Cr(Ⅵ)對果蠅S2細(xì)胞增殖影響及機(jī)制的研究.pdf

1、目的:本實(shí)驗(yàn)初步研究了Cr(Ⅵ)對果蠅S2細(xì)胞增殖的影響及其凋亡機(jī)制，為Cr(Ⅵ)誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡機(jī)制的深入研究提供了部分實(shí)驗(yàn)依據(jù)，期待為后期研究Cr(Ⅵ)誘導(dǎo)人類細(xì)胞凋亡機(jī)制提供理論依據(jù)。
　　 方法:含不同濃度Cr(Ⅵ)(0、50、100、200、400、800μmol/L)的培養(yǎng)基培養(yǎng)果蠅S2細(xì)胞;CCK8法檢測培養(yǎng)基中不同濃度Cr(Ⅵ)對果蠅S2細(xì)胞增殖的影響;熒光顯微鏡觀察細(xì)胞形態(tài)改變;流式細(xì)胞儀檢測S2細(xì)胞凋亡率;分光光

2、度法檢測培養(yǎng)基上清中SOD、MDA含量及Drice相對活化程度;熒光定量PCR檢測凋亡相關(guān)基因:P53、Drice、Debcl、Buffy的表達(dá)情況。
　　 結(jié)果:隨著Cr(Ⅵ)濃度升高，S2細(xì)胞的生存率逐漸降低并存在劑量依賴關(guān)系;Cr(Ⅵ)濃度不超過400μnmol/L時(shí)，S2細(xì)胞早期凋亡率隨著Cr(Ⅵ)濃度升高逐漸升高，Cr(Ⅵ)濃度為800μmol/L時(shí)，S2細(xì)胞早期凋亡率下降但壞死及晚期凋亡率顯著上升;Cr(Ⅵ)濃度為4

3、00μmol/L時(shí)明顯觀察到染色質(zhì)濃染、凋亡小體的形成，當(dāng)Cr(Ⅵ)濃度達(dá)到800μmol/L時(shí)，可明顯觀察到細(xì)胞崩解、壞死;隨著Cr(Ⅵ)處理濃度增加，SOD含量逐漸降低、MDA含量逐漸升高，Drice相對活化程度亦逐漸降低;400μmol/L組P53 mRNA表達(dá)是對照組1.85倍，Debcl mRNA表達(dá)是對照組0.05倍，Drice mRNA表達(dá)是對照組0.35倍，Buffy mRNA表達(dá)無明顯改變。
　　 結(jié)論:Cr(