增殖、分泌細胞因子IL-2和INF-γ含量及

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